实用流式细胞术 血液病篇pdf电子书版本下载

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第一章 流式细胞仪的工作原理&吴煦 杨海霞 1

第一节 流式细胞仪的发展史 1

第二节 流式细胞仪的基本原理 3

第三节 流式细胞仪的结构组成 3

一、激光及光束成形系统 3

二、液流系统 4

三、流式细胞仪中的光信号收集系统 5

四、电子系统 8

五、FCM测量数据的存贮、显示与分析 10

第四节 流式细胞仪的检测信号及意义 11

一、散射光信号的检测 11

二、荧光信号的检测 13

第五节 流式细胞仪的主要分析技术指标 17

一、荧光灵敏度 17

二、仪器分辨率 17

三、前向散射光灵敏度 18

四、细胞分析速度 18

第六节 细胞分选 18

一、电荷式细胞分选 18

二、捕获管分选 19

三、FCM分选指标 20

第七节 高端流式细胞仪的简介和展望 21

一、FACSCantoⅡ流式细胞仪 21

二、LSRⅡ高端生命科学研究型流式细胞仪 22

三、FACSAriaⅡ高速流式细胞分选仪 23

四、Influx高端流式细胞分选仪 24

五、MACSQuantTM流式细胞仪——细胞分析的里程碑 25

第二章 流式细胞仪的标本制备、检测及质量控制&王亚哲 28

第一节 标本的制备及保存 28

一、标本的准备 28

二、细胞计数 29

三、荧光染色 30

四、质量控制 33

第二节 荧光素的特性及应用 34

一、常用荧光素的主要特点 35

二、荧光素的选择和搭配 37

第三节 仪器调整及数据获取 40

一、仪器的校准和调整 40

二、流式细胞仪测定及数据获取 44

第四节 数据分析和报告 45

一、数据分析 45

二、数据解释及报告 49

第三章 正常血细胞发育过程的抗原表达规律&刘艳荣 52

第一节 正常髓细胞系抗原的表达规律 52

一、正常粒系和单核细胞系抗原的表达规律 52

二、正常红系细胞的分化规律 60

三、正常巨核细胞分化发育的抗原表达规律 60

第二节 正常淋巴细胞分化发育的抗原表达规律 61

一、正常B细胞抗原的表达规律 61

二、正常T细胞抗原的表达规律 64

第四章 急性白血病的免疫表型&刘艳荣 袁婷婷 67

第一节 急性白血病的诊断与分型 67

一、白血病的概念 67

二、急性白血病的FAB分型 67

三、急性白血病的MIC分型 69

四、急性白血病1999版WHO分类 70

五、2008版WHO血液／淋巴系统肿瘤分类 71

六、2008版与1999版WHO分类中髓系和淋巴系肿瘤分类的比较 73

第二节 急性髓细胞白血病的免疫表型分析 73

一、AML伴重现性的遗传学异常 74

二、AML无其他特异性异常（NOS） 86

第三节 急性淋巴细胞白血病的免疫表型分析 100

一、B淋巴母细胞白血病／淋巴瘤 100

二、B淋母细胞白血病／淋巴瘤伴重现性的遗传学异常 104

三、T淋巴母细胞白血病／淋巴瘤 108

第四节 急性系列不明型白血病的免疫表型 116

一、急性未分化型白血病 118

二、混合表型急性白血病伴t（9；22）（q34；q11.2）；BCR-ABL1 118

三、混合表型急性白血病伴t（V；11q23）；MLL重排 118

四、混合表型急性白血病，B／髓，NOS 119

五、混合表型急性白血病，T／髓，NOS 120

六、混合表型急性白血病，NOS-罕见类型 120

七、其他混合表型急性白血病 121

第五章 髓细胞增殖性疾病的免疫表型分析&刘艳荣 徐娟 万岁桂 124

第一节 2008版WHO对髓细胞增殖性疾病的分类 124

一、骨髓增殖性肿瘤 124

二、骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤（MDS/MPN） 124

三、骨髓增生异常综合征（MDS） 124

