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第一章　绪论 1

第一节 生物化学检验的研究目的和任务 1

一、生物化学检验的研究目的 1

二、生物化学检验的任务 1

第二节 生物化学检验的发展简史 2

一、生物化学检验的初期阶段 2

二、以酶学技术和自动化技术为代表的发展阶段 2

三、分子生物学技术发展阶段 2

第二章　生物化学检验实验室基本知识 4

第一节 实验用纯水 4

一、实验室用水等级 4

二、纯水的制备方法 5

三、水的纯度检查 5

第二节 常用临床实验室器材 6

一、微量加样器的使用 6

二、常用玻璃器材的使用与清洗 6

第三节 生物化学检验试剂概述 8

一、化学试剂的种类与保存 8

二、化学试剂的配制 8

实验2-1　磷酸盐缓冲液的配制 9

三、试剂盒的选择与评价 9

第四节　参考范围和医学决定水平 11

一、参考范围 11

二、医学决定水平 12

第五节 实验方法与参考物质概述 13

一、实验方法的概念与分级 13

二、参考物质的分级 16

第六节 实验方法的选择与评价 17

一、实验误差 17

二、方法学评价指标 19

三、实验方法选择与评价的原则、内容和步骤 24

四、方法学评价试验 25

实验2-2　批内重复性试验 25

实验2-3　回收试验 27

实验2-4　干扰试验 28

实验2-5　线性范围试验 30

实验2-6　方法比较试验 31

五、方法性能判断 32

第七节 实验的临床诊断性能评价 34

一、临床诊断试验的评价标准与指标 34

二、受试者工作曲线 36

第三章　光谱分析技术 37

第一节　吸收光谱分析 37

一、光吸收曲线 37

二、光吸收定律 38

三、比色分析仪器 38

四、比色分析方法 39

五、原子吸收分光光度法 41

实验3-1　722型分光光度计的使用 41

实验3-2　分光光度计性能检测 42

第二节　散射光谱分析 42

一、透射比浊法 43

二、散射比浊法与散射比浊仪 43

三、影响比浊法测定的因素 43

四、比浊法的应用 44

第三节　发射光谱分析 45

一、火焰光度法 45

二、荧光光度法 46

第四章 电泳技术 49

第一节 电泳的基本原理和操作要点 49

一、电泳的基本原理 49

二、电泳技术的操作要点 51

第二节 常用电泳技术 52

一、醋酸纤维素薄膜电泳 52

二、琼脂糖凝胶电泳 52

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳 53

四、实验方法 54

实验4-1　醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质 54

实验4-2　琼脂糖凝胶电泳测定血清脂蛋白 56

第三节　特殊电泳技术介绍 57

一、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 57

二、等电聚焦电泳 57

三、双向电泳 58

四、印迹法 58

五、显微电泳 58

六、自由界面电泳 59

第五章　酶学分析技术 60

第一节 酶活性测定的基本知识 60

一、酶活性 60

二、酶活性单位与酶活性浓度 60

三、酶促反应进程 61

四、酶促反应动力学 62

第二节　酶活性单位的计算与校准 64

一、酶活性单位的计算 64

二、酶活性单位的校准 68

第三节 酶活性的测定 71

一、按照反应时间分类的酶活性测定方法 71

实验5-1　定时法测定血清淀粉酶 71

实验5-2　速率法测定血清乳酸脱氢酶 73

二、按照检测对象分类的酶活性测定方法 74

三、工具酶的应用 77

四、酶活性测定的影响因素 78

第四节　代谢物的酶法测定 83

一、终点法 83

二、速率法 84

第五节 同工酶测定 84

一、同工酶的产生机制 85

二、同工酶的测定方法 85

第六章 自动生化分析技术 88

第一节 自动生化分析仪的类型 88

一、管道式分析仪 88

二、离心式分析仪 89

三、分立式分析仪 89

四、干片式分析仪 92

五、半自动生化分析仪 93

六、自动模块化系统 93

七、全实验室自动化分析系统 93

第二节 自动生化分析方法 94

一、分析方法的种类 94

二、自动生化分析仪的校准方法 95

第三节 自动生化分析仪的参数设置 96

一、波长 96

二、反应温度 97

三、分析方法 97

四、样本量和试剂量 97

五、分析时间 97

六、线性范围 98

七、自动生化分析仪测定参数举例 98

第四节 自动生化分析仪的性能评价 99

一、自动化程度 99

二、分析效率 99

三、应用范围 100

四、分析准确度 100

第五节 自动生化分析仪的质量保证 101

一、正确的安装与合适的工作环境 101

二、电源供给 101

三、纯水处理系统 101

四、仪器的操作 101

五、维护与保养 101

六、室内质量控制 102

第七章　分子生物学技术简介 103

