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第一篇 病理科的设置 2

第一章 医院病理科的实验室设置 2

第一节 病理实验室空间设置及功能 2

一、标本接收室 3

二、取材室 3

三、标本储存室 3

四、冷冻切片室 3

五、细胞学制片室 3

六、尸体解剖室 4

七、大体标本制作室 4

八、HE制片室 4

九、特染和组化室 5

十、免疫组化室 5

十一、试剂配制室 5

十二、病理诊断室 5

十三、档案室 5

十四、显微摄影室 6

十五、大体标本陈列室 6

十六、图书资料室 6

十七、会议室 6

十八、仓库 6

十九、其他 6

第二节 病理科工作流程 6

一、标本接收 7

二、活检标本大体检查和取材 7

三、组织制片 8

四、细胞学制片 9

五、病理诊断 9

六、档案管理 10

第三节 实验室主要仪器设备配置 10

一、取材台 10

二、取材刀具 11

三、塑料脱水包埋盒打号机 11

四、组织脱水机 12

五、组织石蜡包埋机 13

六、石蜡切片机 14

七、低温恒冷切片机 15

八、超薄切片机 16

九、自动磨刀机 16

十、摊片机 16

十一、烤片机 16

十二、电热烤箱 17

十三、自动HE染色机 17

十四、全自动染色-封片工作站 17

十五、自动免疫组化染色机 18

十六、离心机 18

十七、自动细胞离心涂片机 19

十八、自动封片机 19

十九、电子天平 20

二十、pH计 20

二十一、光学显微镜 20

二十二、计算机和打印机 21

第二章 显微镜的基本知识 22

第一节 光学显微镜 22

一、光学显微镜的组成 22

二、常用光学显微镜 27

三、显微镜调试 32

四、显微镜的维护保养 32

第二节 电子显微镜 32

一、透射式电子显微镜 33

二、扫描式电子显微镜 33

第三章 显微摄影技术 34

第一节 感光胶片显微摄影 34

一、显微镜 34

二、照相目镜 35

三、自动摄影装置 35

四、自动摄影控制器 35

五、照相机 35

第二节 数码显微摄影 36

一、显微镜 36

二、数码照相机 36

三、显微数码成像系统 36

第三节 显微摄影操作注意事项 36

一、照相显微镜的正确放置 36

二、显微镜主要部件正确选择和恰当配合使用 37

三、人眼屈光度校正和图像调焦 37

四、正确使用滤光片 37

五、如何利用目镜获取图像 38

第二篇 病理活体组织常规制片技术 40

第一章 组织蜡块的制备 40

第一节 组织固定 40

一、组织固定的目的 40

二、组织固定机制 41

三、固定注意事项 41

四、固定液分类 41

五、组织固定良好的判断 43

六、固定后水洗 44

第二节 骨质脱钙 44

一、骨质脱钙方法 44

二、脱钙液 45

三、脱钙终点测定 45

四、脱钙后组织处理 45

第三节 组织脱水 45

一、组织脱水目的 46

二、脱水剂的选择和要求 46

三、组织脱水机制 46

四、常用脱水剂的种类和特性 46

五、组织脱水注意事项 47

第四节 组织透明 47

一、组织透明目的 48

二、透明剂的选择和要求 48

三、组织透明机制 48

四、常用透明剂的种类和特性 48

五、组织透明注意事项 49

第五节 组织浸蜡和石蜡包埋 49

一、组织浸蜡和石蜡包埋目的及机制 49

二、常用组织包埋剂的种类和特性 50

三、石蜡包埋方法 51

四、包埋注意事项 51

五、蜡块修整 52

第六节 组织脱水的常用程序 52

一、常规送检标本通用脱水程序（自动脱水机操作） 52

二、小标本脱水程序（自动脱水机或手工操作） 53

三、教学或尸解标本（手工或自动脱水机操作） 53

第二章 组织切片及苏木精-伊红（HE）染色 55

第一节 切片机与切片刀 55

一、石蜡切片机 55

二、低温恒冷切片机 56

三、切片刀 57

第二节 石蜡包埋组织切片 58

一、石蜡切片操作 58

二、石蜡切片注意事项 59

第三节 摊片、贴片和烤片 60

一、摊片 60

二、贴片 61

三、烤片 62

第四节 冷冻切片 62

一、冷冻切片操作 62

二、冷冻切片注意事项 63

第五节 染料与染色 64

一、染料的性质 65

二、染料的分类 65

三、染色机制 67

