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第1章 生物技术制药总论 1

第1节 基因工程与基因工程制药步骤 1

一、基因工程 1

二、基因工程制药的基本步骤 3

三、基因工程制药的具体步骤 3

第2节 细胞工程制药 9

一、细胞工程 9

二、细胞工程制药 9

第3节 酶工程制药 12

一、酶与酶工程 12

二、酶工程制药 12

第4节 发酵工程制药 13

一、发酵与发酵工程 13

二、发酵工程制药 13

第5节 蛋白质工程制药 14

一、蛋白质与蛋白质工程 14

二、蛋白质工程制药 14

第6节 生物医学工程与生物信息工程 16

一、生物医学工程 16

二、生物信息工程 16

思考题 17

参考文献 18

第2章 基因工程制药 19

第1节 基因克隆表达 19

一、大肠杆菌表达系统 19

二、酵母表达系统 27

三、昆虫细胞表达系统 30

第2节 各种产物表达形式采用的分离纯化方法 31

一、大肠杆菌细胞内不溶性表达产物 31

二、分泌型的表达产物 32

三、大肠杆菌细胞内可溶性表达产物 33

四、大肠杆菌细胞周质表达蛋白 33

第3节 表达产物的活性、安全性评价、稳定性考察 33

一、生物活性（效价）测定 33

二、安全性评价 34

三、稳定性 34

四、产品 34

思考题 35

参考文献 35

第3章 细胞工程制药 36

第1节 细胞、细胞工程与细胞工程制药 36

一、细胞 36

二、细胞工程 37

三、细胞工程制药 38

第2节 动物细胞工程制药 39

一、动物细胞的全能性 39

二、动物细胞工程制药中的转基因与细胞培养技术 40

第3节 植物细胞工程制药 42

一、植物细胞的特点 42

二、植物细胞工程药物研究 43

三、植物细胞融合与核移植技术 44

四、转基因植物药物技术 45

五、植物细胞培养工程 48

六、植物细胞的染色体工程 49

第4节 细胞工程制药的应用、前景和存在的问题 50

一、临床用细胞工程药物 50

二、人源化抗体的研制与“分子药田”工程 51

三、细胞工程药物的安全性 51

思考题 53

参考文献 53

第4章 酶工程制药 54

第1节 酶工程制药概述 54

一、酶及酶催化特性 54

二、影响酶催化反应的主要因素 55

三、酶的分类 56

四、酶工程和酶工程制药 57

第2节 酶工程制药技术 57

一、药用酶的生产技术 57

二、药物的酶法生产技术 63

第3节 酶工程制药的现状与前景 71

思考题 75

参考文献 75

第5章 发酵工程制药 76

第1节 发酵工程制药基础 76

一、微生物发酵生产的药物 76

二、发酵制药工业中的微生物 77

第2节 微生物制药发酵工艺 85

第3节 微生物发酵工艺过程的控制 90

思考题 96

参考文献 97

第6章 蛋白质工程制药 98

第1节 蛋白质工程制药的概念 99

一、蛋白质工程制药研究的核心内容和基本概念及方法 99

二、改造蛋白质的一些方法 99

第2节 蛋白质工程制药方法 100

一、随机诱变 101

二、体外重组 101

三、蛋白质工程制药方法的常用目的 104

第3节 蛋白质工程制药现状 105

一、蛋白质定点突变改造 106

思考题 109

参考文献 109

第7章 核酸类药物 110

第1节 反义核酸药物 110

一、反义药物的作用机制 110

二、反义药物的设计策略 111

三、反义药物的作用特点 112

四、反义核酸药物的合成与纯化 112

第2节 短小干扰RNA(siRNA) 114

一、RNAi的作用机制 115

二、RNAi的特点 117

三、siRNA的制备方法 117

第3节 miRNA 118

一、miRNA的基本特征 118

二、miRNA的作用机制 118

三、siRNA和miRNA的异同 119

第4节 核酸类药物的临床试验现状与前景 120

一、反义核酸类药物的临床试验现状与前景 120

二、RNAi的临床试验现状与前景 121

思考题 123

参考文献 123

第8章 多肽类药物 125

第1节 多肽类药物的概念和优点 125

一、多肽、多肽药物的概念 125