第一节　分子生物学检验技术 103

一、分子生物学技术的研究进展 103

二、人类基因组概念 104

三、分子生物学检验技术 104

第二节　核酸的分离制备 104

一、DNA的分离与纯化 104

二、RNA的分离与纯化 105

第三节 限制性核酸内切酶切分析 106

一、限制性核酸内切酶分析的基本原理 106

二、DNA的限制性核酸内切酶酶切分析 106

第四节 聚合酶链反应 107

一、聚合酶链反应的原理 107

二、聚合酶链反应的一般操作 108

三、聚合酶链反应的实验室要求 108

四、聚合酶链反应的临床应用 109

第五节 分子杂交与生物芯片 109

一、分子杂交 110

二、生物芯片 112

第八章　其他常用分析技术 115

第一节 电化学分析 115

一、概述 115

二、离子选择电极分析法 115

第二节　层析技术 117

一、层析技术的基本原理 117

二、层析技术的分类 118

实验8-1　胶体金免疫层析法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ 119

第三节 离心技术 120

一、离心技术的原理 120

二、离心技术的方法 121

第九章　血浆蛋白质检验 124

第一节　概述 124

一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 124

二、常见血浆蛋白质特性概述 125

三、疾病时的血浆蛋白质 129

第二节　血浆蛋白质测定 130

一、总蛋白测定 130

实验9-1　双缩脲法测定血清（浆）总蛋白 131

二、清蛋白测定 133

实验9-2　溴甲酚绿法测定血清清蛋白 133

实验9-3　溴甲酚紫法测定血清清蛋白 135

三、黏蛋白测定 136

实验9-4　酚试剂法测定血清黏蛋白 136

四、C反应蛋白测定 138

实验9-5　胶乳凝集法测定C反应蛋白 138

实验9-6　免疫透射比浊法测定C反应蛋白 139

第十章　血糖及糖复合物检验 141

第一节　概述 141

一、血糖的来源和去路 141

二、血糖浓度的调节 141

三、糖代谢紊乱 142

第二节　血糖测定 143

一、血糖测定方法简介 144

二、血糖测定的临床意义 144

三、实验方法 145

实验10-1　葡糖氧化酶法测定血糖 145

实验10-2　己糖激酶法测定血糖 146

第三节　糖耐量试验 147

一、糖耐量和葡萄糖耐量试验 147

二、口服葡萄糖耐量试验 147

三、妊娠糖尿病 148

四、糖尿病诊断程序 148

第四节 血清糖化血红蛋白和糖化血清蛋白测定 149

一、糖化血红蛋白测定 149

实验10-3　微柱法分离与比色法测定糖化血红蛋白 150

实验10-4　免疫凝集法测定糖化血红蛋白 151

二、糖化血清蛋白测定 152

实验10-5　果糖胺法测定糖化血清蛋白 152

第十一章　血脂及血浆脂蛋白检验 154

第一节　概述 154

一、血脂和血浆脂蛋白 154

二、脂蛋白代谢 157

三、脂蛋白代谢紊乱 158

四、临床血脂分析项目 160

第二节 血脂、血浆脂蛋白及载脂蛋白测定 161

一、血浆静置试验 161

二、总胆固醇的测定 161

实验11-1　胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 162

三、三酰甘油的测定 163

实验11-2　磷酸甘油氧化酶法测定血清三酰甘油 164

四、高密度脂蛋白-胆固醇的测定 165

实验11-3　磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白-胆固醇 166

五、低密度脂蛋白-胆固醇的测定 167

实验11-4　表面活性剂清除法测定血清低密度脂蛋白-胆固醇 168

六、载脂蛋白的测定 170

实验11-5　免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白B100 170

第十二章　钠、钾、氯和酸碱平衡检验 173

第一节　概述 173

一、钠、钾、氯的生理作用 173

二、钠、氯代谢及其平衡紊乱 174

三、钾代谢及其平衡紊乱 175

第二节　血清钠、钾、氯测定 175

一、血清钠、钾测定 175

实验12-1　离子选择电极法测定血清钠、钾 177

二、血清氯化物的测定 178

实验12-2　硫氰酸汞比色法测定血清氯化物 179

实验12-3　硝酸汞滴定法测定血清氯化物 181

第三节　酸碱平衡 182

一、气体在血液中的运输 182

二、酸碱平衡与酸碱平衡失调 184

三、血气分析的测定原理 184

四、血气分析的方法 186

五、血气分析的常用指标及应用 188

六、实验方法 190

实验12-4　酶法测定二氧化碳 190

第十三章　钙、磷、镁和微量元素检验 192

第一节　钙、磷代谢及其平衡紊乱 192

一、钙的代谢 192

二、磷的代谢 193

三、钙、磷代谢的调节 193

四、钙和磷代谢紊乱 194