四、进行性染色和退行性染色 68

第六节 苏木精-伊红染色 68

一、苏木精-伊红染色的染料种类和配制方法 68

二、石蜡切片HE染色 77

三、冷冻切片HE染色 78

四、封固剂与封片 79

第七节HE制片质量控制 80

一、优质HE切片的质控要求 80

二、影响HE切片质量的主要因素 81

三、常见HE切片染色缺陷的成因和对策 82

四、HE切片的质控评价指标 85

第三篇 特殊染色和组织化学染色技术 90

第一章 结缔组织和肌纤维 90

第一节 胶原纤维 90

一、苦味酸丽春红S法（V.G.法） 90

二、丽春红酸性品红-苯胺蓝法（Masson三色法） 92

三、苦味酸-天狼星红法 95

第二节 网状纤维 97

一、氢氧化银氨法（Ⅰ） 97

二、氢氧化银氨法（Ⅱ） 99

第三节 弹性纤维 102

一、醛品红法 103

二、间苯二酚碱性品红法 105

三、维多利亚蓝法 106

第四节 肌纤维 107

一、磷钨酸苏木精法 108

二、鞣酸-偶氮荧光桃红法 110

第二章 病原微生物 112

第一节 细菌 112

一、苯胺结晶紫法 113

二、草酸铵结晶紫法 114

第二节 抗酸菌 116

苯酚碱性品红法（抗酸染色） 116

第三节 胃幽门螺杆菌 118

一、硝酸银法 118

二、迈格林华-吉姆萨法 120

三、硼酸亚甲蓝法 121

第四节 螺旋体 122

一、硝酸银法（Ⅰ） 122

二、硝酸银法（Ⅱ） 124

第五节 乙型肝炎病毒 124

一、地衣红法 124

二、醛品红法 126

三、维多利亚蓝法 127

第六节 真菌 129

一、高碘酸-无色品红法 130

二、无色品红-醛品红法 132

三、六胺银法 133

四、爱尔新蓝（pH 2.5）法 136

五、黏液胭脂红法 137

第七节 卡氏肺囊虫 138

一、六胺银法 139

二、荧光桃红-酒石黄法 140

三、吉姆萨（Giemsa）法 142

第三章 病理性沉着物 143

第一节 纤维素 143

一、磷钨酸苏木精法 144

二、马休黄-辉煌结晶猩红-苯胺蓝法 145

第二节 淀粉样蛋白 147

一、甲紫法 148

二、甲醇刚果红法 149

三、硫酸钠爱尔新蓝法 150

四、硫代黄素T荧光色素法 152

第三节 尿酸盐 154

六胺银法 154

第四节 钙盐 155

一、硝酸银法 156

二、茜素红S法 157

第五节铜 158

红氨酸法 158

第四章 色素 160

第一节 黑色素 160

一、硫酸亚铁法 161

二、银氨液浸染法 162

三、脱黑色素法 163

第二节 含铁血黄素 164

一、亚铁氰化钾法 164

二、改良滕波尔法 165

第三节 脂褐素 167

一、三氯化铁铁氰化钾法 167

二、醛品红法 168

第四节 胆色素 169

三氯醋酸三氯化铁法 170

第五节 甲醛色素 171

除甲醛色素方法 171

第五章 内分泌腺及其胞质颗粒 173

第一节 脑垂体细胞 173

高碘酸-无色品红-橙黄G法 174

第二节 胰岛细胞 176

一、缓冲硝酸银法 177

二、醛品红-橙黄G法 178

三、醛品红-荧光桃红法 180

第三节肾上腺嗜铬细胞 181

一、甲苯胺蓝法 181

二、吉姆萨（Giemsa）法 182

第四节 类癌 183

一、嗜银反应 183

二、亲银反应 184

第五节 肥大细胞 186

一、甲苯胺蓝法 186

二、醛品红-橙黄G法 187

三、爱尔新蓝沙红法 188

第六章 神经组织 190

第一节 尼氏体 190

一、缓冲亚甲蓝法 190

二、混合染色法 191

第二节 神经轴突 192

一、硝酸银浸镀法 192

二、甘氨酸银浸镀法 194

第三节 神经髓鞘 195

一、砂罗铬花青R法 196

二、碳酸锂苏木精法 198

三、四氧化锇法 199

第四节 神经胶质细胞 200

氯化金升汞法 201

第七章 脂质 203

第一节 中性脂肪 203

一、苏丹Ⅳ法 204

二、油红O法 206

三、苏丹黑B法 207

第二节 胆固醇及胆固醇酯 208

一、硫酸铁铵法 208

二、高氯酸萘醌法 209

第三节 中性脂和酸性脂 210

硫酸耐尔蓝法 210

第四节 磷脂 211

一、酸性苏木红法 211

二、呲啶提取法 212

第八章 核酸 214

一、酸水解-无色品红法 214

