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第一篇 细胞工程实验基础知识 2

一、实验室规章制度与规范 2

二、细胞工程基本实验室操作技术 6

三、细胞工程实验报告的书写 14

第二篇 植物细胞工程实验 18

实验一 植物培养基的配制及灭菌 18

实验二 培养材料的灭菌和接种及愈伤组织的诱导和分化 23

实验三 叶组织诱导不定芽——烟草和百合快速繁殖 28

实验四 葡萄离体茎段快速繁殖 31

实验五 马铃薯茎段快繁和微型薯生产 34

实验六 苜蓿和胡萝卜体细胞胚状体诱导 38

实验七 马铃薯茎尖培养和脱毒 42

实验八 烟草叶片单细胞分离和培养 46

实验九 烟草细胞悬浮培养 51

实验十 烟草体细胞原生质体分离、活力测定和培养 55

实验十一 马铃薯体细胞杂交——原生质体的化学融合 61

实验十二 马铃薯体细胞杂交——原生质体的电融合 66

实验十三 植物花粉发育时期和生活力鉴定 70

实验十四 烟草花粉和花药培养 75

实验十五 小麦幼胚和水稻成熟胚培养 79

实验十六 葡萄试管苗的生长抑制剂保存 82

实验十七 植物愈伤组织和茎尖超低温保存 85

实验十八 农杆菌介导法获得转基因烟草植株 91

实验十九 基因枪法获得转基因烟草植株 94

第三篇 动物细胞工程实验 100

实验二十 动物细胞工程实验常用液体的配制 100

实验二十一 小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察 108

实验二十二 小鼠超数排卵及输卵管卵母细胞采集与结构观察 111

实验二十三 小鼠植入前不同发育阶段胚胎采集与结构观察 116

实验二十四 小鼠胎儿成纤维细胞原代培养与传代培养 121

实验二十五 小鼠胎儿成纤维细胞饲养层制备 125

实验二十六 小鼠胎儿成纤维细胞活性检测 127

实验二十七 体外培养细胞生长曲线测定 129

实验二十八 体外培养细胞染色体分析 132

实验二十九 动物细胞融合与融合细胞的选择培养 136

实验三十 小鼠胚胎移植 141

实验三十一 家兔超数排卵及胚胎移植 146

实验三十二 羊超数排卵及胚胎移植 150

实验三十三 体外培养细胞的冻存与解冻复苏 156

实验三十四 小鼠胚胎冷冻、解冻与冻后活力检测 159

实验三十五 小鼠输卵管卵母细胞体外受精 162

实验三十六 小鼠胚胎体外培养 165

实验三十七 牛卵巢卵母细胞体外成熟、体外受精与受精卵体外培养 167

实验三十八 小鼠胚胎干细胞分离与克隆 170

实验三十九 小鼠胚胎分割（演示） 174

实验四十 细胞核移植器械的制作及小鼠胚胎细胞核移植（演示） 178

实验四十一 转基因细胞的制备（脂质体转染法） 184

实验四十二 人工诱导小鼠卵母细胞孤雌发育 187

附录Ⅰ 植物培养基成分表 191

附录Ⅱ 动物细胞工程常用试剂配制 200

附录Ⅲ 实验小鼠的特性及饲养管理 208

主要参考文献 217