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第一篇 卵黄抗体技术理论基础 1

第1章 鸟类免疫系统与抗体发生机制概述 3

1．1 鸟类免疫系统简介 3

1．1．1 鸟类发生学 3

1．1．2 鸟类免疫系统特征 4

1．1．3 免疫分子 12

1．2 鸟类抗体的发生与分化 15

1．2．1 鸟类抗体发生与分化机制 15

1．2．2 卵黄抗体在抗体进化中的地位 18

1．2．3 卵黄抗体在物种间的差异性 20

参考文献 21

第2章 卵黄抗体特征 24

2．1 卵黄抗体技术发展简史 24

2．2 卵黄抗体转运机制 26

2．2．1 鸡的生殖系统与卵的形成 27

2．2．2 抗体转运入卵的多种途径 27

2．2．3 参与卵黄抗体转运的受体 27

2．3 卵黄抗体特性分析 31

2．3．1 IgY与IgG的分子结构比较 31

2．3．2 卵黄抗体的理化特性 34

2．3．3 卵黄抗体的药剂学研究 36

2．3．4 卵黄抗体优势分析 37

参考文献 40

第3章 卵黄抗体的研发模式 43

3．1 多克隆卵黄抗体 43

3．1．1 多克隆卵黄抗体的应用 43

3．1．2 多克隆卵黄抗体的制备 43

3．2 基因特异性卵黄抗体 44

3．3 单克隆卵黄抗体 46

3．3．1 单克隆卵黄抗体产生的理论基础 46

3．3．2 单克隆卵黄抗体研究现状 47

参考文献 50

第二篇 卵黄抗体技术与实验方法 53

第4章 蛋鸡的饲养与免疫 55

4．1 蛋鸡的饲养 55

4．1．1 蛋鸡的笼养方式 55

4．1．2 蛋鸡的饲养环境 57

4．2 SPF蛋鸡 57

4．3 免疫方法的选择与变量控制 60

4．3．1 实验蛋鸡的选择 60

4．3．2 抗原剂量控制 61

4．3．3 佐剂的使用 61

4．3．4 抗原的施用途径 62

4．3．5 免疫间隔 64

4．3．6 免疫变量的互动影响 64

4．3．7 卵黄抗体浓度变化 64

4．3．8 免疫行为对鸡产蛋能力的影响 65

4．3．9 蛋鸡生物节律对抗体产量波动的影响 65

4．4 实验动物保护与使用相关法规与机构 67

4．4．1 国外情况 67

4．4．2 国内情况 68

参考文献 69

第5章 卵黄抗体的提取与分离纯化方法 72

5．1 鸡蛋与卵黄结构及组分 73

5．1．1 鸡蛋结构及组成 73

5．1．2 卵黄成分 75

5．2 卵黄抗体的提取技术 76

5．2．1 卵黄收集方法 76

5．2．2 冻融法 77

5．2．3 透析法 77

5．2．4 超临界流体提取法 78

5．2．5 盐析法 79

5．2．6 超滤法 82

5．2．7 介体电泳技术 87

5．2．8 双向凝胶电泳技术 89

5．3 卵黄抗体分离方法 90

5．3．1 聚乙二醇沉淀法 90

5．3．2 聚乙二醇／乙醇沉淀法 92

5．3．3 硫酸葡聚糖沉淀法 93

5．3．4 氯仿／聚乙二醇法 95

5．3．5 有机溶剂抽提法 96

5．3．6 水稀释法 98

5．3．7 天然胶法 100

5．3．8 特殊化学物提取法 100

5．3．9 去污剂提取法 101

5．4 卵黄抗体纯化方法 102

5．4．1 凝胶过滤色谱 102

5．4．2 离子交换层析 106

5．4．3 亲和层析 108

5．4．4 疏水层析 113

5．5 分离提取纯化方法的比较及综合应用 114

5．5．1 特异性卵黄抗体的提取量分析 114

5．5．2 各种提取、分离纯化方法的比较及应用 114

5．5．3 卵黄抗体分离提取纯化相关市售产品 116

参考文献 117

第6章 卵黄抗体检测技术与方法 123

6．1 免疫沉淀反应 123