二、多肽药物的优点 127

第2节 多肽药物的制备 128

一、固相合成法 128

二、液相合成法 129

三、多肽合成仪法 130

四、酶解法制备多肽 130

第3节 多肽药物的稳定性、检测、制剂与给药途径 131

一、多肽药物的稳定性 131

二、多肽类药物制剂的分析方法 132

三、多肽类药物的缓释制剂研究 133

四、多肽药物的给药途径 133

第4节 多肽药物的应用 135

一、多肽疫苗 135

二、抗肿瘤多肽 135

三、抗病毒多肽 135

四、多肽导向药物 135

五、抗菌性活性肽 135

六、细胞因子模拟肽 135

七、用于心血管疾病的多肽 136

八、其他药用小肽 136

九、诊断用多肽 136

思考题 138

参考文献 138

第9章 治疗性抗体药物 139

第1节 抗体概述 139

一、抗体的基本结构 139

二、抗体的基因组成 142

三、抗原识别特异性的产生 143

四、亲和力与结合力 144

五、类别转换 145

六、药物代谢动力学 146

七、效应功能 146

第2节 治疗性小型化抗体 149

第3节 单链抗体（ScFv）、单域抗体 150

第4节 重组人鼠嵌合单克隆抗体 153

第5节 重组人源化单克隆抗体 154

一、人单克隆抗体 155

第6节 抗体药物与化疗药物的联合应用 156

思考题 158

参考文献 158

第10章 治疗性细胞株 159

第1节 治疗性细胞株——干细胞疗法 159

第2节 树突状细胞共培养的细胞因子 162

第3节 治疗性克隆 164

第4节 核移植与重编程 168

参考文献 175

第11章 细胞因子类药物 176

第1节 重组人干扰素 177

一、概述 177

二、IFN的性质、结构和功能 177

三、IFN的生物学活性和作用机制 179

四、IFN的基因工程制备 181

五、IFN的临床应用及不良反应 183

第2节 重组人白细胞介素 184

一、概述 184

二、各类IL 184

第3节 粒细胞集落刺激因子 188

一、结构与性质 189

二、G-CSF、GM-CSF的临床应用 189

三、G-CSF、GM-CSF的不良反应 190

四、基因重组人G-CSF和GM-CSF 190

第4节 促红细胞生成素 190

一、EPO基因和分子结构 191

二、EPO的产生及性质 191

三、重组人EPO的制备 192

四、临床应用 193

五、EPO的不良反应 194

第5节 组织型纤溶酶原激活剂 195

一、概述 195

二、性质、结构和功能 195

三、生物学活性及作用机制 197

四、基因工程制备t-PA 197

五、重组t-PA的临床应用 198

第6节 肿瘤坏死因子 198

一、概述 198

二、TNF的分子结构与功能 199

三、TNF的生物活性和临床应用 200

四、TNF的制备 201

思考题 201

参考文献 202

第12章 基因治疗 203

第1节 基因治疗研究现状 203

一、基因治疗的现状 203

二、目前基因治疗存在的问题 205

第2节 基因转移的方法 206

一、基因治疗的概念及步骤 206

二、基因转移方法 207

第3节 基因治疗的应用与安全性 211

一、基因治疗的应用 211

二、基因治疗的安全性 217

思考题 219

参考文献 219

第13章 动物基因工程药物 220

第1节 动物细胞培养 221

一、动物细胞培养的几个基本概念 221

二、动物细胞培养的基本条件 222

三、动物细胞形态 224

四、哺乳动物细胞冷冻保存 225

五、动物细胞的解冻复苏 225

六、动物细胞的传代培养 225

第2节 动物转基因技术 226

一、动物细胞转基因技术 226

二、转基因动物制备技术 227

第3节 动物反应器与动物基因工程药物 229

一、转基因动物细胞生物反应器 229

二、乳腺生物反应器 234

思考题 235

参考文献 235

第14章 植物基因工程药物 236

第1节 植物基因工程 236

一、植物表达载体的构建 237

二、植物转化 244

第2节 植物基因工程药物 246

一、植物基因工程重组蛋白药物 246