第二节 骨髓增殖性肿瘤 125

一、慢性粒细胞白血病，BCR-ABL1阳性 125

二、慢性嗜酸性粒细胞白血病，NOS 127

三、肥大细胞增多症 128

四、骨髓增殖性肿瘤，未分类 129

第三节 骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤 129

一、慢性粒单细胞白血病 129

二、非典型慢性粒细胞白血病，BCR-ABL1阴性 131

三、幼年型粒单细胞白血病 131

四、骨髓增生异常／骨髓增殖性肿瘤，未分类 131

第四节 骨髓增生异常综合征 132

一、概述 132

二、MDS的细胞表面标记 133

三、MDS异常结果的判断 136

四、质量控制 139

五、结论 139

第六章 流式细胞术在淋巴增殖性肿瘤中的应用&朱焕玲 141

第一节 概述 141

一、正常外周血及骨髓标本 141

二、良性／反应性实体淋巴组织（淋巴结、扁桃体） 142

第二节 成熟B细胞肿瘤 143

一、概述 143

二、FCM在成熟B淋巴细胞肿瘤中的作用 145

三、2008版WHO分类B淋巴细胞增殖性肿瘤的免疫分析 147

第三节 成熟T/NK细胞肿瘤 155

一、概述 155

二、常见的T/NK细胞肿瘤 160

第四节 病例分析 165

一、多发性骨髓瘤 165

二、脾边缘带淋巴瘤 166

三、毛细胞白血病 166

四、套细胞淋巴瘤 167

五、弥漫大B细胞淋巴瘤 170

六、T大颗粒细胞白血病 171

七、NK白血病／淋巴瘤 172

八、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤 174

九、间变大细胞淋巴瘤 176

十、肝脾T细胞淋巴瘤 177

第七章 慢性淋巴细胞白血病和多发性骨髓瘤的免疫表型特点&李建勇 王亚哲 179

第一节 慢性淋巴细胞白血病 179

一、概述 179

二、CLL的免疫表型特点 180

三、FCM检测CLL的预后指标 181

四、单克隆B淋巴细胞增多症 182

五、鉴别诊断 182

第二节 多发性骨髓瘤 188

一、区分正常和异常浆细胞的抗原 189

二、骨髓瘤细胞的设门分析 190

三、多发性骨髓瘤的抗原表达 190

四、免疫表型与预后 192

五、免疫分型与靶向治疗 192

六、用于多发性骨髓瘤免疫表型分析的抗体组合 192

第八章 急性白血病微量残留病的流式细胞术检测&刘艳荣 196

第一节 概述 196

一、微量残留病检测的理由 196

二、微量残留病检测的方法 196

三、白血病相关的免疫表型特点 197

第二节 急性淋巴细胞白血病残存白血病检测 198

一、B系-ALL的残存白血病检测 198

二、T系-ALL的残存白血病检测 212

三、ALL微量残留病检测的临床意义 215

四、ALL微量残留病检测中FCM与PCR方法的比较 217

第三节 急性髓细胞白血病微量残留病检测 219

一、正常髓系祖细胞的抗原表达特点 219

二、AML微量残留病检测的抗体组合和LAIP特点 222

三、AML微量残留病检测的临床意义 234

四、AML微量残留病检测中FCM与PCR的比较 235

第九章 慢性淋巴细胞增殖性疾病的微量残留病检测&王亚哲 239

第一节 慢性淋巴细胞白血病 239

一、CLL的微量残留病检测 239

二、非霍奇金淋巴瘤的微量残留病检测 242

第二节 多发性骨髓瘤 243

一、多发性骨髓瘤微量残留病的检测方法及比较 243

二、FCM检测多发性骨髓瘤微量残留病的意义 245

三、FCM检测多发性骨髓瘤微量残留病的问题和共识 246

第十章 流式细胞术分析造血干细胞&刘艳荣 250

第一节 造血细胞的分化、发育与成熟规律 250

一、造血 250

二、造血干细胞的分化、发育、成熟 252

第二节 造血干／祖细胞的生物学特征 252

