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第一部分 分子生物学实验 3

背景资料 3

实验1 绿色荧光蛋白（GFP）基因转入原核细胞 11

实验2 目的基因载体的分离纯化与质量测定 19

实验3 含绿色荧光蛋白基因载体的酶切与电泳鉴定 25

实验4 增强型绿色荧光蛋白基因表达载体的构建 33

实验5 绿色荧光蛋白基因的表达与鉴定 49

实验6 PCR体外扩增绿色荧光蛋白基因及其克隆与表达 63

实验7 红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 78

实验8 谷胱甘肽转硫酶-绿色荧光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表达 92

实验9 增强型绿色荧光蛋白的定点突变及表达检测 108

实验10 携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的温度敏感型表达载体的构建、鉴定和表达量的测定 130

附录10-1：pBV220全序列（从EcoR Ⅰ酶切位点第一个A开始） 151

附录10-2：EGFP基因全序列 153

实验11 双报告基因系统的构建及初步检测 154

附录11-1：Luciferase基因全序列 175

附录11-2：萤光素酶检测步骤 176

实验12 以绿色荧光蛋白（GFP）为报告基因构建重组酵母检测环境中雌二醇的含量 178

实验13 绿色荧光蛋白的分离、纯化及其鉴定 198

实验14 谷胱甘肽转硫酶与绿色荧光蛋白融合蛋白的分离、纯化和酶学的测定 216

附录Ⅰ 242

第二部分 生物化学实验 255

电泳技术 255

实验15 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 256

实验16 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 263

实验17 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳 269

亲和色谱技术 276

实验18 鸡卵黏蛋白的分离纯化 277

实验19 胰蛋白酶粗提取与活性测定 283

实验20 亲和色谱分离胰蛋白酶 287

实验21 胰蛋白酶动力学测定 291

免疫学技术 301

实验22 抗血清的制备 303

实验23 抗血清抗体的测定 306

实验24 酶联免疫吸附测定 313

附录Ⅱ 319