第二节　镁代谢及其平衡紊乱 194

一、镁的代谢 195

二、镁代谢紊乱 195

第三节　微量元素与疾病 195

一、必需微量元素的共同特征 196

二、必需微量元素的含量、分布及生理功用 196

三、必需微量元素与疾病的关系 197

第四节　钙、磷、镁和微量元素铁、铜、锌的测定 198

一、血清钙测定 198

实验13-1　邻甲酚酞络合酮比色法测定血清总钙 198

实验13-2　甲基麝香草酚蓝比色法测定血清总钙 199

二、血清无机磷测定 200

实验13-3　磷钼酸法测定血清无机磷 201

三、血清镁测定 202

四、微量元素铁测定 202

实验13-4　亚铁嗪比色法测定总铁结合力和血清铁 203

五、微量元素铜测定 204

六、微量元素锌测定 205

第十四章　肝脏功能检验 207

第一节　概述 207

一、肝脏的结构特点 207

二、肝脏的生物化学功能 208

三、某些肝脏疾病的临床生物化学 210

四、肝功能试验的分类 212

第二节　血清氨基转移酶测定 212

一、氨基转移酶测定方法简介 212

二、氨基转移酶测定的意义 213

三、实验方法 213

实验14-1　赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 213

实验14-2　速率法测定血清丙氨酸氨基转移酶 216

第三节 血清碱性磷酸酶测定 217

一、碱性磷酸酶测定方法简介 217

二、碱性磷酸酶测定的意义 218

三、实验方法 218

实验14-3　速率法测定血清碱性磷酸酶 218

实验14-4　金氏法测定血清碱性磷酸酶 219

第四节　血清γ-谷氨酰基转移酶测定 221

一、γ-谷氨酰基转移酶测定方法简介 221

二、γ-谷氨酰基转移酶测定的意义 221

三、实验方法 221

实验14-5　速率法测定血清γ-谷氨酰基转移酶 221

实验14-6　重氮比色法测定血清γ-谷氨酰基转移酶 222

第五节　血清胆红素测定 224

一、胆红素测定方法简介 224

二、胆红素测定的意义 226

三、实验方法 226

实验14-7　改良J-G法测定血清胆红素 226

实验14-8　胆红素氧化酶法测定血清胆红素 228

第六节　血清胆汁酸测定 229

一、胆汁酸测定方法简介 229

二、胆汁酸测定的意义 230

三、实验方法 231

实验14-9　酶比色法测定血清总胆汁酸 231

第七节　肝功能试验的意义和选择 233

一、肝功能试验的意义和评价 233

二、肝功能试验的选择原则 233

第十五章　肾脏功能检验 235

第一节　概述 235

一、肾脏的结构与功能 235

二、肾脏疾病的生物化学变化 237

三、肾脏功能试验的评价与选择原则 238

第二节　血清尿素测定 242

一、尿素测定方法简介 242

二、尿素测定的临床意义 243

三、实验方法 243

实验15-1　二乙酰一肟法测定血清尿素 243

实验15-2　酶偶联速率法测定血清尿素 244

第三节　血清肌酐测定 245

一、肌酐测定方法简介 245

二、肌酐测定的临床意义 246

三、实验方法 247

实验15-3　碱性苦味酸法测定血清肌酐 247

实验15-4　肌酐酰氨基水解酶法测定血清肌酐 248

四、内生肌酐清除率测定 249

第四节　血清尿酸的测定 251

一、尿酸测定方法简介 251

二、尿酸测定的临床意义 251

三、实验方法 251

实验15-5　磷钨酸还原法测定血清尿酸 251

实验15-6　尿酸酶偶联比色法测定血清尿酸 253

第十六章　心肌损伤标志物检验 255

第一节　概述 255

一、心脏的结构与功能 255

二、急性心肌梗死的诊断标准 257

三、心肌损伤标志物的选择与评价 258

第二节　肌酸激酶的测定 266

一、肌酸激酶测定方法简介 266

二、肌酸激酶测定的临床意义 266

三、实验方法 267

实验16-1　酶偶联法测定血清肌酸激酶 267

第三节　肌钙蛋白的测定 268

一、肌钙蛋白测定方法简介 268

二、肌钙蛋白测定的临床意义 269

三、实验方法 269

实验16-2　免疫比浊法测定血清肌钙蛋白Ⅰ 269

第十七章 内分泌功能检验 272

第一节　概述 272

一、激素的概念与分类 272

二、激素的作用机制与调节 273

三、内分泌疾病的诊断 273

四、激素的测定方法简介 273

第二节 甲状腺功能测定 274

一、甲状腺激素的代谢与分泌调节 274

二、甲状腺激素的生理功能 275

三、甲状腺功能紊乱 275

四、甲状腺激素的测定 276

实验17-1　化学发光法测定总3,5,3′-三碘甲腺原氨酸（TT3） 277

五、其他指标 278

第三节 肾上腺功能测定 279

一、肾上腺皮质功能的测定 279

二、肾上腺髓质功能的测定 281

第四节 下丘脑-垂体激素的测定 283

一、垂体分泌的激素 283

二、下丘脑分泌的激素 284

三、下丘脑-腺垂体激素分泌的调节 285

主要参考文献 286

汉英索引 288