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理论部分 1

一、基础生物化学常用实验技术 1

（一）离心技术 1

（二）沉淀分离技术 3

（三）光谱分析技术 7

（四）层析技术 14

（五）电泳技术 23

二、实验数据的记录与处理 25

三、实验报告的书写规范 25

实验部分 26

糖类 26

实验1 血液中葡萄糖含量的测定——Folin-Wu法 26

实验2 直链淀粉和支链淀粉的测定——双波长法 28

实验3 丙酮酸含量的测定 31

实验4 还原糖和总糖的测定 32

实验5 可溶性糖的硅胶G薄层层析 35

实验6 血液中乳酸的测定 37

脂类 39

实验7 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法 39

实验8 不饱和脂肪酸的反相纸层析 40

实验9 脂质的提取及薄层层析 42

实验10 血清总脂的测定 43

实验11 脂肪酸的β氧化作用 45

蛋白质 47

实验12 氨基酸纸层析 47

实验13 蛋白质等电点的测定 49

实验14 蛋白质含量测定 50

Ⅰ考马斯亮蓝G-250法（Bradford法） 50

Ⅱ紫外吸收法 52

实验15 蛋白质溶液脱盐 54

Ⅰ透析法 54

Ⅱ凝胶过滤法 55

实验16 凝胶过滤分离血红蛋白与硫酸铜 56

实验17 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离蛋白质 59

实验18 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子质量 63

实验19 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 65

实验20 细胞色素c的制备及测定 67

实验21 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 70

实验22 谷类作物种子中赖氨酸含量的测定 72

核酸 74

实验23 酵母RNA的提取——浓盐法 74

实验24 DNA的羟基磷灰石柱层析 75

实验25 醋酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸 77

实验26 单核苷酸的离子交换柱层析分离 79

酶 80

实验27 淀粉酶活力的测定 80

实验28 酶的基本性质 83

实验29 血清中转氨酶活性的测定 87

实验30 脂肪酶活力的测定——对硝基苯酚法 89

实验31 植物组织中过氧化氢酶活性的测定——紫外吸收连续记录法 90

实验32 脲酶Km值的测定 92

实验33 植物组织中过氧化物酶活力的测定 95

实验34 多酚氧化酶活力的测定 96

实验35 果实菠萝蛋白酶的动力学测定 98

实验36 乳酸脱氢酶活力的测定 101

维生素 103

实验37 维生素C含量的测定 103

Ⅰ滴定法测定维生素C的含量——2，6-二氯酚靛酚滴定法 103

Ⅱ紫外比色法测定维生素C的含量 105

实验38 维生素B1含量的测定 106

附录 109

1．常用缓冲液的配制 109

2．硫酸铵饱和度常用表 114

3．常用层析数据 115

4．离心机转数与相对离心力的换算 118

5．常见蛋白质分子质量和等电点参考值 120

参考文献 123