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第一章 绪论 1

一、农业生物技术的概念、内容和性质 1

二、农业生物技术发展简史 3

三、农业生物技术在国民经济发展中的作用 5

第二章　植物组织与细胞培养 8

第一节　植物细胞全能性及一些基本概念 9

一、植物细胞全能性 9

二、细胞分化、脱分化与再分化 9

三、影响细胞脱分化和再分化的因素 10

四、器官发生和胚状体发生 10

第二节　培养基成分与培养基配制 11

一、培养基 11

二、培养基的配制 13

第三节　实验室设备与培养技术 14

一、实验室设置与配备 14

二、培养技术 15

第四节　培养技术实例 17

一、细胞培养 17

二、原生质体分离与培养技术 21

三、单倍体培养 24

四、合子胚（幼胚）培养 29

五、植物脱毒技术-茎尖培养 32

六、种质保存 34

第三章 DNA重组技术基本原理 36

第一节　分子克隆的工具酶 36

一、限制性内切酶 36

二、连接酶 40

三、聚合酶 41

四、其它修饰酶 44

第二节　分子克隆的常用载体 46

一、质粒载体 46

二、λ噬菌体载体 49

三、其它载体 51

第三节　核酸的分离与制备 51

一、质粒DNA的分离 51

二、植物总DNA的提取 52

三、动物总DNA的提取 53

四、动、植物细胞总RNA的提取 53

五、核酸的分子杂交 54

第四节　DNA文库的构建及筛选 55

一、cDNA文库的构建 55

二、基因组文库的构建 57

三、基因文库的筛选 57

第五节 DNA序列分析 58

一、Sanger的双脱氧链终止法 58

二、DNA测序技术的进展 60

第六节 聚合酶链反应及其应用 62

一、PCR原理 62

二、PCR反应成分 62

三、PCR相关的技术及应用 65

第四章 植物基因工程基本原理 68

第一节 目的基因（DNA片段）的克隆 68

一、基因的结构及表达调控 68

二、基因表达的调控 74

三、基因的分离 76

第二节　基因的改造及构建 81

一、基因编码区的改造 81

二、基因的构建 82

第三节　基因转化 82

一、农杆菌介导的基因转化 83

二、DNA直接吸收转化 88

第四节　转基因植物的分子分析 91

一、核酸杂交分析 91

二、Western杂交技术 93

三、其它分析技术 93

第五节　常用的选择标记和报导基因 95

一、npt-II基因 95

二、bar基因 95

三、uidA基因 96

四、GFP基因 96

第五章 植物抗病虫基因工程分子基础 98

第一节　植物抗病分子生物学 98

一、植物抗病机制 99

二、植物-病原物互作 101

第二节　植物病毒分子生物学 107

一、植物病毒的侵染 107

二、植物病毒基因组结构及基因表达 108

三、病毒在寄主细胞内增殖 113

第三节　植物抗病基因工程 116

一、植物抗病毒基因工程 116

二、植物抗真菌基因工程 120

三、植物抗细菌基因工程 122

第四节　植物抗虫分子基础及常用的抗虫基因 123

一、植物抗虫机制 123

二、植物抗虫基因 124

三、非植物来源的抗虫基因及其利用 127

第六章 基因工程与植物性状改良 132

第一节 改良农产品品质 133

一、储藏蛋白质 133

二、储藏淀粉 135

三、储藏脂肪 135

第二节　提高农作物产量 137

一、光合作用 137

二、雄性不育基因工程 138

第三节　改进植物的逆境适应性 140

一、抗低温基因工程 141

二、抗盐抗旱基因工程 142

三、抗早熟抗衰老基因工程 144

第四节　观赏花卉基因工程 145

一、花色基因工程 145

二、花型花香基因工程 146

三、延长花卉衰老 147

第七章 细胞工程与植物性状改良 148

第一节　原生质体培养及体细胞杂交 148

一、原生质体培养的意义 148

二、原生质体培养方法 149

三、体细胞杂交 156

四、杂种细胞的选择及鉴定 159

第二节　体细胞无性系变异 161

一、体细胞无性系变异的研究历史 162

二、体细胞无性系变异的机理 163

三、体细胞无性系变异的诱发及鉴定 164

四、体细胞无性系变异的利用 168

第三节　植物染色体组及染色体工程 171

一、染色体工程 171

二、染色体组工程 173

第八章 分子标记技术及其在农业上的应用 176

第一节　限制性片段长度多态性 176

一、RFLP基本原理及遗传特点 176

二、RFLP遗传图谱的构建及基因定位 177

三、RFLP技术在农业上的应用 179

第二节　随机扩增多态性DNA（RAPD） 181

一、RAPD原理及特点 181

二、RAPD技术在农业上的应用 182

第三节　扩增片段长度多态性（AFLP） 183

一、AFLP原理及特点 184

二、AFLP技术在农业上的应用 184

第四节　简单序列重复（SSR）标记 185

一、SSRs标记的原理及特点 185

二、SSRs标记在遗传育种上的应用 186

