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概述 1

第一篇 基础性实验 4

第一章　生物化学与分子生物学实验基本操作 4

第二章　分光光度法 10

实验一　血清蛋白质含量测定 16

实验二　DNA及RNA含量测定 17

实验三　血糖浓度测定 18

实验四　血清三酰甘油测定 19

实验五　血清总胆固醇含量的测定 21

实验六　血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性测定 21

第三章　层析技术 24

实验七 聚酰胺薄膜层析技术——蛋白质及肽的N末端氨基酸DNS分析法 26

实验八　凝胶层析（分子筛层析法）分离蛋白质 31

实验九 离子交换层析分离氨基酸 34

实验十 亲和层析纯化血清IgG 37

第四章　电泳技术 39

实验十一　血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳 41

实验十二　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 43

实验十三　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH 48

实验十四　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质分子量 51

实验十五　等电聚焦-聚丙烯酰胺凝胶平板电泳（IEF-PAGE）测定蛋白质等电点 54

实验十六　DNA琼脂糖凝胶电泳 56

第五章　印迹技术 58

实验十七　Southern印迹 58

实验十八　Northern印迹 60

实验十九　Western印迹 61

实验二十 非放射性Dig-dUTP标记DNA探针及杂交检测 64

第二篇 综合性实验 67

第六章　蛋白质定量分析方法学比较 67

实验二十一　Lowry改良法测定蛋白质浓度 67

实验二十二　考马斯亮蓝法（Bradford法）测定蛋白质浓度 69

实验二十三　BCA（二喹啉甲酸）法测定蛋白质浓度 71

实验二十四 紫外分光光度法测定蛋白质浓度 72

第七章　酶分离纯化与动力学分析 74

实验二十五　碱性磷酸酶分离纯化及比活性测定 77

实验二十六　碱性磷酸酶初速度的测定 81

实验二十七　碱性磷酸酶Km值测定 82

实验二十八　pH、温度及抑制剂对碱性磷酸酶活性的影响 85

第八章　DNA提取、扩增与测序 91

实验二十九　质粒DNA的提取 91

实验三十　基因组DNA的提取 93

实验三十一　聚合酶链反应（PCR） 94

实验三十二　DNA序列测定 96

第九章　RNA提取与鉴定 100

实验三十三　细胞RNA的提取 100

实验三十四　逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） 102

实验三十五　荧光定量PCR 103

第十章　基因克隆 106

实验三十六 目的基因与质粒的限制性内切酶消化 106

实验三十七 目的基因与质粒DNA的连接 107

实验三十八　质粒DNA的转化和筛选 108

第三篇 研究性实验 111

实验三十九　胰岛素和肾上腺素对血糖和肝糖原的影响 111

实验四十　血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 113

实验四十一　青豌豆素的分离纯化及其鉴定 117

实验四十二　外源基因在原核细胞的表达 119

实验四十三　蛋白质与DNA的相互作用分析 122

参考文献 126

附录 127