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目 录 1

总论 1

A 基因工程主要步骤的基本操作 5

实验一碱变性法抽提pBR322质粒DNA 5

实验二氯化铯密度梯度超离心提取pXZ 6

质粒DNA 22

实验三DNA的纯度、浓度与分子量的测定 36

DNA中的RNA 48

实验四用Sepharose 2B柱层析法去除质粒 48

实验五DNA的酶切与连接 59

实验六重组DNA的转化 78

实验七转化子DNA的快速鉴定——快速细胞 91

破碎法 91

实验八重组质粒DNA的快速制备与酶切 98

B 重组DNA的进一步检测 107

实验九DNA片段的分离——从琼脂糖凝胶中分离DNA片段 107

实验十 切口移位（Nick Translation）法制备32P-DNA探针 119

实验十一Southern印迹杂交法 133

实验十二菌落原位杂交 143

实验十三λ噬菌体DNA（分子量标记）的制备 151

实验十四 用质粒DNA释放法提取pYPI并测定其分子量 165

实验十五 电子显微镜法测定pYPI重组质粒DNA分子量 173

附录 185

一各种试剂的母液配方 185

二常用的抗菌素 189

三玻璃和塑料器皿的硅化 190

四核酸凝胶电泳图谱摄影 191

五X－光底片的冲洗方法 198

六常用仪器的操作方法 200

高速冷冻离心机（日立） 200

CENTRIKON T—2080型（瑞士）超速离心机 201

微波炉 204

液体闪烁计数仪 204

电子显微镜 205

参考文献 209