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第一章 液相色谱基础 1

液相色谱基本原理和方法 1

高效液相色谱发展简史 1

高效液相色谱分离原理 3

高效液相色谱的分类 3

高效液相色谱仪的基本构造 4

常用术语 8

色谱曲线 8

分离模式 9

仪器 10

固定相和流动相 11

色谱参数 12

其他概念 13

重要色谱参数的计算及测定方法 15

保留时间和保留体积 15

柱效能指标 16

谱带展宽 17

微柱液相色谱系统 18

泵系统 19

检测系统 19

进样系统 20

柱系统 20

多维液相色谱系统 21

二维液相色谱原理 21

二维液相色谱切换技术 21

常用液相色谱参考资料及相关网站 22

国内出版的图书 22

国内外相关杂志 23

参考文献 26

第二章 流动相 28

液相色谱流动相的特征 28

对流动相选择的一般要求 28

液相色谱流动相的物理性质 28

正相色谱流动相 33

溶剂强度 33

溶剂的选择性 34

反相色谱流动相 35

流动相的选择 35

流动相的pH值 36

离子交换色谱流动相 36

流动相的pH值 36

流动相的离子强度 37

体积排阻色谱流动相 37

凝胶渗透色谱的流动相选择 38

凝胶过滤色谱的流动相 38

常用缓冲溶液流动相及其配制方法 38

缓冲溶液流动相的配制程序 38

常用缓冲液的配制 39

液相色谱流动相常见问题 42

流动相的脱气 42

流动相的过滤 42

流动相的贮存 43

卤代有机溶剂应特别注意的问题 43

参考文献 43

第三章 色谱柱 44

色谱柱结构与性能评价 44

色谱柱的分类 44

色谱柱结构 44

色谱柱的评价 45

液相色谱填料基质 47

硅胶微粒 48

多孔聚合物 49

石墨化炭填料 49

化学键合固定相 50

正相色谱固定相 51

几种常用的正相色谱固定相 51

常见的商品极性化学键合相 52

反相色谱固定相 54

硅胶基质反相色谱固定相 54

有机高分子类型的反相色谱填料 54

强极性化合物分离反相色谱固定相 55

全氟烷基键合固定相 56

离子交换色谱固定相 56

多糖基质离子交换色谱固定相 57

聚合物基质的离子交换色谱固定相 58

体积排阻色谱固定相 62

无机基质凝胶 62

高聚物类型的凝胶渗透色谱填料 64

高聚物类型的凝胶过滤色谱填料 64

商品凝胶色谱填料信息 67

手性色谱固定相 67

手性固定相的分类 67

商品手性固定相信息 69

其他类型HPLC固定相 72

疏水性相互作用固定相 72

高效亲和色谱固定相 72

灌流色谱固定相 75

高聚物型离子色谱填料 75

膜基质 75

HPLC整体柱 76

色谱柱常见问题 76

键合硅胶固定相的稳定性 76

色谱柱寿命与使用条件 77

保留值与选择性变化 78

保留值与分离度重现性变化 78

色谱峰拖尾 79

色谱柱的再生 79

参考文献 80

第四章 仪器系统 81

输液系统 81

输液泵的种类与原理 81

气动放大泵 81

螺旋注射泵 82

隔膜泵 82

往复式柱塞泵 82

梯度洗脱装置 84

梯度混合器 84

梯度滞后体积 84

商品液相色谱输液泵的指标 85

液相色谱输液系统常见问题 85

进样系统 87

进样阀 87

自动进样器 88

自动进样器常见问题和解决办法 90

检测器 90

紫外检测器 90

二极管阵列检测器 95

荧光检测器 97

示差折光检测器 99

蒸发光散射检测器 101

质谱检测器 104

电化学检测器 106

其他类型的液相色谱检测器 110

色谱配件 111

管路与连接件 111

连接件 113

其他配件 114

参考文献 114

第五章 定性定量方法 115

液相色谱定性分析 115

利用已知标准样品定性 115

利用检测器的选择性定性 115

利用紫外检测器全波长扫描定性 116

