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实验室规则 3

实验记录及实验报告 3

上篇 植物生理学实验 3

第一章 细胞生理 3

实验1 植物细胞原生质流动的观察 3

实验2 高等植物叶绿体的分离制备与活性鉴定 4

实验3 高等植物线粒体的分离制备 6

实验4 植物细胞的死活鉴定及质壁分离 8

一、植物细胞的活体染色与死活鉴定 8

二、质壁分离的不同形式 9

实验5 PAS法显示多糖 10

实验6 植物染色体荧光原位杂交 11

第二章 水分生理 15

实验7 植物组织含水量、相对含水量及水分饱和亏测定 15

实验8 植物叶片保水力测定 16

实验9 植物组织水势测定 17

一、小液流法 17

二、压力室法 19

三、热电偶湿度计法 21

实验10 植物组织渗透势测定 23

一、质壁分离法测定细胞渗透势 23

二、冰点下降法测定植物组织渗透势 24

三、用压力-容积曲线技术测定植物叶片渗透势 26

四、蒸汽压渗透计测定植物组织渗透势 27

实验11 植物组织自由水和束缚水含量测定（马林契克法） 29

实验12 植物组织汁液浓度测定 31

实验13 蒸腾速率测定 31

一、吸水剂法 32

二、吸水纸法 33

实验14 稳态气孔计测定扩散阻力和蒸腾速率 34

实验15 气孔开闭状况测定 38

一、印迹法测定气孔开张度 38

二、透明胶带法测定气孔开张度 39

三、气孔密度和孔口总面积测定 40

二、气孔保卫细胞内K+变化的观察 42

一、K+对气孔开度的影响 42

实验16 K+对气孔开度的影响及气孔保卫细胞内K+变化的观察 42

实验17 植物水分利用效率（WUE）测定 43

一、单叶水分利用效率 44

二、个体或群体水分利用效率 44

实验18 伤流液的收集和伤流量测定 45

一、加压法 46

二、容积法 46

三、重量法 47

实验19 伤流液中主要化学成分的分析与鉴定 48

一、纸层析法鉴定伤流液中氨基酸与酰胺 49

二、氨基酸自动分析仪测定伤流液中氨基酸含量 50

三、伤流液中无机磷的定量测定 51

实验20 植物根系水力学导度（水导）测定 53

第三章 矿质营养 55

实验21 植物的溶液培养和缺素症状 55

实验22 根系活力测定 57

一、根系总吸收面积和活跃吸收面积测定 58

二、氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定根系活力 59

实验23 硝酸还原酶活性测定 61

一、活体法 61

二、离体法 63

实验24 根系体积测定 64

一、水位取代法测定根系体积 65

二、图像扫描法测定根系体积 65

实验25 质膜微囊泡的分离、纯化及质膜H+-ATPase活性测定 66

实验26 硝态氮含量测定 68

第四章 光合作用 71

实验27 叶绿体色素的提取分离 71

实验28 叶绿素的理化性质 73

实验29 叶绿素含量的定量测定 74

实验30 叶绿素荧光动力学参数测定 77

实验31 改良半叶法测定光合速率 79

实验32 植物净同化率测定 81

实验33 氧电极法测定光合和呼吸速率 82

实验34 叶面积的测定方法 85

一、叶面积仪测定法 85

二、透明方格法 86

三、印相重量测定法（纸样称重法） 87

四、打孔测定法 88

五、排水量测定法 88

六、系数测定法 89

七、回归方程法 89

实验35 红外线CO2气体分析仪测定光合、呼吸、光呼吸、CO2补偿点 90

一、光合及呼吸速率测定 92

二、光呼吸测定 93

三、CO2补偿点测定 94

实验36 光合作用系统测定植物净光合速率、蒸腾速率及其他相关参数 95

实验37 RuBP羧化酶活性测定 100

一、同位素法 101

二、分光光度法 102

实验38 淀粉磷酸化酶活性测定 103

实验39 蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性测定 105

实验40 酸性转化酶和碱性转化酶活性测定 107

实验41 ADPG焦磷酸化酶活性测定 108

实验42 植物14CO2光合标记 111

实验43 植物样本宏观放射自显影 112

第五章 呼吸作用 115

实验44 植物呼吸速率测定 115

一、干燥器法 115

二、小筐子法 117

三、微量减压法 118

实验45 呼吸抑制剂对呼吸作用的影响 121

实验46 植物体内维生素C氧化酶、多酚氧化酶活性测定 123

实验47 细胞色素氧化酶活性测定 126

实验48 生物发光法测定腺苷三磷酸（ATP） 127

