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目 录 1

一、微生物实验准备 1

（一）无菌室的设置及无菌程度的检查方法 1

（二）玻璃仪器的清洁方法 2

（三）无菌室消毒方法及常用化学杀菌剂 4

（四）接种用具及制作 7

二、微生物实验基本操作技术 9

（一）培养基制备技术 9

1．培养基的种类 9

2．培养基的制备 11

（二）移植技术 20

1．火焰灭菌 20

2．火焰封口 21

3．各种移植操作技术 21

（三）染色技术 23

1．染色的目的及基本原理 23

2．染色剂的种类及结构 24

3．标本的制备及固定 24

（1）立克次体染色法 28

4．常用染色方法 28

（2）区别支原体与细菌L－型菌落染色法 29

（3）苯酚品红染色法 30

（4）亚甲蓝（美蓝）染色法 30

（5）负染法 31

（6）Giemsa染色法 31

（7）瑞特氏染色法 32

（8）革兰氏染色法（Gram staining） 33

（9）固酸染色法 34

（10）荧光染色法 35

（11）土壤细菌染色法 36

（12）科氏（Коз ловский）染色法 36

（13）螺旋体染色法 37

（14）霉菌染色法 37

三、微生物观察技术 41

实验1 原核微生物与真核微生物细胞核的观察 41

实验2 支原体形态观察 42

实验3 细菌个体形态观察及死活鉴别法 43

实验4 细菌芽孢的观察——简易法 44

实验5 细菌活体观察技术 46

实验6 鞭毛观察技术——改进法 49

实验7 细菌荚膜的观察 52

实验8 硫细菌贮藏物质的观察——压 54

片法 54

实验9 细菌细胞壁的观察 55

实验10细菌细胞中类脂粒的观察 56

实验11细菌中异染粒的观察 57

实验12细菌中晶体的观察………………………（59 ）实验13细菌菌落特征的观察 59

实验14放线菌自然生长状态的观察 61

实验15放线菌气丝与基丝的比较观察 64

实验16放线菌孢子丝与孢子的观察 65

实验17酵母菌形态及无性繁殖方式的观察 66

——水浸片 66

实验18酵母菌死活细胞的鉴别 67

实验19酵母菌子囊孢子的观察 69

实验20霉菌形态观察——琼脂片、凹片、 71

透析法 71

实验21霉菌巨大菌落的形成 73

四、微生物数量测定技术 76

实验1 管道循环水中自养菌数量的测定 76

——序列法 76

实验2 活细菌计数——改进法 81

实验3 厌氧微生物的计数法 84

实验4 酵母菌细胞数测定（Ⅰ）——计数器法 86

实验5 酵母菌细胞数测定（Ⅱ）——曲线法 87

实验6 污水中微生物总数的简易测定法 89

实验7 水中大肠杆菌群的简易测定法 91

实验8 微生物的显微测量 93

五、微生物分离培养技术 95

实验1 污染空气中微生物类群的分离 95

实验2 好氧微生物的分离培养法 97

实验3 好气性芽孢菌的分离方法 99

实验4 厌氧菌的分离培养法 100

实验5 发光菌的分离 102

实验6 单孢子简易分离技术 103

实验7 好气性自生固氮菌的分离 105

实验8 嫌气性自生固氮菌的分离 106

实验9 好气性纤维素分解菌的分离 107

实验10高温嫌气性纤维素分解菌的分离 109

实验11氨化细菌的分离 111

实验12硅酸盐细菌的分离 112

实验13放线菌的分离 113

实验14软腐病病菌的分离 115

实验15噬菌体的分离培养 117

选育 119

实验16微生物工业中抗噬菌体菌株的 119

实验17根腐病菌的分离 121

实验18红曲霉简易分离法 122

实验19乳及乳制品中微生物的分离 123

实验20乳制品中大肠菌群的快速检测 124

实验21食品微生物的分离 125

实验22粮食微生物的分离培养 128

实验23食品及谷物中产毒青、曲霉菌的分 130

离与鉴定 130

测定 142

实验24发酵食品所用菌种中黄曲霉毒素的 142

六、微生物的生理与代谢 148

实验1 微生物细胞物质成份的分离 148

实验2 细胞质膜的选择透性 151

实验3 藻类吞食酵母的观察 153

实验4 脱氢酶的作用 154

实验5 脱氢酶活力的测定 156

实验6 从氨基酸上脱离氨基的实验 158

实验7 L－天门冬酰胺酶活力的测定 160

实验8 转氨酶活力的测定 162

实验9 精氨酸的微生物测定法 166

实验10光与藻类的增殖 169

实验11细菌氮源的输入 170

实验12大肠杆菌代谢产物的测定 172

实验13发光细菌发光机制的研究 177

七、微生物育种 179

实验1 亚硝基甲基脲对细菌的诱变效应 179

实验2 亚硝酸对细菌的诱变效应 181

实验3 亚硝基胍对霉菌的诱变效应 182

实验4 微波对霉菌的诱变效应 185

实验5 快中子对放线菌的诱变效应 187

实验6 紫外线对酵母菌的诱变效应 189

实验7 营养突变株的选育 191

实验8 酵母菌杂交 195

实验9 曲霉菌异核体的形成 197

实验10原生质体融合 199

实验11放线菌的杂交育种 201

八、微生物与环境 204

实验1 个体发育与环境 204

实验2 群体变化与环境 205

实验3 微生物之间的相互作用 207

实验4 抗菌素的作用 208

九、常见常用微生物的保存技术 211

（一）细菌的保存 211

（二）放线菌的保存 216

（三）酵母菌的保存 217

（四）霉菌的保存 218

（五）噬菌体的保存 219

Ⅰ、显微镜的构造和工作能力 220

十、显微照相技术 220

（一）显微镜 220

Ⅱ、几种重要的显微镜 239

（二）显微照相 242

Ⅰ、显微照相设备 242

Ⅱ、黑自显微照相 244

Ⅲ、彩色显微照相 251

十一、电子显微镜微生物标本制备技术 257

（一）电子显微镜与光学显微镜的异同点 257

（二）微生物标本的制备 258

附录 262

一、微生物实验中应注意的问题 262

二、常用指示剂的配制及浓度 262

三、常用缓冲溶液的配制 263

四、常用试剂当量浓度的配制 266

五、用95％乙醇配制其他浓度酒精的简便方 267

法 267

六、微生物学中常用的计量单位 268