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第一篇 医学免疫学实验 1

绪论 1

一、医学免疫学与病原生物学实验目的与要求 1

二、医学免疫学与病原生物学实验室规则 1

三、普通光学显微镜的使用与保护 2

第一章 体液免疫相关的基本实验 9

第一节 抗原抗体反应的基本原理 9

一、抗原抗体反应的基本原理 9

二、抗原抗体反应的特点 9

三、抗原抗体反应的影响因素 10

四、抗原抗体反应的类型 10

第二节 凝集反应 10

一、直接凝集反应 11

二、间接凝集反应 13

第三节 沉淀反应 15

一、环状沉淀试验 16

二、单向琼脂扩散试验 16

三、双向琼脂扩散试验 18

四、火箭电泳 19

五、对流免疫电泳 21

六、免疫电泳 21

第四节 补体参与的反应 23

一、溶血试验 23

二、补体结合试验 24

三、CH50法测定血清总补体活性 25

第二章 免疫细胞功能测定 27

第一节 固有免疫细胞功能的检测 27

一、中性粒细胞吞噬功能测定 27

二、中性粒细胞硝基四氮唑蓝还原能力的测定 28

三、巨噬细胞吞噬功能的测定 29

附：小鼠腹腔注射法 30

第二节 获得性免疫细胞功能的检测 31

一、淋巴细胞转化试验 31

二、E花环试验 33

第三章 免疫标记技术 35

第一节 免疫荧光技术 35

一、直接免疫荧光法测抗原 36

二、间接免疫荧光法测抗原 37

第二节 免疫酶技术 39

甲胎蛋白检测（ELISA双抗体夹心法） 40

第三节 放射免疫技术 43

放射免疫法测定 43

第四章 淋巴细胞的分离 46

第一节 人外周血单个核细胞的分离 46

第二节 T淋巴细胞、B淋巴细胞的分离纯化 48

一、免疫磁珠法分离淋巴细胞 48

二、花环沉降法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞 49

三、尼龙棉柱法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞 50

第三节 淋巴细胞片的制备 52

附一：细胞计数方法 52

附二：细胞活性检测 54

附三：细胞冻存 54

第五章 细胞免疫功能检测 57

第一节 细胞毒性T细胞杀伤功能测定 57

第二节 细胞因子检测技术 58

第六章 超敏反应检测 61

第一节 动物过敏反应试验 61

第二节Ⅰ型超敏反应检测 63

一、Ⅰ型超敏反应皮肤试验 63

二、血清总IgE检测 64

三、血清特异性IgE检测 65

第三节 迟发型超敏反应皮肤试验 66

第二篇 医学微生物学实验 71

第七章 病原生物学实验室常用仪器和设备 71

一、高压蒸汽灭菌器 71

二、恒温培养箱 72

三、超净工作台 73

四、生物安全柜 74

五、超低温冰箱 75

六、无菌室 76

七、接种环和接种针 77

第八章 细菌学基本实验方法与技能 78

第一节 细菌的基本形态和特殊结构的观察 78

第二节 细菌动力的观察 80

一、悬滴检查法 80

二、压滴检查法 81

三、暗视野显微镜检查法（示教） 82

四、半固体琼脂检查法 83

第三节 细菌的染色法 83

一、单染色法 84

二、革兰氏染色法 85

三、特殊染色法 86

四、荧光染色法 89

附录：染色液的配制 89

第四节 常用培养基的制备与细菌的人工培养 92

一、细菌常用培养基的配制 92

二、细菌培养方法 95

第五节 细菌生化鉴定法 98

一、单糖发酵试验 99

二、硫化氢试验 100

三、尿素分解试验 100

四、触酶试验 101

五、氧化酶试验 101

六、IMViC试验 102

附录 104

第六节 正常人体和环境中细菌的检查 106

一、皮肤细菌的检查 106

二、咽喉部细菌的检查 107

三、水中细菌的检查 107

四、空气中细菌的检查 108

第七节 外界因素对细菌的影响 109

一、高压蒸气灭菌法 109

二、干烤箱 110

三、间歇灭菌 111

四、煮沸消毒法 111

五、紫外线杀菌 112

六、滤过除菌 112

七、常用消毒剂的抑菌作用 113

八、手指消毒前后的细菌学检查 113

九、细菌对抗生素的敏感性试验（纸片琼脂扩散法） 114

十、细菌对中草药敏感试验 115

附录 116

第八节 细菌的遗传与变异 117

一、细菌的变异现象观察 117

二、接合传递试验 119

