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第一篇 医学细胞生物学实验技术 1

第一章 显微镜技术 1

实验一 光学显微镜技术 1

一、普通光学显微镜的结构和使用 4

二、特殊光学显微镜的结构与使用 8

实验二 显微摄影技术 16

一、照相显微镜各部件的选择及应用 16

二、感光片（胶卷）的选择 17

三、滤光片的选择 18

四、感光片的暗室加工 19

实验三 电子显微镜技术 20

一、透射电镜的结构和使用 23

二、扫描电镜的结构和使用 23

三、电镜样品制备技术和方法 24

四、电镜样品的观察、识别和分析 25

第二章 细胞的形态结构与细胞器 27

实验四 细胞的形态结构与细胞器 27

一、细胞结构的观察 28

二、细胞器的超活染色与观察 30

三、细胞的超微结构 35

四、细胞的显微测量 37

实验五 死活细胞的鉴别与分离 39

一、染色排除法鉴别死活细胞 39

二、荧光排除法鉴别死活细胞 40

三、死活细胞分离 40

实验六 细胞组分（细胞器）的分级分离 41

一、细胞核的分离提取 41

二、高速离心分离提取线粒体 42

第三章 细胞生理与细胞化学 44

实验七 细胞的生理活动 44

一、细胞的吞噬活动 44

二、草履虫纤毛运动及食物泡的形成 45

三、暗视野观察细胞的纤毛和鞭毛运动 45

四、细胞膜的渗透性实验 46

五、细胞的凝集反应 47

实验八 细胞化学 48

一、普通细胞化学 49

二、酶细胞化学 50

三、荧光细胞化学 51

四、免疫细胞化学 52

第四章 综合性实验 53

实验九 骨髓细胞染色体标本的制备及观察 53

一、小鼠骨髓染色体标本的制备与观察 53

二、人骨髓细胞染色体标本的制备技术 55

实验十 细胞增殖与细胞凋亡 56

一、有丝分裂标本制备与观察 57

二、减数分裂标本制备与观察 59

三、细胞凋亡的检测 64

第五章 细胞培养与细胞工程技术 66

第一节 培养细胞的生存条件 66

第二节 细胞培养的基本技术 70

第三节 体外培养细胞的取材方法与原代细胞培养 71

第四节 培养细胞的生长特性与形态分型 73

第五节 培养细胞的计数、生长曲线与分裂指数测定 75

第六节 培养细胞的冻存、复苏与运输 75

第七节 细胞系或细胞株的建立 76

实验十一 动物细胞培养及相关实验技术 77

一、实验室无菌操作技术 78

二、细胞的原代培养技术 78

三、细胞的传代培养技术 80

四、体外培养细胞的计数和活力测定技术 81

五、体外培养细胞的冻存与复苏技术 82

实验十二 细胞融合与细胞核移植技术 83

一、细胞融合技术 85

二、细胞核移植技术 85

第二篇 医学遗传学实验技术 88

第六章 细胞遗传学实验技术 88

实验十三 人类性染色质标本制备技术 89

一、X染色质标本制备与观察 89

二、Y染色质标本制备与观察 90

实验十四 人类染色体标本制备技术 91

一、外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备技术 92

二、其他组织细胞的染色体标本制备 95

实验十五 人类染色体显带与染色体高分辨显带技术 99

一、人类染色体G显带标本制备 100

二、人类染色体高分辨显带技术 101

三、人类染色体C显带标本制备 103

四、人类染色体Q显带标本制备 104

五、人类染色体R显带标本制备 105

六、人类染色体T显带标本制备 106

七、人类染色体NOR带标本制备 107

实验十六 核型分析与人类异常核型观察分析 109

一、人类正常非显带染色体核型分析 109

二、人类染色体G显带核型分析 112

三、人类异常核型的观察和分析 115

实验十七 离体细胞染色体畸变检测方法及技术 118

一、受试物对细胞增殖的半数抑制剂量测定 118

二、试验设计 119

三、染色体畸变标本制备及观察 119

实验十八 人类脆性X染色体标本制备 120

一、外周血淋巴细胞脆性X染色体标本制备 122

二、绒毛细胞脆性X染色体标本制备 122

三、羊水细胞脆性X染色体标本制备 122

四、脆性X染色体标本观察 123

实验十九 人类SCE和微核检测技术 123

一、SCE标本制备与观察 125

二、微核检测技术 126

实验二十 荧光原位杂交技术 129

第七章 生化遗传学实验技术 133

实验二十一 先天性代谢病筛查的细菌抑制实验 133

实验二十二 先天性代谢病的尿筛查实验 135

一、氨基酸代谢病的尿筛查方法 136

二、糖代谢病的尿筛查实验 141

实验二十三 酶活性测定技术 143

第八章 分子遗传学实验技术 146

实验二十四 基因组DNA的提取、纯化、酶解和电泳分离 146

一、DNA的提取 149

二、DNA的纯化 151

三、人类基因组DNA的限制性核酸内切酶水解 152

四、DNA酶切片断的凝胶电泳分离 152

实验二十五 聚合酶链反应扩增DNA片段及检测 156

一、PCR扩增DNA片断及检测 157

二、其他几种PCR相关技术介绍 158

实验二十六 PCR-SSCP法检测分析技术 160

实验二十七 致病基因的RFLP连锁分析 163

实验二十八 分子杂交技术 165

一、斑点杂交 166

二、等位基因特异性寡核苷酸杂交法 167

三、Southern印迹杂交 167

四、Northern印迹杂交 171

五、Western印迹杂交 172

实验二十九 STR位点复合扩增技术 173

一、DNA提取 174

二、PCR扩增 175

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳 175

四、银染检测 176

第三篇 设计性与探索性实验 177

第九章 实验设计的原理与方法 177

第一节 实验设计的概念、特点和分类 177

第二节 实验设计的基本要素 178

第三节 实验设计的基本原则 179

第四节 常用的实验设计思路 181

第五节 实验设计的基本内容与方法 181

第十章 细胞生物学与遗传学实验设计与选题 183

第一节 设计性实验及其在人才培养中的作用 183

第二节 设计性实验的操作过程 185

第三节 实验设计的实例分析 187

第四节 可供实验设计选题目录 189

附录 194

附录Ⅰ实验器械的清洗和处理 194

附录Ⅱ实验室常用灭菌和除菌方法 196

附录Ⅲ细胞生物学与遗传学实验常用试剂的配制 198

附录Ⅳ常用培养基和抗生素的配制 208

附录Ⅴ离心机转速与离心力的列线图（换算） 209

附录Ⅵ流式细胞仪分析技术 210

附录Ⅶ生物样品的储存、邮送与实验室安全 214

附录Ⅷ常用生物学数据 216

附录ⅨⅩ实验常用软件和数据库介绍 218

附录Ⅹ有关细胞生物学和医学遗传学的主要网站 227

附录ⅩⅠ人类某些遗传性状（疾病）的调查分析 228

附录ⅩⅡ系谱分析 232

附录ⅩⅢ皮纹分析 236

附录ⅩⅣ遗传病的发病风险估计、Bayes法的应用及常见遗传病的遗传咨询 242

附录ⅩⅤ缩略语表 250

实验报告书写要求 252

参考文献与网站 255