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第一部分 基础性实验 3

第一章 水分生理 3

实验1-1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定 3

实验1-2 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 5

实验1-3 植物组织水势的测定（液体交换法） 6

Ⅰ 小液流法 7

Ⅱ 折射仪法 8

实验1-4 蒸腾强度的测定 9

Ⅰ 钴纸法 9

Ⅱ 容量法 10

实验1-5 环境因子对植物吐水的影响（示范） 12

实验1-6 植物叶子气孔密度和面积的测定 13

实验1-7 K＋和ATP对气孔开度的影响 14

实验1-8 气孔运动与K＋迁移 16

实验1-9 小孔的扩散（示范） 17

实验1-10 植物伤流液中糖、氨基酸及矿质元素的点滴分析 18

第二章 矿质营养 21

实验2-1 植物的元素缺乏症（溶液培养） 21

实验2-2 单盐毒害及离子间颉颃作用 23

实验2-3 植物对离子的选择性吸收 24

实验2-4 离体根对铵离子的交换吸收 26

实验2-5 氧对小麦离体根吸收K＋的影响 27

实验2-6 根系体积的测定 29

实验2-7 根系活力的测定 30

Ⅰ α-萘胺氧化法 30

Ⅱ 氯化三苯基四氮唑（TTC）法 32

实验2-8 硝酸还原酶活性的测定 33

Ⅰ 活体法 34

Ⅱ 离体法 35

实验2-9 植物灰分元素的分析鉴定 36

实验2-10 植物组织可挥发性元素的鉴别 37

实验2-11 植株中硝态氮的测定 39

实验2-12 植株磷素的测定（钼蓝法） 41

实验2-13 植株中总铁量的测定 42

Ⅰ 硫氰化物法 42

Ⅱ 邻二氮菲（菲绕啉）法 43

实验2-14 微量元素铜的测定 45

实验2-15 细胞内游离Ca2＋的测量（流式细胞法） 46

【附】 FACScan流式细胞仪的工作原理 47

实验2-16 磷酸盐测定（间隔流动分析仪法） 49

【附】 间隔流动分析仪的使用原理 50

第三章 光合作用 54

实验3-1 叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定 54

实验3-2 叶绿体色素的分离和吸收光谱曲线 56

实验3-3 叶绿素a、叶绿素b含量测定 58

实验3-4 植物光合强度的测定 61

Ⅰ 改良半叶法 61

Ⅱ 氧电极法 63

Ⅲ 便携式光合测定仪法 64

实验3-5 藻类植物光合强度的测定 65

实验3-6 环境因素对光合作用的影响 68

Ⅰ 量气法 68

Ⅱ 叶圆片上浮法 69

实验3-7 离体叶绿体光还原反应（希尔反应） 71

实验3-8 叶绿体偶联因子（CF1）提取及ATPase活性测定 72

实验3-9 乙醇酸氧化酶活性测定 74

实验3-10 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶羧化活性的测定 76

实验3-11 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶的加氧活性的测定 78

第四章 呼吸作用 80

实验4-1 植物呼吸强度的测定 80

Ⅰ 简易测定法 80

Ⅱ 小篮子法 81

Ⅲ 呼吸比重瓶法 82

实验4-2 呼吸商的测定 84

实验4-3 呼吸抑制剂对呼吸作用的影响 85

实验4-4 离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用 87

实验4-5 NADP磷酸酶活性的测定 90

实验4-6 丙酮酸激酶活性的测定 91

实验4-7 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定 92

实验4-8 植物组织中几种酶的组化定位鉴定 94

实验4-9 多酚氧化酶活性的测定（氧电极法） 97

实验4-10 过氧化氢酶活性的测定（氧电极法） 98