一、造血干细胞 252

二、造血干／祖细胞的实验研究 253

三、造血干祖细胞分化的等级性 255

第三节 造血干／祖细胞的免疫表型分析 256

一、造血干细胞的免疫表型特点 256

二、造血祖细胞的免疫表型特点 257

第四节 造血干／祖细胞的计数 258

一、FCM计数CD34+细胞的标准化方案 260

二、ISHAGE法检测CD34+细胞 262

三、ProCOUNTTM造血干／祖细胞计数 265

第十一章 流式细胞术在造血干细胞移植中的应用&常英军 主鸿鹄 刘艳荣 271

第一节 造血干细胞移植后造血、免疫重建监测 271

一、HSCT后的造血重建 271

二、HSCT后的免疫重建 273

三、HSCT后造血和免疫重建的研究前景 279

第二节 造血干细胞移植后微量残留病检测 280

一、微量残留病检测在造血干细胞移植中应用的必要性 280

二、FCM检测微量残留病的方法学 280

三、HSCT前微量残留病检测的意义 281

四、HSCT后微量残留病检测的意义 282

五、HSCT后微量残留病检测的时间点 284

六、微量残留病检测对移植后供者淋巴细胞输注的疗效判断 285

第十二章 常见红细胞病的流式分析&邵宗鸿 付蓉 李丽娟 刘惠 刑莉民 289

第一节 阵发性睡眠性血红蛋白尿 289

一、概述 289

二、锚连蛋白检测 289

三、嗜水气单胞菌溶素变异体检测 293

四、结语和展望 295

第二节 免疫相关性血细胞减少症 296

一、概述 296

二、骨髓单个核细胞膜抗体的检测 296

三、B淋巴细胞胞内抗体的检测 299

四、B淋巴细胞亚群的检测 300

五、骨髓B淋巴细胞凋亡相关蛋白水平 301

六、DC亚群的检测（DC1/DC2） 303

七、Th1细胞和Th2细胞的检测 304

八、Th17细胞的检测 306

九、Treg细胞激活状态的检测 307

十、结语和展望 308

第三节 自身免疫性溶血性贫血 308

一、概述 308

二、FC-DAT实验原理 309

三、试剂 309

四、方法 309

五、FC-DAT结果 310

六、临床意义 311

七、结语和展望 311

第十三章 流式细胞术与血小板分析&刘艳荣 王亚哲 袁婷婷 312

第一节 概述 312

一、基本概念 312

二、血小板的生理功能 312

三、流式细胞术在血小板分析中的应用 313

第二节 血小板膜表面糖蛋白分析 314

一、血小板膜糖蛋白组成 314

二、膜糖蛋白检测 315

第三节 流式网织血小板计数 318

一、检测方法 319

二、临床意义 320

第四节 血小板自身抗体测定 321

一、检测方法 321

二、临床意义 323

第五节 流式血小板计数 323

一、红细胞与血小板比值法 324

二、荧光微粒绝对计数法（TruCOUNT法） 324

三、临床意义 325

第十四章 免疫功能检测&万岁桂 327

第一节 淋巴细胞亚群分析 327

一、淋巴细胞的发育及其表面标记 327

二、淋巴细胞的亚群 329

三、淋巴细胞亚群的免疫表型分析方法 333

第二节 Th1/Th2细胞 338

一、Th细胞的表型和功能特征 338

二、Th1/Th2细胞流式细胞仪检测方法 339

第三节 调节性T细胞 341

一、天然CD4+CD25+Treg 342

二、Tr1细胞 343

三、Th3细胞 343

四、Treg流式细胞术检测方法 343

第十五章 免疫分型的抗体组合原则及报告标准化&刘艳荣 347

第一节 常用的抗体介绍 347

第二节 白血病免疫分型的抗体组合原则和实例 351

一、国际指南中抗体使用原则介绍 351

二、国际流式细胞专家的共识 352

三、笔者使用的主要抗体和组合实例 354

第三节 免疫分型报告的标准化 358

附录 《血液淋巴系统肿瘤细胞的临床流式分析指南》解读 363