三、转化试验 120

四、细菌质粒DNA的提取 122

五、琼脂糖凝胶电泳 123

第九节 细菌的血清学诊断 124

第十节 临床标本的采集与处理方法 125

一、标本的采集和处理原则 126

二、常见待检标本的采集方法 126

第九章 几种细菌性疾病的实验室诊断 129

第一节 化脓性球菌的分离鉴定 129

一、形态、染色性及培养特性观察 129

二、葡萄球菌血浆凝固酶试验 130

三、肺炎链球菌乙基氢化羟基奎宁（optochin）敏感试验 131

四、肺炎链球菌胆汁溶菌试验 132

五、脓汁标本中病原菌（葡萄球菌）的分离鉴定 133

六、咽拭子、血液标本中病原菌（乙型溶血性链球菌）的分离鉴定 134

七、脑脊液标本中病原菌（脑膜炎奈瑟菌）的分离鉴定 136

八、泌尿生殖道脓性分泌物中淋病奈瑟菌的检查 137

附录 138

第二节 致病性肠道杆菌的实验室诊断 139

一、主要肠道杆菌形态及染色性观察 139

二、主要肠道杆菌的培养特性观察 140

三、粪便标本中肠道病原菌的分离鉴定 140

四、肥达反应 144

附录 145

第三节 分枝杆菌的检测 146

一、结核分枝杆菌的检测 147

二、麻风分枝杆菌的检测 151

附录 152

第四节 厌氧菌的检测 153

一、厌氧芽胞梭菌 153

二、无芽胞厌氧菌 155

附录 155

第五节 动物源性细菌的检测 156

一、布鲁菌属 157

二、鼠疫耶尔森菌 157

三、炭疽芽胞杆菌 158

附录 159

第六节 白喉棒状杆菌的检测 159

一、白喉棒状杆菌的染色 160

二、白喉棒状杆菌的分离培养 160

附录：染色液的配制 161

第七节 弧菌和螺杆菌的检测 161

一、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的形态观察 162

二、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的培养现象观察 162

三、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的生化反应鉴定 163

四、霍乱弧菌感染的快速诊断 164

五、幽门螺杆菌的分离鉴定 165

附录 167

第八节 其他微生物感染的检测 168

一、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体的检测 169

二、放线菌的检测 173

三、真菌的检测 173

附录 176

第十章 病毒学实验 177

第一节 病毒的培养法 177

一、动物接种法 177

二、鸡胚接种法 178

三、组织培养法 181

附录 182

第二节 病毒的定量法 183

一、50％组织细胞感染量 183

二、空斑形成试验 184

第三节 病毒性感染的快速诊断 185

一、显微镜检测病毒颗粒 185

二、检测病毒抗原 186

三、检测病毒核酸 187

四、检测病毒特异IgM抗体 190

第四节 流感病毒的血凝与血凝抑制试验 190

一、血凝试验 190

二、血凝抑制试验 192

附录 193

第五节 乙型肝炎病毒抗原抗体的检测（ELISA） 193

一、ELISA双抗体夹心法检测HBsAg（一步法） 194

二、ELISA双抗原夹心法检测抗-HBs 195

三、ELISA竞争法检测抗-HBe 196

四、ELISA捕获法检测抗-HBc IgM 197

第六节 人类免疫缺陷病毒感染的实验室诊断 198

一、初筛试验-酶联免疫法（ELISA）检测HIV特异抗体 199

二、确证试验-免疫印迹法检测HIV特异性抗体 200

第三篇 医学寄生虫学 205

第十一章 医学蠕虫 205

第一节 似蚓蛔线虫（蛔虫） 205

第二节 蠕形住肠线虫（蛲虫）、美洲板口线虫及十二指肠钩口线虫 208

第三节 旋毛形线虫、班氏丝虫与马来丝虫 210

第四节 卫氏并殖吸虫（肺吸虫）和日本裂体吸虫（日本血吸虫） 212

第五节 链状带绦虫（猪带绦虫）和肥胖带绦虫（牛带绦虫） 217

第六节 细粒棘球绦虫（包生绦虫）和微小膜壳绦虫（短膜壳绦虫） 220

第十二章 医学原虫 224

第一节 蓝氏贾第鞭毛虫和阴道毛滴虫 224

第二节 疟原虫、溶组织内阿米巴 225

第十三章 医学节肢动物 231

第一节 蜱、蚊、蝇、蚤 231

第二节 蠕形螨自检 233

参考文献 234

彩图 235