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第一章　动物生物化学实验常识 1

第一节　动物生化实验技术发展简史 1

第二节　动物生化实验室常识与规则 2

一、实验室规则 2

二、实验室安全及防护知识 2

第三节　生化实验基本操作 3

一、玻璃仪器的洗涤 3

二、刻度吸管的使用 4

三、微量移液器的使用 5

四、试管中液体的混匀法 5

二、血清的制备 6

一、血液样品的采集 6

第四节　常用实验样品的处理 6

三、全血及血浆的制备 7

四、无蛋白血滤液的制备 8

五、生物大分子的基本制备技术 9

第五节　实验报告的撰写规范 15

一、实验记录 15

二、定性实验报告书写格式 16

三、定量实验报告书写格式 16

第二章　常用生化实验技术原理及应用 17

第一节　离心技术的原理及应用 17

一、离心技术的基本原理 17

二、离心机的主要类型 17

三、常用的离心分离方法 18

四、离心操作的注意事项 20

第二节　光度测定法的原理及应用 21

一、分光光度法的基本原理 21

二、光度法的计算 22

三、使用分光光度计的注意事项 24

四、自动生化分析技术 24

第三节 电泳技术的原理及应用 25

一、影响电泳迁移率的因素 25

二、几种常用的电泳法 26

第四节　层析技术的原理及应用 32

一、层析技术的常用术语 32

三、常用的层析方法 33

二、层析技术的分类 33

四、柱层析的基本装置 34

五、柱层析的基本操作 34

第五节 DNA重组技术 37

一、多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）的基本过程 37

二、DNA重组技术（Recombinant DNA Technology） 38

三、DNA重组技术的基本步骤 38

第三章 酶学实验内容 40

实验一 唾液淀粉酶活性观察 40

实验二 转氨酶活性测定——King氏法 43

实验三 琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制的观察 46

Ⅰ．福林－吴宪氏法 48

实验四 血糖的测定 48

第四章 糖类实验内容 48

Ⅱ．葡萄糖氧化酶法 50

实验五 肝糖原的提取和鉴定 52

第五章 脂类实验内容 54

实验六 血清总脂含量测定（香草醛法） 54

实验七 肝组织的生酮作用 56

实验八 血清游离脂肪酸测定（一次提取比色法） 59

实验九 血清总胆固醇测定（胆固醇氧化酶法） 61

第六章 蛋白质实验内容 63

实验十 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 63

Ⅰ．双缩脲法 66

实验十一 蛋白质的含量测定 66

Ⅱ．Folin－酚试剂法 67

Ⅲ．紫外光吸收法 68

Ⅳ．考马斯亮蓝结合法 69

实验十二 血清尿素氮（BUN）的测定（二乙酰一肟法） 70

实验十三 氨基酸纸上层析 72

第七章 核酸实验内容 75

实验十四 动物组织DNA提取 75

实验十五 DNA的定量测定（二苯胺法） 77

实验十六 动物肝脏总RNA的制备 79

实验十七 RNA的定量测定（地衣酚法） 81

实验十八 紫外吸收法测定核酸的含量 83

实验十九 维生素B2的定量测定（荧光法） 85

第八章 维生素实验内容 85

实验二十 维生素C的提取和含量测定 87

第九章 综合性实验内容 89

实验二十一 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同功酶 89

实验二十二 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量 92

实验二十三 碱性磷酸酶的分离制备及活性检测 97

Ⅰ．碱性磷酸酶的有机溶剂分级沉淀 97

Ⅱ．碱性磷酸酶的活性与比活性测定 99

实验二十四 血浆IgG的分离、纯化及鉴定 104

Ⅰ．盐析法分离制备血浆IgG 104

Ⅱ．凝胶过滤法脱盐和分离IgG 106

Ⅲ．DEAE－离子交换剂纯化血浆IgG 108

Ⅳ．聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度 110

实验二十五 细胞色素C的制备及其测定 115

实验二十六 目的基因的PCR扩增及产物的电泳检测 117

Ⅰ．目的基因的PCR扩增 117

Ⅱ．扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 118

附录 121

附录1 常用缓冲溶液的配制方法 121

附录2 实验室中常用酸碱密度和浓度的关系 126

附录3 常用洗液的配制 127

附录4 层析法常用数据表及性质 127

附录5 硫酸铵溶液饱和度计算表 129

附录6 生物化学相关专业部分因特网网址 130

参考文献 131