实验49 植物氧化磷酸化效率（P/O）和呼吸控制（RC）测定 130

第六章 物质代谢 133

实验50 植物体内蛋白氮和非蛋白氮含量测定 133

一、微量凯氏定氮法 134

二、凯氏自动定氮仪法 138

三、纳氏比色定氮法 138

实验51 植物组织中可溶性蛋白质含量测定 140

一、Folin-酚试剂法（Lowry法） 140

二、考马斯亮蓝G-250染色法 142

三、紫外吸收法 143

实验52 植物组织中糖、淀粉和纤维素含量的系统测定 144

实验53 植物组织中粗脂肪含量测定 149

实验54 植物组织中核酸的提取与测定 151

一、基因组总DNA的提取 151

二、DNA浓度、纯度的快速测定 152

三、植物组织总RNA的提取 154

四、RNA浓度、纯度的快速测定 155

第七章 植物激素 158

实验55 植物激素的提取分离与纯化 158

一、溶剂萃取法 158

二、薄层层析法分离纯化 160

三、C18胶柱分离法 161

一、双层固相抗体型ELISA测定ABA含量 163

实验56 酶联免疫法测定植物激素含量 163

二、固相抗原型ELISA测定IAA含量 167

实验57 芽鞘伸长法测定生长素类物质 169

实验58 赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成 171

实验59 植物生长调节剂NAA对植物生根的效应 172

实验60 细胞分裂素对萝卜子叶的保绿和增重作用 173

实验61 IAA氧化酶活性测定 175

第八章 信号转导 177

实验62 脱落酸对植物气孔运动和保卫细胞质膜K+通道的影响 177

实验63 激光扫描共聚焦技术测定气孔保卫细胞内游离Ca2+浓度的变化 179

实验64 H+流向与植物生长模式 181

第九章 生长发育 181

实验65 花粉活力测定 182

一、I2-KI染色测定法 182

二、TTC法测定花粉活力 183

实验66 花粉管生长测定 184

实验67 种子生活力快速测定 185

一、TTC法 185

二、红墨水染色法 187

三、荧光法 187

实验68 谷物种子萌发时淀粉酶活性测定 188

实验69 植物激素对愈伤组织形成及器官分化的影响 191

实验70 乙烯对果实的催熟作用 195

第十章 成熟衰老 195

实验71 气相色谱法测定乙烯含量 196

实验72 乙烯合成酶活性测定 198

实验73 植物组织中有机酸含量测定 199

实验74 植物组织中维生素C含量测定 200

一、2,6-二氯靛酚滴定法 200

二、荧光比色法 202

三、钼蓝比色法 203

实验75 果实成熟时果胶酯酶（PE）、多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性测定 205

第十一章 逆境生理 208

实验76 逆境对植物细胞膜的伤害 208

实验77 丙二醛含量测定 210

实验78 植物组织中超氧化物歧化酶活性测定 211

实验79 植物组织中过氧化氢酶活性测定 214

一、紫外吸收法 214

二、碘量滴定法 215

实验80 植物组织中过氧化物酶活性测定 217

一、过氧化物酶活性测定 217

二、维生素C过氧化物酶活性测定 218

实验81 苯丙氨酸解氨酶活性测定 219

实验82 植物超氧阴离子自由基含量测定 221

实验83 植物体中谷胱甘肽、类胡萝卜素、维生素E含量测定 223

一、还原型谷胱甘肽含量测定 223

二、胡萝卜素含量测定 224

三、维生素E含量测定 226

实验84 脯氨酸含量测定 228

实验85 气相色谱法测定植物样品膜脂中脂肪酸的含量 231

下篇 植物生理学基本实验技术原理 237

第一章 植物材料的准备与分析方法 237

一、植物材料的种类 237

二、植物材料的培养 237

三、植物材料的采取 239

四、分析样品的处理与保存 240

五、待测植物样品的分析方法 241

六、实验结果的数据处理与分析 241

第二章 植物生理学基本实验技术 244

一、细胞器及质膜分离技术 244

二、植物组织培养技术 251

三、植物光合、呼吸测定技术 259

四、光谱分析技术 271

附录 277

一、常用酸碱主要性质及配制参考表 277

二、常用缓冲液 277

三、几种渗透溶液的配制表 282

四、混合溶液的配制方法 283

五、容易变质及需要特殊方法保存的试剂 283

六、各种冷却剂的组成及冷却效果表 284

七、常用植物激素及生长调节剂 284

八、标准剂量单位 285

九、离心机转速与相对离心力的换算 287