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第1篇总 论 1

实验须知 1

目 录 1

第1章基本操作技术 3

第1节玻璃器皿的清洗 3

第2节吸量管的种类和使用 4

第3节溶液的混匀、过滤及离心 6

第4节实验样品的制备 7

第5节分光光度法 8

第1节电泳的基本原理 15

第2章电泳技术 15

第2节影响电泳的主要因素 16

第3节区带电泳的分类 17

第4节几种常见的电泳方法 17

第5节二维电泳 22

第3章层析技术 28

第1节层析技术的分类 28

第2节层析中的常用术语 29

第3节纸层析 31

第4节薄层层析 33

第5节离子交换层析 34

第6节凝胶层析 36

第7节亲和层析 39

第4章离心分离技术 40

第1节离心分离技术的原理 40

第2节离心机的分类与特点 40

第5章印迹技术 43

第1节Southern印迹 43

第2节Northern印迹 45

第3节斑点杂交 46

第4节Western印迹 46

第1节PCR技术概述 48

第6章聚合酶链式反应 48

第2节PCR技术的基本原理 49

第3节PCR反应条件的优化 51

第4节PCR技术的扩展 54

第5节PCR中应注意的问题 58

第6节PCR在医学中的应用 60

第2篇各 论 63

第7章蛋白质与氨基酸 63

实验1蛋白质含量的测定 63

实验2血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳定量测定 68

实验3凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白（或DNP-酪蛋白） 74

实验4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量 77

实验5蛋白质的沉淀反应 82

实验6酪蛋白等电点的测定 85

实验7氨基酸的薄层层析 87

实验8 DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析 89

第8章酶学……………………………………………………………………（93 ）实验9影响酶活性的因素 93

实验10蔗糖酶的专一性 95

实验11丙氨酸转氨酶活性的测定 97

实验12乳酸脱氢酶同工酶的分离 100

实验13转氨基反应 102

实验14琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制 105

实验15米氏常数的测定 107

第9章糖、脂和生物氧化……………………………………………………（116 ）实验16饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 116

实验17脂蛋白的分离和提纯 118

实验18血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 120

实验19血清三酰甘油测定 122

实验20高密度脂蛋白中胆固醇含量测定 125

实验21血清总胆固醇含量测定 127

实验22乳酸测定 129

实验23血中葡萄糖含量的测定 134

实验24细胞核的分离和纯化 138

第10章核酸 138

实验25核酸含量的测定 140

实验26酵母RNA的提取及组分鉴定 145

实验27真核细胞基因组DNA的制备与定量 147

实验28质粒DNA的提取、纯化和鉴定 148

实验29 DNA的限制性酶切反应 152

实验30大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞 154

实验31 Southern印迹 158

实验32 Northern印迹 164

实验33 PCR扩增技术 169

实验34随机扩增多态性DNA技术 170

第11章综合性实验 173

实验35血清γ－球蛋白的分离及纯度鉴定 173

实验36碱性磷酸酶的提取、比活性及Km值的测定 175

实验37 Western印迹 180

实验38 RT-PCR 184

附：RQ-PCR 186

实验39细菌双杂交质粒DNA的提取纯化及鉴定 187

实验40 apoE基因多态性分析 192

附录 197

主要参考资料 214