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第1章 动物生物化学实验基本知识 1

第1节 动物生物化学实验室规则及安全防护常识 1

一、实验室规则 1

二、安全防护常识 2

第2节 动物生物化学实验基本操作技术 4

一、玻璃仪器的洗涤 4

二、吸量管的选择使用 5

三、可调式微量加样器的使用 5

四、试管中液体的混匀法 6

第3节 常规实验样品的处理 6

一、血液样品的制备 6

二、组织样品的制备 10

三、生物高分子的制备 11

第4节 实验报告的撰写要求 15

一、实验记录 15

二、定性实验报告的书写格式 15

三、定量实验报告的书写格式 16

第2章 动物生物化学常用实验技术原理 17

第1节 离心技术 17

一、离心技术的基本原理 17

二、离心机的主要类型和构造 18

三、常用的离心方法 20

四、离心操作的注意事项 21

第2节 分光光度技术 22

一、分光光度技术的原理 22

二、分光光度计的组成和构造 22

三、分光光度技术的应用 24

四、其他光谱分析技术 24

第3节 电泳技术 25

一、影响电泳的因素 25

二、电泳的分类 26

三、电泳所需的仪器 27

四、电泳分析常用的方法 28

五、电泳技术的应用领域 31

第4节 层析技术 32

一、吸附层析 32

二、分配层析 33

三、离子交换层析 34

四、凝胶层析 35

五、亲和层析 36

第3章 蛋白质实验 37

实验1蛋白质含量的测定 37

实验2蛋白质的两性反应及等电点的测定 44

实验3醋酸纤维素薄膜电泳法分离动物血清蛋白质 45

实验4聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 47

实验5蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 50

实验6血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与鉴定——聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法 52

实验7血清γ球蛋白的分离——分子筛凝胶层析法 55

实验8凝胶过滤层析法分离血红蛋白 58

实验9氨基酸纸层析 60

实验10牛乳中酪蛋白的提取和性质鉴定 62

第4章 酶学实验 64

实验11唾液淀粉酶活性的观察 64

实验12碱性磷酸酶的分离制备及活性测定 67

实验13应用纸层析法鉴定酶促转氨基作用 71

实验14精氨酸激酶的分离纯化及活力测定 74

实验15过氧化氢酶Km值的测定 76

实验16血清中谷丙转氨酶活性的测定 78

实验17糖酵解中间产物的鉴定 80

实验18琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察 82

实验19大豆制品中脲酶活性的检测 84

第5章 维生素实验 87

实验20维生素B1含量测定 87

实验21维生素B2含量测定 88

实验22维生素A含量测定 89

实验23维生素C含量测定——2，6-二氯酚靛酚法 91

实验24维生素D含量测定 93

第6章 核酸实验 96

实验25动物肝脏中DNA的提取 96

实验26全血基因组DNA的提取——离心柱型试剂盒提取法 98

实验27酵母RNA的提取、组分鉴定及含量测定 99

实验28紫外吸收法测定核酸含量 101

实验29用琼脂糖凝胶电泳法鉴定核酸 103

实验30聚合酶链式反应实验技术应用 106

第7章 糖类实验 108

实验31血糖的测定 108

实验32动物肝糖原的提取与鉴定 111

实验33还原糖含量的测定——3，5-二硝基水杨酸比色法 113

第8章 脂类实验 115

实验34粗脂肪的索氏提取 115

实验35血清总脂含量的测定 117

实验36血清游离脂肪酸含量的测定 118

实验37血清总胆固醇含量的测定——磷硫铁法 120

实验38卵磷脂的提取与鉴定 121

实验39肝组织的生酮作用 122

实验40脂肪酸的β-氧化 124

实验41脂类的提取和薄层层析分离 126

附录 128

附录1实验室常用液体的配制 128

附录2常用酸碱的一般参数 130

附录3常用凝胶的技术参数 130

附录4常用核酸和蛋白质相对分子质量标准 132

附录5常用储存液的配制 133

参考文献 137