实验4-11 过氧化物酶活性的测定 100

Ⅰ 比色法 100

Ⅱ 化学发光法 100

第五章 物质代谢 103

实验5-1 糖类含量的测定 103

Ⅰ 可溶性总糖的测定 103

Ⅱ 还原糖的测定 104

Ⅲ 蔗糖的测定 106

Ⅳ 葡萄糖的测定 106

1．比色法 106

2．化学发光法 107

Ⅴ 果糖的测定 108

Ⅵ 淀粉的测定 109

Ⅶ 粗纤维含量的测定 110

实验5-2 糖类代谢酶的测定 111

Ⅰ α-淀粉酶和β-淀粉酶活力的测定 111

Ⅱ 蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性的测定 113

实验5-3 油脂过氧化值的测定 114

实验5-4 化学发光法测量脂质过氧化及扰氧化剂 115

实验5-5 脂肪水解酶活性的测定 117

实验5-6 蛋白质的提取和测定 118

Ⅰ 蛋白质的提取 119

Ⅱ 微量凯氏定氮法 120

Ⅲ Folin-酚试剂法 122

Ⅳ BCA试剂法 123

Ⅴ 考马斯蓝染料结合法 125

Ⅵ 紫外吸收法 126

实验5-7 蛋白质特性分析 127

Ⅰ 蛋白质组分分析 127

Ⅱ 蛋白质相对分子质量的测定（电泳法，Kingsburg系统） 129

Ⅲ 蛋白质等电点的测定 130

实验5-8 转氨酶（GOT、GPT）的提取和测定 132

实验5-9 酰脲含量的测定 134

实验5-10 次生物质含量的测定 135

Ⅰ 总黄酮含量的测定 135

Ⅱ HPLC法测定黄酮苷元含量 137

Ⅲ 茶多酚含量的测定 138

Ⅳ 花青素含量的测定 140

Ⅴ 穿心莲总内酯含量的测定 141

Ⅵ 咖啡碱的提取 142

【附】 索氏抽提器的结构及作用原理 143

Ⅶ 咖啡碱含量的测定（质量法） 144

Ⅷ 总皂苷的粗提及HPLC法测定其中甾体皂苷元的含量 146

Ⅸ 挥发油含量及成分分析 148

第六章 植物激素 151

实验6-1 吲哚乙酸（IAA）的提取、纯化和测定 151

实验6-2 生长素含量测定（小麦芽鞘切段伸长法） 153

实验6-3 吲哚乙酸氧化酶活性的测定 155

实验6-4 赤霉素（GA3）的生物鉴定（水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”） 156

实验6-5 GA3对小麦种子α-淀粉酶的诱导形成 158

实验6-6 酶联免疫法测定脱落酸（ABA）含量 160

实验6-7 细胞分裂素含量的测定（萝卜子叶测定法） 162

实验6-8 细胞分裂素对花色素苷积累的影响 163

实验6-9 生长调节剂对黄瓜性别表达的作用 164

实验6-10 生长调节剂对果实发育的影响 166

实验6-11 香石竹的切花保鲜 167

实验6-12 水仙的矮化 168

第七章 生长发育 170

实验7-1 种子生活力的快速测定 170

Ⅰ 氯化三苯基四氮唑法（TTC法） 170

Ⅱ 溴麝香草酚蓝法（BTB法） 171

Ⅲ 纸上荧光法 171

实验7-2 种子活力的测定 173

Ⅰ 抗冷法 173

Ⅱ 砂压法 174

Ⅲ 低温法 174

【附】 AOSA规定棉花种苗分级标准 175

Ⅳ 电导法 175

Ⅴ 加速衰老法 176

实验7-3 人工种子的制备方法 177

实验7-4 细胞生长周期测定（流式细胞法） 178

实验7-5 花粉活力的测定 181

Ⅰ 碘-碘化钾染色测定法 181

Ⅱ 过氧化物酶测定法 181

Ⅲ 氯化三苯基四氮唑法（TTC法） 182

实验7-6 花粉管生长的测定 183

【附】 培养基的配制 184

实验7-7 谷物种子萌发时淀粉酶的形成（示范） 186

实验7-8 谷物种子萌发时淀粉酶活性的测定 187

实验7-9 油类种子萌发时脂肪酸含量的变化 188

实验7-10 大豆萌发时氨基酸含量的变化 189

实验7-11 光对植物叶绿体运动的调控作用 191

实验7-12 H＋流向与植物生长模式 192

实验7-13 植物开花的光周期诱导 194

Ⅰ 苍耳的光周期诱导 194

