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第一篇 生物化学与分子生物学实验 3

第一章 基础性实验 3

实验1 蛋白质的呈色反应、沉淀现象观察及等电点的测定 3

实验2 蛋白质含量的测定 6

实验3 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 10

实验4 红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶活性测定 12

实验5 血清丙氨酸转氨酶活性测定（紫外速率法及改良穆氏法） 17

实验6 糖化血红蛋白的测定 21

实验7 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 23

实验8 血红蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 25

实验9 血糖测定 27

实验10 胰岛素、肾上腺素对家兔血糖浓度的影响 31

实验11 血清总胆固醇测定 33

实验12 质粒DNA的提取、酶切与鉴定 37

实验13 酵母RNA的成分鉴定 40

实验14 PCR扩增G6PD基因外显子11-12片段 41

实验15 尿中酮体的检出 43

实验16 血清尿素氮测定（二乙酰一肟法） 44

第二章 综合性实验 47

实验17 真核细胞基因组DNA的提取、定量和纯度测定 47

实验18 小鼠基因组DNA的Southern blotting分析 49

实验19 小鼠脑组织总RNA提取与RT-PCR获取真核基因片段 54

实验20 pMD19-G6PD重组子的蓝白斑筛选及酶切鉴定 59

实验21 pThioHis（A）-G6PD重组表达质粒的鉴定 63

实验22 G6PD重组酶的诱导表达、分离及比活性测定 66

实验23 ATP、ADP和NADPH对G6PD酶促反应的影响 70

实验24 小鼠PKCε基因的克隆、鉴定及其6His融合蛋白的大肠杆菌表达和纯化 76

实验25 SDS-PAGE测定蛋白质的表观分子量 83

实验26 小鼠血清IgG的Western blotting分析 87

实验27 血红蛋白的等电聚焦分离及其等电点测定 94

实验28 醋酸纤维薄膜电泳技术分离乳酸脱氢酶同工酶 97

实验29 血清蛋白的盐析及清蛋白／球蛋白的测定 100

实验30 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳分离及定量测定 103

实验31 酶的特异性及温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 106

实验32 小鼠肝细胞核的分离、纯化与鉴定 109

实验33 动脉硬化指数的计算 112

实验34 糖的硅胶G薄层层析分析鉴定 114

第三章 创新设计实验 117

实验35 乙醛脱氢酶2基因型的检测 117

实验36 针刺“足三里”穴位对家兔血糖浓度的双向调节作用 120

实验37 小鼠PKCε相互作用蛋白质的捕获、鉴定 122

实验38 小鼠肝总蛋白质的双向电泳分离 125

实验39 人血浆同型半胱氨酸的测定（ELISA方法） 129

实验40 自毁容貌综合征的生化与分子生物学分析 131

实验41 G6PD缺陷的诊断及其发病的分子基础 132

实验42 HL-60细胞中DAPK基因甲基状态的检测 133

实验43 胰岛素促进HepG2细胞对葡萄糖吸收的检测 135

第二篇 生物化学与分子生物学技术 141

第四章 分光光度技术 141

第一节 分光光度技术的基本原理 141

第二节 分光光度计的组成与结构 143

第三节 分光光度技术的应用 145

第五章 电泳技术 148

第一节 概述 148

第二节 几种常用电泳简介 149

第六章 层析技术 152

第七章 离心技术 156

第一节 离心技术的基本原理 156

第二节 离心机的类型 157

第三节 制备型离心的分离方法 158

第四节 离心操作的注意事项 159

第八章 聚合酶链反应与印迹技术 161

第一节 PCR技术 161

第二节 印迹技术 165

第九章 基因工程技术 170

第一节 基因工程技术的相关概念 170

第二节 基因工程技术的基本原理及技术路线 171

第三节 基因工程技术在医学领域的应用 175

第十章 荧光标记技术 177

第一节 荧光现象 177

第二节 荧光探针 179

第三节 荧光标记样品的检测 180

第十一章 RNA干扰技术 187

第一节 RNA干扰的作用机制 187

第二节 RNA干扰技术的应用 189

第十二章 生物芯片技术 191

第一节 基因芯片 191

第二节 蛋白质芯片 193

第十三章 双向凝胶电泳 196

第十四章 蛋白质三维结构建模 200

第一节 蛋白质结构相关知识 200

第二节 蛋白质结构预测实例 201

参考文献 205

附录一 生物化学与分子生物学常用数据库和软件 208

附录二 生物化学与分子生物学常用试剂和培养基的配制方法 210

附录三 生物化学及分子生物学实验常用缩略语 213

附录四 生物化学与分子生物学实验常用词中英文对照 216