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蛋白质工程原理与技术
  • 刘贤锡等主编 著
  • 出版社: 济南:山东大学出版社
  • ISBN:7560724655
  • 出版时间:2002
  • 标注页数:167页
  • 文件大小:10MB
  • 文件页数:177页
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图书目录

第一章 绪论 1

第一节 蛋白质工程概论 1

一、蛋白质工程的理论基础 1

二、蛋白质工程的研究内容 3

三、蛋白质工程的基本程序 4

第二节 蛋白质工程的应用 5

一、研究蛋白质结构与功能的关系 5

三、生产蛋白质和多肽类活性物质 6

二、改变蛋白质的特性 6

四、设计合成全新蛋白质 8

第三节 蛋白质工程展望 8

第二章 蛋白质的结构与功能 10

第一节 蛋白质的基本结构与功能 10

一、蛋白质的组成 10

二、蛋白质的一级结构 11

三、蛋白质一级结构与功能的关系 11

一、蛋白质的二级结构 13

二、超二级结构和结构域 13

第二节 蛋白质的空间结构与功能 13

三、蛋白质的三级结构 14

四、蛋白质的四级结构 16

五、蛋白质空间结构与功能的关系 16

六、蛋白质—蛋白质相互作用 18

第三章 基因重组技术 19

第一节 工具酶 19

一、限制性核酸内切酶 19

二、其他工具酶 21

第二节 载体 22

一、质粒 23

二、噬菌体载体 25

三、表达载体 27

第三节 基因克隆的基本程序 29

一、目的基因的制备 29

二、目的基因与载体重组 30

三、重组 DNA 导入宿主细胞 31

四、重组体的筛选与鉴定 32

二、真核基因在大肠杆菌中的表达方式 34

第四节 真核基因在大肠杆菌中的表达 34

一、真核基因在大肠杆菌中表达的基本条件 34

第四章 定点诱变与蛋白质工程 36

第一节 定点诱变 36

一、M13DNA 寡核苷酸诱变 37

二、PCR 定点诱变 39

三、盒式诱变 40

四、随机诱变 41

一、加入二硫键 42

第二节 蛋白质工程 42

二、将 Asn 和 Gln 转换成其他氨基酸 44

三、减少游离 Cys 残基的数目 44

四、增加酶的活性 45

五、改变酶的特异性 45

第五章 酶蛋白质工程 47

第一节 酶的分子结构与催化功能 47

一、酶的结构特点与功能 47

二、酶催化作用的机制 50

三、酶促反应动力学参数 52

第二节 蛋白酶工程 54

一、枯草杆菌蛋白酶的定点改造 54

二、组织型纤溶酶原激活剂的定点改造 56

第三节 葡萄糖异构酶工程 58

一、结构特点及生物学性质 58

二、定点改造葡萄糖异构酶 59

三、应用 60

第四节 酶蛋白的定向进化 60

一、酶的定向进化的原理与思路 61

二、定向进化的常用技术 62

第六章 抗体工程 65

第一节 概述 65

一、多克隆抗体 66

二、单克隆抗体 66

三、基因工程抗体 67

第二节 抗体及其基因结构与抗体多样性的分子基础 67

一、抗体基因的基本结构 67

二、可变区基因的重组及其机制 70

三、CDR3的多样性 72

四、抗体多样性的来源 73

第三节 鼠单抗的人源化 73

一、鼠单抗恒定区的人源化 74

二、鼠单抗可变区的人源化 74

第四节 小分子抗体 75

一、Fab 段 76

二、Fv 和单链抗体 76

三、胞内抗体 78

四、抗体融合蛋白 79

第五节 抗体库技术 80

一、初期的抗体库技术 80

二、噬菌体抗体库技术 81

第七章 蛋白质和多肽药物工程 83

第一节 概述 83

一、蛋白质多肽药物的表达系统 83

二、蛋白质多肽药物研究现状 85

一、胰岛素 86

第二节 激素类药物 86

二、生长激素 88

三、促红细胞生成素 89

第三节 细胞因子类药物 89

一、干扰素 90

二、白细胞介素 91

三、集落刺激因子 93

第八章 蛋白质分离纯化技术 95

第一节 蛋白质分析分离中的电泳技术 95

一、概述 95

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳 97

三、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 101

四、等电聚焦电泳 102

五、双向凝胶电泳 104

六、毛细管电泳 105

七、聚丙烯酰胺凝胶印渍转移电泳 109

第二节 色谱技术 109

二、离子交换层析 110

一、色谱技术分类 110

三、凝胶过滤层析 112

四、分配层析 115

五、亲和层析 116

第三节 高效液相色谱 117

一、高效液相色谱基本理论 118

二、高效液相色谱固定相、流动相 120

三、高效液相色谱仪构成 121

四、高效液相色谱分析方法 124

五、氨基酸、多肽和蛋白质的 HPLC 分析 125

第九章 蛋白质结构分析技术 129

第一节 蛋白质和多肽的氨基酸序列分析 129

一、N 端序列分析 129

二、C 端序列分析 133

第二节 生物质谱技术在蛋白质和多肽结构测定中的应用 135

一、质谱技术的基本原理 135

二、生物质谱仪 136

三、生物质谱在蛋白质和多肽结构测定中的应用 139

一、基本原理 142

第三节 X 射线晶体衍射技术在蛋白质晶体结构测定中的应用 142

二、X 射线衍射技术在蛋白质分析中的应用 143

第四节 核磁共振波谱技术在蛋白质结构测定中的应用 144

一、NMR 的基本原理 144

二、生物 NMR 常用的实验技术 150

三、NMR 在蛋白质研究中的应用 151

第十章 生物信息学 154

第一节 概述 154

一、基因和基因组数据库 155

第二节 生物信息数据库 155

二、蛋白质数据库 157

三、功能数据库 158

四、序列比对和预测分析 160

第三节 生物信息学在蛋白质研究中的应用 164

一、蛋白质组 164

二、蛋白质结构 164

三、新药设计 164

主要参考文献 166

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