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目录 1

第一章　生物制药技术实验仪器的洗涤与处理 1

第一部分 必备知识 1

第二部分　技术常识 1

第三部分 实践训练 3

第四部分 知识与能力测试 4

第二章　生物制药工艺用水制备技术 5

第一部分　必备知识 5

第二部分 生物制药工艺用水制备技术 6

第一节 生物制药工艺用水制备技术 6

实验2-1 纯化水的制备 8

第二节 生物制药用水制备设备简介 11

第三节 纯化水和注射用水的质量要求和检验 14

实验2-2 注射用水的制备（演示实验） 16

第三部分 实践训练 16

第四部分 知识与能力测试 16

第三章　基因工程制药技术 17

第一部分　必备知识 17

第一节 工具酶 17

第二节 载体 20

第三节 电泳 23

第四节 聚合酶链反应 26

第五节 基因工程药物生产的基本过程 28

第二部分 主要操作技术 31

第六节 质粒DNA的提取、酶切及DNA重组 31

实验3-1 质粒DNA的分离、纯化 32

实验3-2　DNA酶切及凝胶电泳 34

实验3-3 质粒DNA与目的DNA的连接 36

第七节 感受态细胞的制备及转化 37

实验3-4 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化和重组质粒的筛选 38

第八节 RNA的提取及目的基因的扩增 40

实验3-5 RNA的提取 41

实验3-6 聚合酶链反应（PCR）扩增 42

第九节 外源基因在大肠杆菌中的表达 43

实验3-7 外源基因在大肠杆菌中的表达 43

第三部分 实践训练 44

第四部分 知识与能力测试 45

第四章　植物细胞培养技术 46

第一部分 必备知识 46

第一节 植物细胞培养特性及条件 46

第二部分　操作技术 48

第二节 培养基的制备技术 48

实验4-1 配制植物组织培养基 48

实验4-2　植物的试管快速繁殖技术 49

第三节 植物组织培养技术 49

第四节 植物细胞培养方法 50

实验4-3　植物细胞的悬浮培养 51

实验4-4 植物细胞同步培养 53

实验4-5 人工种子的制备 53

实验4-6 人工种子的保存和发芽 54

第五节 植物组织培养过程的检测 55

实验4-7 植物细胞培养和次生代谢产物生产 56

第六节 植物细胞大规模培养技术的应用 58

实验4-8 三七细胞大规模培养 58

实验4-9 胡萝卜组织培养 59

第三部分 实践训练 59

第四部分 知识与能力测试 64

第五章　哺乳动物组织细胞培养技术 65

第一部分　必备知识 65

第一节 动物细胞组织培养的特征及培养条件 65

第二部分　操作技术 68

第二节 无菌操作的基本要领和要求 68

第三节 培养动物组织、细胞培养液的配制 69

第四节 动物细胞培养技术 71

实验5-1 组织块培养技术 74

实验5-2 原代细胞培养——贴壁培养 75

实验5-3　传代培养 78

第五节 细胞污染的检测与排除 79

实验5-4　微生物污染的检测 82

第六节 培养物的长期保存技术 83

实验5-5　培养细胞的冻存与复苏 84

第七节 动物细胞大规模培养方法简介 85

第三部分 实践训练 88

实验5-6 动物细胞的培养、冻存与复苏 88

第四部分 知识与能力测试 94

第六章　发酵工程制药技术 95

第一部分　必备知识 95

第一节 发酵工程简史 96

第二节 微生物菌种的处理原则 97

第二部分　操作技术 98

第三节 发酵过程中培养基的制备与灭菌技术 98

实验6-1 培养基的配制与灭菌技术 100

第四节 微生物菌种的保藏、退化、复壮与改良技术 102

实验6-2 微生物菌种保藏技术 105

实验6-3　菌种的复苏与复壮技术 109

第五节 微生物发酵过程控制技术 110

实验6-4　谷氨酸的制备 117

实验6-5 乳酸发酵与乳酸菌饮料制备 119

实验6-6 发酵法制备维生素B2（核黄素） 120

第六节 基因工程菌的发酵控制 121

第七节 发酵工程下游加工过程 124

实验6-7 固液分离技术 126

第三部分 实践训练 127

实验6-8 酒精发酵及糯米甜酒的酿制 127

实验6-9 青霉素的生产工艺 128

第四部分 知识与能力测试 129

附录 常用培养基及其配制 129

