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第一篇　常用生物化学实验技术及原理第一章　层析技术 2

第二章　电泳技术 11

第三章　光谱技术 23

第四章　离心技术 36

第五章　膜技术及其在生物化学中的应用 42

第六章　蛋白质的分离纯化和检测 46

第七章　蛋白质的分析技术 54

第八章　临床生物化学检验 64

第二篇　学生实验 80

第九章　糖类的化学 80

实验一　糖类的性质实验（一）——糖类的颜色反应 80

Ⅰ．α-萘酚反应（Molisch反应） 80

Ⅱ．间苯二酚反应（Seliwanoff反应） 81

实验二　糖类的性质实验（二）——糖类的还原作用 82

实验三 总糖的测定——蒽酮比色法 84

实验四　还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法 86

实验五　血糖的定量测定——GOD-PAP法 88

第十章　脂质的化学 92

实验六 粗脂肪的提取和定量测定 92

实验七　脂肪碘值的测定 93

实验八　血清胆固醇的测定 96

Ⅰ．化学比色法——磷硫铁法 96

Ⅱ．化学比色法——邻苯二甲醛法 98

Ⅲ．酶法 99

第十一章　蛋白质的化学 102

实验九 总氮量的测定——凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法 102

实验十　氨基酸的分离鉴定——纸层析法 105

实验十一 蛋白质的性质实验（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应 107

Ⅰ．双缩脲反应 107

Ⅱ．茚三酮反应 109

Ⅲ．黄色反应 110

Ⅳ．考马斯亮蓝反应 112

实验十二 蛋白质的性质实验（二）——蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应 113

Ⅰ．蛋白质等电点的测定 113

Ⅱ．蛋白质的沉淀与变性 115

Ⅲ．尿蛋白定性检验 118

实验十三　蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 120

实验十四 蛋白质相对分子质量的测定（二）——凝胶过滤法 125

实验十五 蛋白质浓度的测定 129

Ⅰ．考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质的浓度 129

Ⅱ．用福林-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的浓度 131

实验十六　酪蛋白的制备 133

第十二章　核酸的化学 135

实验十七 大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定 135

实验十八 肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定 138

实验十九 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP 140

实验二十 紫外分光光度法测定核酸含量 142

实验二十一 应用PCR技术扩增DNA分子 144

第十三章　酶和维生素 147

实验二十二　酶的特性 147

Ⅰ．温度对酶活力的影响 147

Ⅱ．pH对酶活力的影响 148

Ⅲ．唾液淀粉酶的活化和抑制 150

Ⅳ．酶的专一性 151

实验二十三　枯草杆菌蛋白酶活力测定 154

实验二十四 底物浓度对酶促反应速率的影响——米氏常数的测定 156

实验二十五　胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定 160

实验二十六 维生素C的定量测定 165

Ⅰ．2,4-二硝基苯肼法 165

Ⅱ．荧光法 168

实验二十七 维生素A的定量测定 170

Ⅰ．三氯化锑法 170

Ⅱ．紫外分光光度法 173

第十四章　新陈代谢 176

实验二十八 肌糖原的酵解作用 176

实验二十九 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 178

实验三十　发酵过程中无机磷的利用 180

实验三十一　脂肪酸的β-氧化 183

实验三十二 血液中转氨酶活力的测定 185

实验三十三　组织中乳酸脱氢酶同工酶的活性染色 187

第十五章　综合实验 191

实验三十四 碱性磷酸酶的分离纯化及其特性研究 191

Ⅰ．碱性磷酸酶的分离纯化及各级分酶活性和蛋白含量的测定 191

Ⅱ．碱性磷酸酶的纯度、蛋白印迹鉴定及其亚基相对分子质量测定 196

Ⅲ．碱性磷酸酶的酶学特性研究 200

实验三十五　溶菌酶的提取和系列性质测定 207

Ⅰ．溶菌酶的分离纯化 208

Ⅱ．溶菌酶分离纯化参数的测定 209

Ⅲ．SDS-PAGE鉴定纯化产物的纯度和测定溶菌酶的相对分子质量 212

Ⅳ．溶菌酶的酶学特性研究 214

Ⅴ．分子筛层析测酶相对分子质量 216

附录 219

一、实验室基本操作 219

二、试剂的配制及其分级 227

三、实验误差的统计学处理 229

四、硫酸铵饱和度计算表 232

五、常用核酸、蛋白质换算数据 233

六、氨基酸符号及相应密码子 234

七、常见酸碱试剂的浓度及密度 235

八、常用缓冲液的配制 236

九、常用酸碱指示剂 243

十、离心机转速与相对离心力的换算 244

十一、层析中常用介质的规格及性能 246

参考文献 250