利用保留值规律定性 117

联用技术结合定性 118

定量分析方法 118

准确度、精密度和线性范围 118

检测限和定量限 119

信号的测量 119

峰高与峰面积定量 120

定量方法 120

痕量组分定量分析方法 124

参考文献 125

第六章 样品预处理 126

概述 126

液-液萃取 128

液-液萃取的基本操作 129

液-液萃取溶剂的选择 129

液-液萃取常用装置 130

固相萃取 131

固相萃取的原理及特点 131

固相萃取常用的吸附剂 131

洗脱剂 133

固相萃取装置及操作 133

固相微萃取 134

膜分离 136

膜分离原理 137

膜的分类 137

膜分离过程的类型及特点 137

膜分离装置 137

膜分离技术存在的问题及解决方法 138

衍生化技术 139

衍生化作用与反应要求 139

柱前衍生化 140

柱后衍生化 140

紫外衍生化 140

荧光衍生化 143

参考文献 144

第七章 液相色谱方法发展 145

分离方法的建立 145

样品的性质 145

分离的目的 145

建立分离方法 146

有机残留物确认方法 149

常见问题 149

液相色谱分析方法的论证与完善 149

准确度 150

精密度 150

线性 151

范围 151

检测限和定量限 151

专属性 151

抗耐性 152

系统适用性 152

论证结果和最终方法的文件形成 152

参考文献 153

第八章 生物样品谱图集 156

肽和蛋白质的分离谱图 156

标准蛋白分离谱图 156

用于分子量标记的蛋白质的分离谱图 157

乳清蛋白质的分离谱图 157

标准蛋白分离谱图 157

人血清中蛋白的分离谱图 158

木瓜蛋白酶的分离谱图 158

抗生素蛋白的分离谱图 158

胰凝乳蛋白酶的分离谱图 159

碳酸酐酶等蛋白质分离谱图 159

胰凝乳蛋白酶A等蛋白质分离谱图 159

醛缩酶等蛋白质的分离谱图 160

大豆中脂肪氧化酶的分离谱图 160

胶原质消化物与BSA的分离谱图 160

BSA及其二聚体和三聚体分离谱图 161

小鸡白蛋白（粗品）的分离谱图 161

粗脂肪氧化酶分离谱图 161

粗过氧化氢酶的分离谱图 162

粗己糖激酶的分离谱图 162

人血清的分离谱图 162

人胰蛋白酶消化物中免疫球蛋白G（IgG）的分离谱图 163

伴刀豆球蛋白A等蛋白质的分离谱图 163

血浆和血清中胆红素的分离谱图 163

苯基硫脲衍生氨基酸的分离谱图 164

氨基酸分离谱图 164

NBD衍生氨基酸分离谱图 165

2，4-二硝基氟苯柱前衍生测定18种氨基酸 165

17种氨基酸分离谱图 166

18种氨基酸的分离谱图 166

ELSD检测氨基酸的分离谱图 167

SinoChrom柱分离四种氨基酸的谱图 167

犬尿氨酸的分离谱图 167

羟脯氨酸异构体的分离谱图 168

14种未衍生氨基酸的分离谱图 168

17种未衍生氨基酸标准混合溶液的HPLC-ELSD色谱图 168

标准氨基酸衍生物的色谱分离图（a）及质谱总离子流图（b） 169

精氨酸类物质的分离谱图 169

烟酸及其衍生物的分离谱图 170

核酸碱的分离谱图 170

18种核苷及其碱的分离谱图 170

19种核苷酸的分离谱图 171

寡核苷酸分离谱图 171

核苷酸分离谱图（1） 171

核苷酸分离谱图（2） 172

环核苷酸分离谱图 172

腺嘌呤与吡啶核苷酸类物质的分离谱图 172

丙氨酸小肽的分离谱图 173

核苷酸的分离谱图 173

核糖核苷酸与环式核苷酸的分离谱图 173

十二种核苷酸的分离谱图 174

糖核苷酸的分离谱图 174

六种肽的分离谱图 174

碱性肽的分离谱图 175

用酸性及碱性洗脱液分离寡肽 175

寡肽的分离谱图 176

二肽的分离谱图 176

高半胱氨酸与谷胱甘肽的分离谱图 176

垂体后叶催产素等肽的分离谱图 177

亲水性小肽的分离谱图 177