第七章　生物药物成分的提取纯化技术 131

第一部分　必备知识 131

第二部分　操作技术 132

第一节 细胞破碎技术 132

实验7-1 超声波破碎法处理微生物菌体 133

第二节 沉淀分离技术 134

实验7-2 盐析沉淀法纯化血浆中的免疫球蛋白 134

实验7-3　透析法脱盐 135

实验7-4 等电点沉淀法纯化牛乳中的酪蛋白 136

第三节 萃取分离技术 137

实验7-5 用溶剂萃取法提取与精制红霉素 138

实验7-6 牛血清白蛋白在双水相萃取系统中的分配 138

第四节 过滤与超滤技术 140

实验7-7　超滤分离实验 142

第五节 泡沫分离技术 143

实验7-8 喷雾干燥技术制备奶粉 144

第六节 干燥技术 144

第七节 色谱分离技术 146

实验7-9 离子交换色谱分离混合氨基酸 150

第三部分 实践训练 152

实验7-10　血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 153

实验7-11 植物叶片细胞膜ATPase分离纯化 154

第四部分 知识与能力测试 155

第八章酶工程制药技术 156

第一部分必备知识 156

第一节 酶工程的基本概念 156

第二节 酶的分离纯化技术 160

第二部分操作技术 160

实验8-1 蛋白质总浓度的测定 163

实验8-2　SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质相对分子质量 166

第三节 酶活力与酶制剂的保存 168

实验8-3　α-淀粉酶的活力测定 169

实验8-4　猪血SOD的提取 170

第四节 酶工程的基本手段 171

实验8-5 对氨基苯磺酰己基（ABSE）纤维素固定化胰蛋白酶 174

实验8-6 PAGE包埋法制备固定化大肠杆菌（E．coli）生成L-天冬氨酸 176

第五节 常见的酶类药物及酶工程制药的发展趋势 177

第三部分 实践训练 178

实验8-7 谷丙转氨酶活力的测定 178

实验8-8 菠萝蛋白酶的提取 179

实验8-9 卡拉胶固定大肠杆菌（E．coli）L-天冬氨酸的生产工艺 180

第四部分 知识与能力测试 182

附录8-1 几种常用的不同pH值缓冲液的配制表 182

附录8-2 离心力的转换列线图 183

第九章　血液制品制备技术 184

第一部分 必备知识 184

第二部分 血浆蛋白制剂生产技术 187

第三部分 实践训练 193

参观：1．用低温乙醇法分离和纯化血浆蛋白 193

2．冻干设备的应用 193

第四部分 知识与能力测试 194

第一部分 必备知识 195

第十章　细胞因子制备技术 195

第二部分　操作技术 201

实验10-1 制备白细胞介素-2（IL-2） 202

实验10-2 红细胞生成素（EPO）的制备 203

实验10-3　人尿集落刺激因子（CSF）的制备 204

实验10-4　基因工程α-干扰素的制备 205

第三部分 实践训练 206

实验10-5 从基因工程菌中提取IFN-β 206

实验10-6 天然干扰素IFN-α的制备 207

第四部分 知识与能力测试 208

第一部分 必备知识 209

第十一章　疫苗制备技术 209

第二部分 疫苗的制备 211

第三部分 实践训练 218

实验11-1 乙型脑炎减毒活疫苗的制备 218

实验11-2 伤寒Vi多糖疫苗的制备 221

第四部分 知识与能力测试 224

第十二章　杂交瘤细胞技术和单克隆抗体技术 225

第一部分 必备知识 225

第一节 单克隆抗体的基本概念和技术原理 225

第二部分 单克隆抗体制备技术 226

第二节 抗原提纯与动物免疫 226

实验12-2　抗体效价测定 227

实验12-1 抗原免疫 227

第三节 单克隆抗体细胞的选择 228

实验12-3 单克隆抗体细胞的制备 229

第四节 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选 230

实验12-4 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选和克隆化培养 230

第五节 单克隆抗体的制备及纯化 231

实验12-5 单克隆抗体的制备及纯化 232

第三部分 实践训练 233

第四部分 知识与能力测试 234

参考文献 235