6．1．1 概述 123

6．1．2 单向琼脂扩散实验 124

6．1．3 双向琼脂扩散实验 126

6．1．4 免疫电泳 127

6．1．5 火箭免疫电泳 128

6．1．6 对流免疫电泳 130

6．2 免疫荧光技术 132

6．2．1 概述 132

6．2．2 实验方法 132

6．3 ELISA方法 135

6．3．1 概述 135

6．3．2 间接ELISA测定抗体法 136

6．3．3 双抗体夹心ELISA法测抗原 137

6．3．4 竞争法 138

6．3．5 捕获ELISA 139

6．3．6 注意事项 140

6．4 免疫印记法 141

6．4．1 实验原理 141

6．4．2 实验方法 141

6．5 免疫组化技术 144

6．5．1 实验原理 144

6．5．2 实验方法 144

6．6 流式细胞术 145

6．6．1 实验原理 145

6．6．2 实验方法 145

6．7 补体结合实验 147

6．7．1 实验原理 147

6．7．2 实验方法 148

6．8 免疫胶体金技术 149

6．8．1 实验原理 149

6．8．2 实验方法 150

6．9 免疫电镜技术 152

6．9．1 实验原理 152

6．9．2 实验方法 152

参考文献 153

第三篇 卵黄抗体技术的应用 157

第7章 卵黄抗体技术在医药领域的应用 159

7．1 在疾病诊断、检测中的应用 159

7．1．1 检测病原体 159

7．1．2 在检测诊断新领域的应用 161

7．2 预防及治疗口腔、咽喉疾病 164

7．2．1 口腔疾病 164

7．2．2 咽喉疾病 166

7．3 预防及治疗胃肠道疾病 167

7．4 作为食品添加剂与功能食品 168

7．5 作为饲料添加剂 168

7．5．1 在仔猪生产中的应用 169

7．5．2 在养禽上的应用 171

7．6 预防及治疗水产动物疾病 173

7．6．1 细菌性水产疾病 175

7．6．2 病毒性水产疾病 176

7．6．3 在水产疾病诊断中的应用 177

7．7 预防及防治牛乳房炎 178

7．8 在病毒性疾病方面的应用 179

7．8．1 预防及治疗传染性非典型肺炎 179

7．8．2 预防及治疗生殖器疱疹病毒 180

7．8．3 预防及治疗猪繁殖和呼吸综合征 181

7．8．4 预防及治疗猪瘟 181

7．8．5 预防及治疗牛病毒性腹泻病 182

7．8．6 预防及治疗口蹄疫 183

7．8．7 预防及治疗蓝舌病 183

7．8．8 预防及治疗犬细小病毒病 184

7．8．9 预防及治疗狂犬病 185

7．8．10 预防及治疗犬瘟热 186

7．8．11 预防及治疗水貂肠炎病毒 187

7．8．12 预防及治疗传染性法氏囊病 187

7．8．13 预防及治疗鸡新城疫 188

7．8．14 预防及治疗流感病毒 189

7．8．15 预防及治疗鸭肝炎病毒 190

7．8．16 预防及治疗小鹅瘟 190

7．8．17 预防及治疗朊病 191

7．9 预防及治疗真菌感染 192

7．10 治疗及检测寄生虫类疾病 193

7．11 治疗及检测蛇毒疾病 196

7．12 抑制肿瘤 197

7．13 协助人类免疫避孕 198

7．14 治疗囊肿性纤维化 199

7．15 防止器官移植排斥反应 199

7．16 协助生物反恐 200

7．17 替代抗生素 200

7．18 蛋白质组学中的应用 201

参考文献 201

第8章 卵黄抗体技术前景展望 211

附录1 卵黄抗体技术中常用溶剂配制方法 215

附录2 单克隆卵黄抗体的研发案例 220

附录3 饲养SPF鸡所需软、硬件设施，技术环节与标准 226

附录4 部分商业化的IgY产品介绍表 233