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项目一 生物化学实验基本技能训练 1

一、学习生物化学实用技术的目的 1

二、生物化学实用技术的学习方法 2

三、生物化学实验室的安全知识 2

（一）实验室安全的预防措施 2

（二）实验室伤害的救护措施 3

四、生物化学实验的基础知识 4

（一）化学试剂及其取用 4

（二）化学溶液及其配制 5

（三）常用仪器及其操作 6

五、常用的生物化学实验技术及原理 16

（一）生物大分子的制备和保存技术 16

（二）色谱分离技术 17

（三）分光光度技术 21

（四）电泳技术 23

项目二 氨基酸生化产品的制备和检测 26

一、项目介绍 26

二、学习目标 26

三、背景知识 26

（一）氨基酸的定义 26

（二）氨基酸的功能 27

（三）基本氨基酸的组成 28

（四）氨基酸的分类 28

（五）氨基酸的性质 31

（六）氨基酸的生物分解代谢 32

（七）氨基酸的生物合成代谢 38

（八）氨基酸的制备方法 39

（九）氨基酸的鉴定方法 40

四、项目实施 40

训练任务 氨基酸的分离鉴定 40

五、拓展训练 45

设计任务一 人发中L-精氨酸的提取 45

设计任务二 脯氨酸含量的测定 45

项目三 多肽和蛋白质生化产品的制备和检测 46

一、项目介绍 46

二、学习目标 46

三、背景知识 47

（一）蛋白质的功能 47

（二）蛋白质的分类 47

（三）蛋白质的组成 48

（四）蛋白质的结构 48

（五）蛋白质的结构与功能的关系 53

（六）蛋白质的性质 54

（七）蛋白质的分离纯化技术 56

（八）蛋白质的定量技术 60

（九）蛋白质分子量的测定 61

（十）蛋白质一级结构的测定 63

四、项目实施 64

训练任务一 牛乳中酪蛋白和乳清蛋白的提取 64

训练任务二 蛋白质的纯化——葡聚糖凝胶柱色谱 66

训练任务三 绿豆芽中蛋白质含量的测定——分光光度法 68

训练任务四 未知蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 70

项目四 酶类生化产品的制备和检测 73

一、项目介绍 73

二、学习目标 73

三、背景知识 74

（一）酶的概念 74

（二）酶的特性 74

（三）酶的分类 75

（四）酶的命名 76

（五）酶的分子结构 77

（六）酶的作用机理 77

（七）酶促反应动力学 79

（八）酶活性的调节与控制 83

（九）维生素 85

（十）酶的分离提纯技术 91

（十一）酶活力的测定 92

四、项目实施 92

训练任务一 植物组织中过氧化物酶的分离与纯化 92

训练任务二 植物组织中过氧化氢酶的活力测定 94

训练任务三 水果或蔬菜中维生素C含量的测定 96

五、拓展训练 100

设计任务一 小麦种子中淀粉酶活力测定 100

设计任务二 植物叶片硝酸还原酶活性的测定 100

项目五 核酸生化产品的制备和检测 102

一、项目介绍 102

二、学习目标 102

三、背景知识 103

（一）核酸的化学组成 103

（二）核酸的分类及功能 106

（三）核酸的结构 106

（四）核酸的性质 111

（五）核酸的制备技术 113

（六）核酸含量的测定方法 114

（七）核酸序列的测定方法 116

四、项目实施 117

训练任务一 大肠杆菌基因组DNA的提取 117

训练任务二 DNA的鉴定——琼脂糖凝胶电泳技术 119

训练任务三 DNA的含量测定——分光光度技术 120

训练任务四 酵母菌目标基因的体外扩增——PCR技术 124

五、拓展训练 126

设计任务一 质粒DNA的提取和测定 126

设计任务二 植物DNA的提取和测定 126

项目六 糖类生化产品的制备和检测 127

一、项目介绍 127

二、学习目标 127

三、背景知识 127

（一）糖的概念 127

（二）糖的功能 128

（三）糖的分类 128

（四）单糖的结构和性质 129

（五）双糖的结构与性质 134

（六）多糖的结构与性质 135

（七）糖的生物分解代谢 137

（八）糖的合成代谢 148

（九）糖含量测定方法 150

（十）糖分子量的测定方法 153

四、项目实施 153

训练任务一 食品中还原糖含量的测定 153

训练任务二 血糖含量的测定 157

五、拓展训练 160

设计任务 香菇多糖的提取 160

项目七 脂类生化产品的制备和检测 161

一、项目介绍 161

二、学习目标 161

三、背景知识 161

（一）脂类的概念 161

（二）脂类的生物学功能 162

（三）脂类的分类 162

（四）油脂 162

（五）类脂 165

（六）脂肪的分解代谢 167

（七）脂肪的合成代谢 172

（八）脂肪酸分解代谢与合成代谢途径的比较 175

（九）食品中脂肪含量的测定 176

四、项目实施 177

训练任务 花生中脂含量的测定 177

五、拓展训练 179

设计任务 蛋黄中卵磷脂（或胆固醇）的提取 179

附录一 常用生化缓冲溶液的配制 180

附录二 常用指示剂的配制 185

附录三 常见市售酸碱的浓度 186

附录四 分子生物学常用溶液配制 187

参考文献 192