第九章 转基因动物及动物克隆技术 188

第一节　转基因动物的概念及研究目的 188

一、转基因动物的概念 188

二、转基因动物的研制目的 189

第二节　转基因动物的研制原理和方法 189

一、转基因动物的研制原理和方法 189

二、基因的准备 191

三、胚胎的采集与显微注射 193

四、精子做外源基因的转移载体 194

五、转基因胚胎的移植 194

第三节　转基因动物的鉴定 194

一、胚胎移植前的检测 195

二、新生动物的组织检测 195

三、基因表达的检测 196

第四节　转基因家禽的制备 198

一、制备转基因家禽的目的 198

二、转基因家禽的研制方法 198

三、原生殖细胞（PGCs）的转染 199

第五节　转基因动物育种 200

一、转基因家畜育种 200

二、转基因家禽育种 200

第六节　动物克隆技术 201

一、克隆动物的涵义 201

二、克隆的意义 201

三、克隆动物的原理 202

四、克隆动物的制备方法 204

五、克隆动物的应用 205

第十章 兽药生物技术 207

第一节　生物工程疫苗 208

一、生物合成亚单位疫苗 208

二、重组活载体疫苗和基因缺陷病毒疫苗 211

三、抗独特型疫苗 212

四、合成肽疫苗 212

五、核酸疫苗 213

第二节　基因重组新药 213

一、活性肽类 213

二、核酶及反义RNA 215

三、生物工程抗生素 215

四、酶制剂类 215

五、微生物次生代谢产物在畜牧业上的应用 216

第三节　单克隆抗体的研制与应用 216

一、单克隆抗体的研制 216

二、单克隆抗体的应用 218

第四节　基因工程抗体 218

一、基因工程抗体的研究 218

二、嵌合抗体 219

三、新效能抗体 220

四、双功能抗体 220

五、单区、单链抗体 220

六、整套抗体和噬菌体抗体库 220

第五节　分子诊断技术 221

一、核酸内切酶指纹法及其图谱的绘制 221

二、核酸探针的制备 222

三、Southern、Northern或Dot印迹技术 222

四、原位杂交 222

第十一章 动植物生物反应器 224

第一节　生物反应器的概念及研究概况 224

一、生物反应器的概念 224

二、动物生物反应器的研究意义 224

三、动物生物反应器生产的途径及乳腺生物反应器的优势 225

四、乳腺生物反应器生产潜力 225

第二节　动物生物反应器的研制原理 227

一、乳腺生物反应器基因构建的特点 227

二、乳腺生物反应器基因构建的检验 229

第三节　动物生物反应器的研制方法 229

一、动物的选择 229

二、制备动物生物反应器所需的时间 230

第四节　植物生物反应器 231

一、影响植物细胞培养的因素 231

二、植物细胞培养容器 233

三、植物反应器细胞培养技术 233

四、动物抗体在植物中的表达 234

第十二章　微生物饲料与微生物肥料 236

第一节　微生物饲料概述 236

第二节　微生物饲料工艺原理及生产技术 237

一、单细胞蛋白（SCP） 237

二、饲用酶制剂 241

三、活菌制剂 247

四、氨基酸饲料添加剂 249

五、维生素饲料添加剂 252

第三节　微生物肥料概述 253

第四节　微生物肥料工艺原理及生产技术 254

一、因氮菌肥料 254

二、根瘤菌肥料 259

三、植物促生根圈细菌（PGPR） 262

第十三章　微生物农药 264

第一节　杀虫细菌 264

一、细菌感染的途径和病症 264

二、苏云金芽孢杆菌 264

三、其它芽孢杆菌 268

第二节　杀虫真菌 269

一、概述 269

二、重要的杀虫真菌类群 270

三、白僵菌 273

第三节　昆虫病毒 275

一、重要的昆虫病毒 275

二、昆虫病毒制剂的生产 276

三、昆虫病毒的应用 278

第四节　农用抗生素 279

一、农用抗生素概述 279

二、农用抗生素的筛选 280

三、抗生素的生产过程 280

四、常用的农用抗生素 284

第十四章 农业生物技术在食品上的应用 287

第一节　食品微生物的纯培养 287

一、酵母菌的纯培养 287

二、乳酸菌酸乳发酵剂的扩大培养 290

第二节　酿造酒 290

一、啤酒 290

二、葡萄酒 293

第三节　发酵乳 297

一、菌种的选择 297

二、发酵乳的生产 298

第四节　其它发酵饮料 303

一、大豆发酵饮料 303

二、麦芽汁发酵饮料 306

三、果蔬汁发酵饮料 307

第五节 利用微生物生产食品添加剂 308

一、柠檬酸 308

二、黄原胶 310

附录 315

一、常用实验设备表 315

二、常用培养基、抗生素和菌株 316

1．细菌培养基 316

2．植物基本培养基 321

3．常用的细菌菌株 322

三、常用试剂及缓冲液 323

1．常用有机试剂 323

2．常用溶液的配制 323

3．杂交实验中用于降低背景的封闭剂 327

4．常用缓冲液 328

5．常用酶的配制 332

四、核酸和蛋白质的常用数据 335