Ⅱ 日本青萍6746的光周期诱导 194

实验7-14 球根花卉的花期调节 197

实验7-15 胚珠的离体受精 198

实验7-16 植物的组织培养 200

Ⅰ 愈伤组织的培养和分化 200

Ⅱ 原生质体的分离和培养 202

Ⅲ 离体培养下的花芽分化 203

第八章 植物与环境 205

实验8-1 植物的向性运动（示范） 205

实验8-2 花粉管生长的趋性 206

实验8-3 高温和低温对植物的伤害 207

实验8-4 渗透胁迫与脯氨酸的积累 208

实验8-5 冷胁迫对质膜H+-ATPase活性的影响 210

实验8-6 干旱处理对叶片脂氧合酶活性的影响 212

Ⅰ 分光光度法 212

Ⅱ 氧电极法 213

实验8-7 植物幼苗的超微弱发光 214

实验8-8 盐胁迫蛋白的检测 215

实验8-9 超氧化物歧化酶活性的测定 218

Ⅰ 比色法 218

Ⅱ 邻苯三酚自氧化法 219

实验8-10 植物组织中活性氧含量的测定 221

Ⅰ 过氧化氢含量的测定 221

1．二甲酚橙法 221

2．安替吡啉法 222

Ⅱ 氧自由基产生速率的测定（羟胺法） 223

实验8-11 植物膜脂脂肪酸的分析 224

实验8-12 丙二醛的测定 227

实验8-13 苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的测定 229

实验8-14 植物根系分泌物 230

Ⅰ 植物根系分泌物的观察 230

Ⅱ 植物根系分泌的酶 231

实验8-15 土壤中的酶 233

第九章 分子生物学 235

实验9-1 植物基因组DNA的制备及纯度分析 235

Ⅰ 植物基因组DNA的制备（尿素法） 235

Ⅱ 植物基因组DNA的制备（CTAB法） 236

Ⅲ 植物基因组DNA的纯度分析（电泳法） 238

Ⅳ 植物基因组DNA的纯度分析（分光光度计法） 239

实验9-2 PCR鉴定植物肌动蛋白基因 240

实验9-3 植物总RNA的提取 242

Ⅰ 植物总RNA的提取（LiCl法） 242

Ⅱ 植物总RNA的提取（异硫氰酸胍法） 244

实验9-4 干旱胁迫下拟南芥抗逆性特异基因Rd29A的表达 246

实验9-5 非洲菊（Gerbera hybrida）花瓣CHS基因的表达检测 247

Ⅰ CHS基因片段的获得和探针制备 248

Ⅱ Northern印迹法 250

实验9-6 根癌农杆菌介导的拟南芥转基因的操作方法 253

实验9-7 用GUS与启动子融合表达法检测特定基因表达时空特性 255

实验9-8 叶绿体DNA的制备 257

第十章 果蔬采后生理 259

实验10-1 果实硬度的测定 259

实验10-2 果蔬可溶性固形物的测定 260

实验10-3 果蔬含酸量的测定 262

实验10-4 果蔬维生素C含量的测定 264

实验10-5 果蔬乙烯释放量的测定（气相色谱法） 265

实验10-6 果蔬ACC含量的测定 268

实验10-7 气相色谱法测定果蔬中的乙醇含量 270

第二部分 综合性实验 275

实验1 植物在渗透胁迫条件下形态、生理和基因表达方面的适应性变化 275

实验2 热激诱导的玉米幼苗耐热性观察及其可能的生理生化机制 277

实验3 钙信使系统和活性氧对ABA诱导气孔关闭的影响 279

实验4 槐米中芸香苷的提取、纯化与鉴定 280

实验5 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 283

附录 286

附表1 常用酸碱的浓度 286

附表2 常用缓冲溶液的配制 286

附表3 几种常用缓冲剂的pKa 293

附表4 常用酸碱指示剂 293

附表5 泛用酸碱指示剂 294

附表6 离心机转速与相对离心力的换算 294

附表7 提高溶液饱和度（％）时应加入硫酸铵的质量（g） 295

附表8 不同温度下以空气饱和的水中的氧含量 296

附表9 常用植物激素的一些化学特性 296

附表10 植物组织和细胞培养常用培养基成分 297

附表11 常用培养基附加成分 298