二、植物次生代谢工程 249

思考题 252

参考文献 252

第15章 分子靶向药物 253

第1节 概述 253

第2节 细胞信号转导通路分子靶向药物 254

一、Ras/MAPK通道抑制剂 255

二、蛋白激酶C抑制剂 255

三、环氧合酶－2选择性抑制剂 257

四、端粒酶抑制因子 259

五、法基尼转移酶抑制剂 260

第3节 原癌基因和抑癌基因的分子靶向药物 260

一、原癌基因表达的特点 260

二、原癌基因的结构改变形式及其表达激活 261

第4节 细胞因子受体分子靶向药物 262

第5节 抗肿瘤血管形成分子靶向药物 262

第6节 小型化抗体靶向药物 263

第7节 自杀基因 267

参考文献 269

第16章 融合蛋白药物 270

第1节 重组人肿瘤坏死因子受体—Fc融合蛋白 270

一、肿瘤坏死因子 270

第2节 重组抗肿瘤融合蛋白 273

一、融合蛋白与肿瘤 273

二、融合蛋白与恶性肿瘤的演进 273

三、融合蛋白在肿瘤治疗、预防研究中的应用 274

第3节 重组人血清清蛋白－干扰素 275

一、干扰素的产生及其结构特点 276

二、干扰素的治病原理 276

三、已上市的衍生干扰素产品 280

第4节 重组人成纤维细胞生长因子 281

一、αFGF及FGFR的结构和功能 281

二、生物学功能 283

三、基因工程表达αFGF现状 284

四、αFGF用于临床应注意的问题 285

第5节 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 285

一、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分子生物学特征 285

二、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的临床应用 288

三、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转基因表达研究 288

第6节 白细胞介素 290

一、种类和结构 290

二、生物学活性 291

三、IL的功能 292

思考题 296

参考文献 296

第17章 治疗性激素 297

第1节 胰岛素 297

一、胰岛素分子 297

二、胰岛素受体与信号转导 299

三、重组DNA技术制备胰岛素产品 300

四、用胰岛素合成细胞治疗糖尿病 301

第2节 人生长激素 301

一、生长激素释放因子与抑制因子 302

二、GH受体、GH的生理作用与GH的治疗作用 303

三、重组huGH与垂体性矮小 304

四、huGH的代谢作用 305

五、GH、泌乳与排卵 305

第3节 促性腺激素 306

一、重组促性腺激素 306

二、促性腺激素在兽医学中的应用 308

三、促性腺激素释放激素 308

第4节 其他批准用于临床的重组激素 309

一、重组人甲状旁腺激素 309

二、重组降钙素 310

三、重组促甲状腺素 310

思考题 311

参考文献 312

第18章 血液制品和治疗性酶 313

第1节 血液代用品 313

一、右旋糖酐 314

二、清蛋白 314

三、明胶蛋白 315

四、携氧血液替代品 316

第2节 凝血因子和血友病 318

一、凝血因子Ⅷ 318

二、凝血因子Ⅸ、Ⅶa 321

第3节 治疗用酶 323

一、抗凝血酶（AT） 323

二、溶栓剂 324

三、超氧化物歧化酶 329

四、其他治疗用酶 330

思考题 332

参考文献 332

第19章 疫苗技术和分子诊断技术 333

第1节 疫苗技术 333

一、传统疫苗制剂 333

二、基因工程疫苗技术与DNA疫苗 334

三、艾滋病疫苗 336

四、肿瘤疫苗 337

五、佐剂技术及作用模式 339

第2节 分子诊断技术 342

一、分子诊断的概念及原理 343

二、分子诊断的常用技术方法 343

第3节 分子诊断的临床应用 350

一、分子诊断与遗传疾病 350

二、分子诊断与传染性疾病 352

三、分子诊断与肿瘤 354

四、分子诊断与个性化治疗 355

思考题 355

参考文献 355