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第一章 环境微生物学实验常用仪器及其使用 1

第二章 环境微生物学基础实验 13

实验一 常用玻璃器皿的清洗和包装 13

实验二 培养基的种类、配制及灭菌 21

实验三 灭菌技术 30

实验四 接种技术和无菌操作 35

实验五 微生物的分离纯化技术 43

Ⅰ平板划线法分离菌种 44

Ⅱ涂布平板法和浇注平板法分离菌种 47

Ⅲ真菌的单孢子分离法 50

实验六 微生物显微技术 52

Ⅰ 普通光学显微镜 53

Ⅱ 相差显微镜 57

Ⅲ 荧光显微镜 60

Ⅳ 扫描电子显微镜 62

实验七 微生物的制片和染色 64

Ⅰ 微生物制片技术 65

Ⅱ 细菌的简单染色 66

Ⅲ革兰氏染色法 69

Ⅳ细菌的芽孢染色法 73

Ⅴ细菌的英膜染色法 76

Ⅵ细菌的鞭毛染色法 79

Ⅶ酵母菌和霉菌的染色法 84

实验八 微生物的形态观察 86

Ⅰ 四大微生物菌落的识别 86

Ⅱ 细菌的形态观察 88

Ⅲ 放线菌的形态观察 90

Ⅳ 真菌的形态观察 92

实验九 微生物的计数及大小测定 95

Ⅰ酵母菌和细菌的直接计数 96

Ⅱ 平板菌落计数法 100

Ⅲ微生物细胞大小的测定 103

实验十 菌种保藏 106

Ⅰ 简易的菌种保藏法 107

Ⅱ 干燥保藏法 110

Ⅲ 冷冻真空干燥保藏法 112

Ⅳ 液氮超低温冷冻保藏法 116

第三章 环境微生物学综合实验 120

实验十一 土壤中微生物的检测和分离 121

实验十二 空气中微生物的检测和分离 125

实验十三 水体中细菌总数的检测 127

实验十四 水体中大肠杆菌的检测 131

实验十五 人体表面微生物的检测和分离 135

实验十六 纤维素降解菌的分离纯化和活性测定 138

实验十七 酚降解菌的分离纯化和活性测定 142

实验十八 石油降解菌的分离纯化和活性测定 146

实验十九 活性污泥微生物的观察分析 150

第四章 环境微生物学分子生物学实验技术 154

实验二十 细菌总DNA的制备 154

实验二十一 真菌总DNA的制备 156

实验二十二 微生物总DNA的PCR扩增 159

实验二十三DGGE分析微生物多样性 162

实验二十四 蓝白斑筛选技术 165

实验二十五 限制性片段长度多态性（RFLP）分析 168

实验二十六 随机引物扩增多态性DNA（RAPD）分析 171

实验二十七 扩增片段长度多态性（AFLP）分析 174

实验二十八16SrRNA基因序列鉴定细菌 180

实验二十九 利用ITS序列鉴定真菌 184

实验三十 环境中微生物多样性分析 188

附录 193

附录一 常用培养基的配方 193

附录二 常用染色液的配制 205

附录三 常用试剂的配制 207

附录四 常用酸碱指示剂的配制 208

附录五 常用缓冲液的配制 209

附录六 常用的消毒剂 212

附录七 蒸汽压力与温度的关系 213

附录八 常用干燥剂 213

附录九 常用计量单位 214

附录十 常用的菌种保藏方法 214

附录十一MPN表 215

参考文献 220