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第一部分 实验须知 1

实验一 组织细胞中基因组DNA的提取 10

第二部分 DNA重组实验 11

第一章 目的基因的获取 12

实验二 组织细胞中RNA的提取及cDNA的合成 14

实验三　核酸分子的定量 18

实验四 聚合酶链式反应扩增目的基因 20

第二章 目的基因与载体的重组 24

实验五　限制性核酸内切酶对DNA进行酶切 24

实验六　电泳分离DNA片段 26

实验七　DNA片段的回收与纯化 27

第三部分　重组DNA的表达 27

实验八 目的基因与载体片段的连接 29

第三章　重组DNA的筛选与扩增 31

实验九　感受态细胞的制备 31

实验十　重组DNA的转化与筛选 33

实验十一　重组质粒的提取与鉴定 34

第一章　在大肠杆菌中表达重组蛋白 37

实验十二　温度诱导表达 38

实验十三　化学诱导表达 42

实验十四 细菌裂解与蛋白质表达产物的电泳鉴定 45

第二章　蛋白质表达产物的鉴定 45

实验十五　蛋白质表达产物的分离 55

实验十六　蛋白质表达产物的定量 58

第三章　在哺乳动物细胞中表达重组DNA 64

实验十七　重组DNA转染哺乳动物细胞 64

实验十八　细胞裂解与免疫沉淀 67

实验十九　蛋白质印记技术 70

第四部分　核酸分子杂交 77

第一章　核酸探针的标记 77

实验二十 切口平移法 78

实验二十一　随机引物法 80

实验二十二　DNA探针的末端标记 82

第二章　核酸分子杂交 85

实验二十三　Southern印迹杂交 85

实验二十四 Northern印迹杂交 90

实验二十五　原位杂交 94

第五部分　生物信息学在分子生物学实验中的应用 101

实验二十六 网上生物学资源的利用 101

实验二十七　序列的数据库查询 105

实验二十八　序列的相似性分析 107

实验二十九　软件分析开放读框及预测二级结构 109

附录一 医学分子生物学实验常用参数 111

附录二　常用试剂的配制 114