极性小肽的分离谱图 177

血清中胆红素的分离谱图 178

酪蛋白磷酸肽的分离谱图 178

太子参中环肽类化合物的HPLC图（a）和HPLC／ESI-TOF-MS总离子流图（b） 178

游离霉酚酸及其代谢物分离谱图 179

人体主要乳蛋白的分离谱图 179

金属硫蛋白分离谱图 180

第九章 中草药样品谱图集 181

安神胶囊中五味子醇甲分离 181

芍药苷分离谱图 181

欧前胡素分离谱图（1） 181

欧前胡素分离谱图（2） 181

腺苷分离谱图 182

橙皮苷分离谱图 182

补骨脂素分离谱图（1） 182

补骨脂素分离谱图（2） 182

重楼皂苷分离谱图 183

薯蓣皂苷原分离谱图 183

紫丁香苷分离谱图 183

大黄分离谱图 184

靛玉红分离谱图 184

丹酚酸B分离谱图 184

大黄素与大黄酚分离谱图 185

阿魏酸分离谱图 185

梓醇分离谱图 185

葛根素分离谱图 186

甘草（甘草苷）分离谱图 186

甘草（甘草酸）分离谱图 186

小檗碱分离谱图（1） 187

小檗碱分离谱图（2） 187

小檗碱分离谱图（3） 187

荷叶碱分离谱图 188

人参皂苷Rg1，Re的分离谱图 188

人参皂苷分离谱图（1） 188

人参皂苷分离谱图（2） 189

人参皂苷分离谱图（3） 189

三七皂苷与人参皂苷分离谱图 189

人参皂苷的HPLC分离谱图（a）和总离子流色谱图（b） 190

黄芪甲苷分离谱图 190

苦参碱分离谱图 191

六味地黄丸（丹皮酚）分离谱图 191

六味地黄丸（马钱苷）分离谱图 191

芦荟苷分离谱图 192

槲皮素分离谱图 192

麻黄碱分离谱图 192

蔓荆子黄素分离谱图 193

丹皮酚分离谱图 193

丁香酚分离谱图 193

木香烃内酯分离谱图 194

山柰素分离谱图 194

胆红素分离谱图 194

秦皮素分离谱图 195

青藤碱分离谱图 195

忍冬藤中绿原酸分离谱图 195

松果菊苷分离谱图 196

桂皮醛分离谱图 196

芦丁分离谱图 196

蛇床子素分离谱图 197

次野鸢黄素分离谱图 197

绿原酸分离谱图 197

七叶皂苷分离谱图 198

绿原酸与芦丁分离谱图 198

土荆皮乙酸分离谱图 198

槲皮素与山柰素分离谱图 199

没食子酸分离谱图 199

熊果酸分离谱图 199

熊果酸与齐墩果酸分离谱图 200

仙茅苷分离谱图 200

川续断皂苷分离谱图 200

蒙花苷分离谱图 201

银杏叶提取物分离谱图 201

菝葜皂苷原分离谱图 201

六味地黄丸中九种常见化学成分的总离子流色谱图（a）和紫外色谱图（b） 202

伞形科草本植物中当归的分离谱图 202

双醋瑞因的分离谱图 203

甘草苷与甘草酸的分离谱图 203

大黄素、大黄酸与芦荟大黄素的分离谱图 203

槲皮素与山柰酚的分离谱图 204

四种黄酮类化合物的分离谱图 204

保和丸中5种有机酸的分离谱图 204

甘草酸分离谱图 205

野菊花绿原酸的分离谱图 205

芦荟中低分子量有机酸的分离谱图 205

桑叶中1-脱氧野尻霉素的分离谱图 205

马兜铃的色谱分离谱图（a）及质谱总离子流图（b） 206

齐墩果酸分离谱图 206

京尼平苷酸的分离谱图 206

苍术分离谱图 206

茯苓中三萜成分的分离谱图 207

阿魏酸与藁本内酯分离谱图 207

黄芩中类黄酮的HPLC-UV色谱图（a）及总离子流图（b） 208

山楂中类黄酮分离谱图 209

莲心碱、异莲心碱及甲基莲心碱的分离谱图 209

第十章 天然产物及食品添加剂谱图集 210

饮料中维生素的分离谱图 210

熊果苷及相关化合物的分离谱图 210

软饮料中天冬氨酰苯丙氨酸甲酯的分离谱图 210

胡萝卜素的分离谱图 211

生物碱的分离谱图 211

儿茶酚分离谱图 211

儿茶酚分离谱图 212

着色剂分离谱图 212

消毒剂分离谱图 212

黄烷酮葡糖苷的分离谱图 213

类黄酮分离谱图 213

