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第一部分 生物分离纯化实验实训基本要求 1

一、实验实训目的 1

二、实验实训基本要求 1

第二部分 生物分离纯化单元操作技术训练 4

第一章 预处理与固液分离技术 4

实验一 离心法收集酵母菌 4

实验二 超声波法破碎酵母细胞 6

实验三 酶法破碎大肠杆菌 12

实验四 差速离心法分离叶绿体和线粒体 13

第二章 提取技术 16

实验一 青霉素的萃取与萃取率的计算 16

实验二 CO2超临界萃取大豆油 17

实验三 双水相萃取分离植物蛋白酶 18

实验四 超声波法提取茶多酚 23

第三章 固相析出分离技术 26

实验一 丙酮沉淀法提纯植物蛋白 26

实验二 盐析法分离卵清蛋白 33

实验三 等电点法分离乳蛋白素 34

实验四 重结晶法制备甘草酸 36

第四章 膜分离技术 38

实验一 蛋白质溶液透析 38

实验二 中空纤维超滤膜法浓缩料液 40

第五章 层析技术 44

实验一 自动液相层析仪使用练习 44

实验二 凝胶层析法脱盐 46

实验三 吸附层析分离葛根素 49

实验四 离子交换法提取溶菌酶 52

第六章 浓缩与干燥技术 56

实验一 真空蒸发浓缩 56

实验二 牛奶冷冻干燥 57

第三部分 生物分离纯化综合实训 60

第一章 蛋白质分离纯化实训 60

知识准备 60

实训项目一 超氧化物歧化酶的分离纯化与测活 62

任务一 试剂配制和其他准备 63

任务二 大蒜SOD的提取分离 64

任务三 大蒜SOD的测活和纯化效果评价 65

实训项目二 重组淀粉酶的分离纯化 68

任务一 重组α－淀粉酶的表达 69

任务二 重组大肠杆菌细胞收集和破碎 70

任务三 SDS－PAGE检测重组α－淀粉酶 71

任务四 重组α－淀粉酶酶活测定 72

任务五 硫酸铵分级盐析初步纯化重组α－淀粉酶 74

任务六 重组α－淀粉酶包涵体的复性 76

任务七 亲和层析纯化重组α－淀粉酶 77

任务八 重组α－淀粉酶的冷冻干燥 79

第二章 氨基酸分离纯化实训 81

知识准备 81

实训项目 谷氨酸的分离纯化 83

任务一 离子交换树脂的预处理 86

任务二 膜法除发酵液菌体 86

任务三 离子交换法回收谷氨酸 88

第三章 抗生素分离纯化实训 91

知识准备 91

实训项目 青霉素的分离纯化仿真实训 93

任务一 发酵液的预处理 95

任务二 萃取法提取青霉素 96

任务三 青霉素的精制操作 99

第四章 多糖分离纯化实训 102

知识准备 102

实训项目 香菇多糖的分离纯化 103

任务一 香菇多糖提取液制备 105

任务二 香菇多糖初步除杂 105

任务三 凝胶柱层析法纯化香菇多糖 106

任务四 香菇多糖分析检测 108

参考文献 110