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目 录 1

序 1

第一章实验室的基本设备和一般操作技术 1

第一节实验室和实验室的基本设备 1

一、实验室 1

二、实验器具和仪器设备 2

第二节微生物实验室的一般操作技术 3

一、灭菌设备和一般灭菌操作技术 3

二、无菌室的设计和无菌箱、超净工作台的使用 6

三、恒温室和培养箱 9

四、光学显微镜的一般使用方法 10

（一） 普通光学显微镜 10

（二） 相差显微镜 23

（三） 荧光显微镜 31

（四） 显微摄影 33

（五） 彩色照相 39

（六） 电子显微镜 40

（七） 扫描电子显微镜 42

一、常用的天平种类 43

第三节 天平的使用 43

二、普通粗天平的使用和注意事项 44

三、较精密分析天平的使用和注意事项（以半自动光电天平为例） 44

四、使用精密分析天平的注意事项 45

第四节玻璃器皿的清洁法 46

一、常用的清洁剂 47

二、洗液的配制及使用的注意事项 47

三、洗涤玻璃器皿的方法与要求 47

第二章土壤样品的采集 49

第一节采样前的准备工作 49

第三节采样方法 50

第二节采样地点的记载 50

第四节土壤样品的携带和保存 52

第三章微生物的分离 53

第一节分离微生物必备的器具 54

第二节无菌操作的一般规则 55

第三节接种操作法 56

第四节微生物的分离 57

一、好气性微生物的分离 57

二、厌氧性微生物的分离 60

第五节富集培养 63

二、厌氧性微生物的富集培养 64

一、富集培养的一般操作方法 64

三、土壤环流法 65

四、选择培养基法 66

第六节显微操作法 67

一、解剖针的制作方法 67

二、单细胞分离的方法 68

第四章培养基 70

第一节培养基的种类 70

第二节培养基的基本材料 72

第三节营养成分 75

第四节其它因子 77

第五节配制培养基的注意事项 78

第五章菌种保藏 80

第一节低温冷冻保藏法 81

第二节干燥保藏法 83

一、土壤保藏法 83

二、细砂保藏法 84

三、明胶？块法 84

四、硅胶干燥法 85

五、L－干燥法 85

第三节隔绝空气保藏法 86

第四节冷冻干燥法 87

第六章 土壤微生物数量和组成的测定 91

第一节土壤微生物的计数法 92

一、间接计数法 92

二、直接计数法 94

第二节土壤中各类微生物的计数 102

一、细菌的计数 103

二、真菌的计数 107

三、放线菌的计数 109

第三节各类微生物生理群及藻类的测定 110

一、氨化细菌的测定 110

二、硝化细菌的测定 113

三、反硝化细菌（硝酸还原细菌）的测定 116

四、好气性自生固氮菌的测定 119

五、嫌气性自生固氮菌的测定 122

六、微嗜氮微生物的测定 123

七、纤维素分解菌的测定 123

八、甲烷生成菌的测定 128

九、芳香族化合物分解菌的测定 128

十、硫化细菌的测定 129

十一、反硫化细菌的测定 130

十二、磷细菌的测定 131

十三、铁细菌的测定 133

十四、硅酸盐细菌的测定 135

十五、土壤藻类的测定 136

第七章 微生物的鉴定 138

第一节 微生物鉴定常用方法 139

第二节 各类微生物的检索表 141

第三节鉴定的化学方法 160

一、免疫学方法 160

二、定量免疫电泳方法 162

三、DNAG+C含量的测定方法 167

四、脂类的测定 170

五、细胞壁成分的测定 170

六、酯酶的测定 171

第八章根际微生物研究方法 176

第一节根际采样方法 176

一、根际土壤采集方法 177

二、根面微生物采集方法 178

三、根系微生物采样方法 178

二、根面（即近根区）微生物的分析 179

三、根区（即根系）微生物的分析 179

一、根际区（即根区）微生物的分析 179

第二节根际微生物分析方法 179

第三节研究根系微生物注意事项 182

第九章土壤有机成分分析 183

第一节土壤全氮量的测定 183

第二节土壤全碳的测定 186

第三节土壤全磷量的测定（钼蓝比色法） 187

第四节土壤氨基酸的测定 189

一、氨基氮总量测定（茚三酮比色法） 189

二、氨基酸组成的测定 191

一、总糖量测定（蒽酮法） 192

第五节土壤糖类的测定 192

二、土壤五碳糖的测定 194

三、中性糖含量的测定（酚－硫酸法） 195

四、中性糖组分测定（气相色谱法） 197

五、糖醛酸含量的测定（咔唑比色法） 198

六、糖醛酸组分的测定（气相色谱法） 199

七、氨基糖含量的测定 201

八、氨基糖组分的测定（气相色谱法） 203

第六节土壤酚类化合物的测定 204

一、总酚量的测定 204

二、酚类化合物的组成分测定（气相色谱法） 206

一、有机酸组分测定（气相色谱法） 208

第七节土壤有机酸的测定 208

二、丙酮酸的测定 209

第八节土壤中核酸的碱基（嘌呤＋嘧啶）的测定 211

第九节土壤中细菌DNA的测定 213

第十节土壤中微生物产生的生理活性物质的测定 215

一、土壤抗生物质的测定 216

二、土壤毒素的测定 217

第十章原位土壤中微生物活性测定 220

第一节微生物量（Microbial biomass）的测定 220

一、氯仿熏蒸法 220

二、三磷酸腺苷（ATP）测定法 223

第二节土壤呼吸作用的测定 226

一、碱吸收滴定法 227

二、田间测定法 227

三、华勃检压法 228

四、原位土壤中细菌、真菌呼吸作用强度的测定 233

第三节纤维素分解作用强度的测定（埋片法） 234

第四节氨化作用强度的测定 234

第五节硝化作用强度的测定 237

一、根据硝酸盐的累积量测定硝化作用强度（土壤培养法） 237

二、根据亚硝酸的残余量测定硝化作用强度（溶液培养法） 239

第六节反硝化作用强度的测定 240

第七节固氮作用强度的测定 242

一、土壤培养法 242

二、乙炔还原法 243

第八节酚分解作用强度的测定 244

第九节磷转化强度的测定 246

第十一章土壤酶活性测定 249

第一节脱氢酶活性的测定 251

第二节过氧化氢酶活性的测定 255

第三节多酚氧化酶活性的测定 258

第四节蔗糖酶活性的测定 261

第五节β－葡糖苷酶活性的测定 266

第六节纤维素酶活性的测定 269

第七节磷酸酶活性的测定 274

第八节芳基硫酸酯酶活性的测定 280

第九节蛋白酶活性的测定 282

第十节脲酶活性的测定 287

第十一节土壤酶的提取及其基本性质的测定 291

附 录 296

主要参考书 305

主要参考文献 307