食品防腐剂分离谱图 213

有机酸分离谱图 214

芍药醇分离谱图 214

甾醇类分离谱图 214

甜菊苷与甜菊糖双苷A 215

生育酚（维生素E）的分离谱图 215

人血清中维生素A与α-生育酚（维生素E）的分离谱图 215

β-胡萝卜素谱图 215

食品中维生素的分离谱图 216

营养饮料分析谱图 216

甾族化合物分离谱图 216

生物碱分离谱图 217

食品稳定剂的分离谱图 217

橙皮苷分离谱图 217

防腐剂分离谱图 218

食品中苯甲酸、山梨酸、羟苯甲酯与羟苯丙酯防腐剂的分离谱图 218

蝶呤的分离谱图 218

磷脂的分离谱图 218

β-胡萝卜素分离谱图 219

类固醇分离谱图 219

11种类固醇的分离谱图 219

类固醇的分离谱图 220

果汁中糖的分离谱图 220

三嗪与苯脲的分离谱图 220

软饮料添加剂的分离谱图（1） 221

软饮料添加剂的分离谱图（2） 221

饮料中香料的分离谱图 221

三嗪类除草剂的分离谱图 222

酒中有机酸的分离谱图 222

果汁的分离谱图 222

运动饮料的分离分析谱图 222

葡萄糖浆的分离分析谱图 223

发酵产品的分离分析谱图 223

色拉中杀虫剂的分离谱图 223

果汁和蜂蜜中糖类的分离谱图 224

酸奶中糖类的分离谱图 224

迷迭香酸的分离谱图 224

羊肝中三嗪类除草剂的分离谱图 225

复杂基质中类胡萝卜素的分离谱图 225

维生素K类物质的分离谱图 225

高密度脂蛋白中磷脂酰乙醇的分离谱图 226

游离氨基酸分离谱图 226

消毒剂中苯扎氯铵的分离谱图 226

消毒剂中的4种季铵盐的分离谱图 227

着色剂、甜味剂与防腐剂的分离谱图 227

染发剂中染料半成品（氨基酚类化合物）的分离谱图 228

柑橘类黄酮的分离谱图 228

类黄酮分离谱图 228

大豆异黄酮分离谱图 229

五氯酚分离谱图 229

N-甲基氨基甲酸酯类农药及其代谢产物的分离谱图 229

氨基甲酸酯类农药的总离子流色谱图 230

莠去津及其主要降解产物分离谱图（a）及质谱总离子流图（b） 230

三种一氯酚异构体的分离谱图 231

饮料与咖啡中咖啡因分离谱图 231

化妆品中美白成分分离谱图 231

杀螟硫磷与蚊蝇醚分离谱图（1） 232

杀螟硫磷与蚊蝇醚分离谱图（2） 232

四种杀虫剂分离谱图 232

四种杀虫剂的TIC及EIC／MS色谱图 233

六种杀真菌剂分离谱图 233

邻苯二甲酸酯类与苯甲酸酯类物质的分离谱图 234

维生素H分离谱图 234

水溶性维生素的分离谱图 234

维生素B的LC／UV分离谱图（a）与LC／MS-MRM谱图（b） 235

茶碱与乙羟茶碱分离谱图 236

安息香酸与山梨酸分离谱图 236

有机氯农药分离谱图 237

五种农药及其代谢物分离谱图 237

酚醛树脂类化合物的分离谱图 237

圣草酚分离谱图 238

胆固醇及其氧化产物的总离子流图 238

黄酮醇分离谱图 238

香草醛分离谱图 239

玉米赤霉烯酮及其代谢物总离子流图 239

玉米赤霉烯酮及其代谢物总离子流图 239

第十一章 生化医药类样品谱图集 240

肾上腺皮质类固醇的分离谱图（1） 240

肾上腺皮质类固醇的分离谱图（2） 240

黄曲霉毒素的分离谱图 241

黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的分离谱图 241

生物碱的分离谱图 241

罂粟生物碱的分离谱图 242

尿囊素与水溶性维生素的分离谱图 242

镇痛药分离谱图 242

雄激素的分离谱图 243

血管紧缩素分离谱图 243

抗心律失常药物的分离谱图 243

抗生素的分离谱图（1） 244

抗生素的分离谱图（2） 244

治疗艾滋病（HIV）药物的分离谱图 244

HIV非核苷逆转录酶抑制剂与蛋白酶抑制剂分离谱图 245

苯甲酸衍生物的分离谱图 245

钙拮抗剂的分离谱图 245

强心苷的分离谱图 246

