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实验规则与安全 1

第一部分 环境微生物学基础实验技术 2

第一章 微生物实验室常用器材 2

一、常用设备及使用方法 2

二、常用器皿及使用方法 6

第二章 微生物分离与培养技术 12

实验一 培养基的制备与灭菌 12

实验二 微生物的分离与纯化 14

实验三 接种与无菌操作技术 17

实验四 微生物的纯培养技术 19

实验五菌种保藏 24

第三章 显微镜技术 29

实验六 普通光学显微镜的使用及微生物形态观察 29

实验七 荧光显微镜的使用 34

实验八 暗视野显微镜的使用 36

实验九 相差显微镜的使用 37

实验十 电子显微镜的使用及样品制备 39

第四章 微生物染色与形态观察 45

实验十一 细菌单染色与革兰氏染色 45

实验十二 细菌芽孢染色 46

实验十三 细菌的荚膜染色 47

实验十四 细菌的鞭毛染色 48

实验十五 微生物显微直接计数（血球计数板） 50

实验十六 酵母菌的形态观察及死、活细胞鉴别 53

实验十七 放线菌的形态观察 54

实验十八 霉菌的形态观察 56

实验十九 活性污泥生物相观察及污泥沉降性能测定 58

第二部分 微生物的生化及分子生物学特征测定实验技术 61

第五章 细菌生化特征常规测定试验 61

一、氧化酶 61

二、过氧化氢酶 62

三、葡萄糖氧化发酵 62

四、甲基红（M.R ） 62

五、V-P测定 63

六、淀粉水解 63

七、纤维素分解 63

八、硝酸盐还原 64

九、亚硝酸还原 65

十、产氨试验 65

十一、脲酶 65

第六章 现代分子微生物学技术 67

实验二十 细菌染色体DNA的提取和检测 67

实验二十一 聚合酶链式反应技术（PCR） 70

实验二十二RT-PCR实验技术 73

实验二十三 实时定量PCR （Real-time QPCR ）实验技术 76

实验二十四DNA测序与序列同源性分析 79

实验二十五 系统发育树的构建 83

实验二十六Biolog自动微生物鉴定系统的应用 95

实验二十七 变性梯度凝胶电泳技术（DGGE） 99

实验二十八 荧光原位杂交技术（FISH） 102

第三部分 环境微生物综合性、研究性实验 106

第七章 环境微生物综合性实验 106

实验二十九 大肠杆菌生长曲线的测定 106

实验三十 环境因素对微生物的影响 107

实验三十一 水体中细菌总数CFU的测定 110

实验三十二 水中大肠菌群的测定 113

实验三十三 富营养化湖泊中藻量的测定 118

实验三十四 空气中微生物的检测 120

实验三十五 发光细菌的生物毒性检测 122

实验三十六BOD5的测定 123

实验三十七 液体培养条件下细菌淀粉酶的检测 128

第八章 污染物微生物处理 130

实验三十八 硝化细菌的分离与硝化能力测定 130

实验三十九 反硝化细菌的分离及反硝化能力测定 132

实验四十 聚磷菌的分离、形态观察及除磷效率测定 135

实验四十一 石油降解菌的分离与降解能力测定 138

实验四十二 苯酚降解微生物的分离及除苯酚能力的测定 140

实验四十三 微生物细胞固定化包埋及其在污染物降解中的应用 143

附录 146

附录一 常用染色液的配制 146

附录二 常用培养基的配制 147

附录三Biolog微生物鉴定培养基种类及接种液的配置 150

诊断图谱——活性污泥中常见原生及微型后生动物图谱 153

参考文献 164