头孢菌素抗生素的分离谱图 246

头孢菌素C的分离谱图 246

生药（葡糖苷）的分离谱图 247

利尿药物的分离谱图 247

蜕皮激素的分离谱图 247

雌激素分离谱图 248

雌激素与黄体酮的分离谱图 248

16种激素分离谱图 248

酚类环境雌激素分离谱图 249

真菌性雌激素的分离谱图 249

植物性雌激素的分离谱图 249

天然雌激素与烷基酚类雌激素的分离谱图 250

雌激素分离谱图 250

雌激素与孕激素分离谱图 251

酚类雌激素的分离谱图 251

酚类环境雌激素的总离子流色谱图 252

己烯雌酚的分离谱图 252

雌激素分离谱图 252

雌二醇分离谱图 253

胰岛素的分离谱图 253

L-抗坏血酸与异抗坏血酸的分离谱图 253

局部麻醉剂的分离谱图 254

萘啶酸抗菌药物的分离谱图 254

青霉素抗菌药物的分离谱图 254

磺胺类药物的分离谱图 255

退热药物的分离谱图 255

抗癌药物的分离谱图 255

消炎药物的分离谱图 256

普鲁卡因胺的分离谱图 256

甲基黄嘌呤类药物的分离谱图 256

局部麻醉剂的分离谱图 257

磺胺的分离谱图 257

巴比妥酸盐类的分离谱图 257

柴胡皂苷分离谱图 257

多胺及其乙酰基衍生物的分离谱图 258

安非他明及其衍生物的分离谱图 258

茴香醚（苯甲醚）的分离谱图 258

碱性药物的分离谱图 259

β-阻断药的分离谱图 259

麻黄素的分离谱图 259

左旋四咪唑的分离谱图 259

麻醉剂的分离谱图 260

人血清中三种酰胺类局部麻醉药的分离谱图 260

人尿液中三种局部麻醉剂的分离谱图 260

抗痉挛药物的分离谱图 260

精神抑制药物的分离谱图 261

肌肉松弛药物的分离谱图 261

四环素的分离谱图 261

绿原酸的分离谱图 261

绿原酸与黄芩苷分离谱图 262

黄嘌呤的分离谱图 262

类固醇的分离谱图 262

类固醇衍生物的分离谱图 263

氯林肯霉素的分离谱图 263

血管紧缩素分离谱图 263

青霉素的分离谱图 264

普鲁卡因胺的分离谱图 264

卡马西平（酰胺咪嗪）的分离谱图 264

治疗疟疾药物的分离谱图 265

甲酸盐流动相毒品的分离分析谱图 265

醋酸盐流动相毒品的分离谱图 265

磷酸盐流动相毒品的分离谱图 265

毒品混合物的分离分析谱图 266

吗啡与纳洛芬的分离谱图 266

利多卡因与阿密曲替林的分离谱图 266

降压利尿药的分离谱图 266

降压药替米沙坦的分离谱图 267

消炎药物的分离谱图 267

头孢菌素抗生素的分离谱图 267

扑尔敏与阿密曲替林的分离谱图 267

镇咳药中成分的分析谱图 268

三环抗抑郁药的分离谱图 268

嘌呤碱的分离谱图 268

药用植物中甘草甜素的分离谱图 269

药用植物中麻黄碱的分离谱图 269

血浆中尿囊素的分离谱图 269

手性药物扑尔敏分离谱图 270

人血浆中苯那普利与其代谢物苯那普利拉的分离谱图 270

咖啡因及其五种主要代谢物的色谱分离谱图（a）及质谱总离子流图（b） 270

可可碱、茶碱与咖啡因分离谱图 271

6-苄基腺嘌呤的分离谱图 271

扎来普隆分离色谱图 271

奥美拉唑分离谱图 271

左氧氟沙星分离谱图 272

左氧氟沙星分离谱图 272

盐酸左氧氟沙星的分离谱图 272

蒿甲醚及其活性代谢物双氢青蒿素的分离谱图 272

甲氨蝶呤分离谱图 273

脱氧麻黄碱及其代谢物安非他明的分离谱图 273

羟甲基糠醛与α-酮戊二酸的分离谱图 273

聚醚类离子载体抗生素总离子流图（a）及EIC谱图［（b）～（e）］ 274

抗生素分离谱图 274

神经传递素分离谱图 275

阿巴卡韦、齐多夫定分离谱图 275

核苷逆转录酶抑制剂分离谱图 275

非核苷逆转录酶抑制剂与蛋白酶抑制剂分离谱图 276

阿莫西林与甲硝哒唑分离谱图 276

扑热息痛与aceclofenac分离谱图 276

番茄红素分离谱图 277

参考文献 277