二、甲基绿派洛宁法 217

第九章 糖类 219

一、单糖和双糖 219

二、多糖 219

三、黏多糖 219

四、黏蛋白 220

五、糖蛋白 220

六、糖脂 220

第一节 糖原 220

一、高碘酸-无色品红法（PAS法） 221

二、胭脂红法 223

第二节 中性黏液物质和酸性黏液物质 225

爱尔新蓝（pH 2.5）-高碘酸-无色品红法（AB-PAS法） 225

第三节 酸性黏液物质 227

一、黏液胭脂红法 228

二、爱尔新蓝（pH 2.5）法 229

三、爱尔新蓝（pH 1.0）法 230

四、胶体铁法 231

五、醛品红-爱尔新蓝（pH 2.5）法 233

六、爱尔新蓝（pH 0.5）-爱尔新黄（pH 2.5）法 234

七、高铁二胺-爱尔新蓝（pH 2.5）法 235

八、高碘酸-硼氢化钠-氢氧化钾-高碘酸-无色品红法 236

第四节 黏蛋白 238

一、高碘酸-无色品红法（PAS法） 238

二、六胺银法 239

第五节 糖蛋白 241

第十章 酶类 242

一、酶的分类 242

二、酶的显示方法 243

第一节 碱性磷酸酶 243

一、钙钴法 244

二、α-萘基磷酸酯法 245

第二节 酸性磷酸酶 246

萘酚AS-TR磷酸酯法 246

第三节 三磷酸腺苷酶 249

一、镁激活法 249

二、钙激活法 251

第四节 葡萄糖-6-磷酸酶 253

硝酸铅法 253

第五节 非特异性酯酶 254

酸性乙酸-α-萘酯-六偶氮对品红法 255

第六节 胆碱酯酶 256

亚铁氰化铜法 257

第七节 多巴氧化酶 258

二羟基苯丙氨酸法 259

第八节 琥珀酸脱氢酶 260

硝基蓝四唑法 260

第九节 细胞色素氧化酶 261

一、苯基-对-苯二胺法 262

二、二氨基联苯胺法 263

第十节γ-谷氨酰转肽酶 264

萘酰胺法 264

第四篇 免疫组织化学和原位杂交技术 268

第一章 免疫组织化学技术 268

第一节 免疫组织化学概论 268

一、抗原 268

二、抗体 268

三、免疫组织化学技术的基本概念 269

四、免疫组织化学技术的特点 270

五、免疫组织化学技术的局限性 270

六、常用的免疫组织化学技术及其机制 270

第二节 免疫酶组织化学技术 271

一、抗体标记酶及其性质 271

二、常用的抗体标记酶 271

第三节 免疫酶组织化学技术染色操作准备 272

一、检测标本选择 272

二、组织固定 272

三、组织石蜡切片制备 273

四、载玻片处理 273

五、组织切片 274

六、缓冲液的应用 274

七、抗原修复 274

八、内源性酶消除 276

九、内源性生物素消除 276

十、内源性色素消除 277

十一、实验对照设立 277

十二、血清封闭 278

十三、抗体使用 278

十四、显色与显色剂 279

十五、背景复染与复染试剂 282

十六、封片与封片剂 284

十七、染色结果的观察 284

第四节 常用的免疫组织化学染色方法 284

一、免疫组化染色方法的分类 285

二、免疫组化染色方法采用的技术 286

三、常用免疫组织化学染色方法操作 289

四、自动免疫组化染色机的应用 292

五、免疫组织化学染色质量控制 292

第二章 免疫荧光技术 295

第一节 荧光与荧光素 295

一、荧光 295

二、激发光 295

三、荧光素 296

第二节 荧光素标记的抗体 296

一、抗体的标记 296

二、标记抗体的类型 296

第三节 免疫荧光技术染色操作准备 297

一、组织切片 297

二、组织细胞固定 297

三、玻片选择 297

四、缓冲液选择 297

五、实验对照设立 298

六、抗原修复 298

七、血清封闭 298

八、抗体选择 298

九、组织背景复染 298

十、封片与封片剂 298

十一、标本保存 299

第四节 免疫荧光染色方法及其操作 299

一、免疫荧光染色方法 299

二、免疫荧光染色方法操作 299

三、免疫荧光染色质量控制 300

第五节 荧光图像观察与荧光显微镜 300

一、激发滤片的选择 301

二、荧光显微镜的使用 301

第三章 分子病理学技术 302

第一节 原位杂交技术概论 302

一、原位杂交的基本概念 302

二、原位杂交技术的机制和特点 303

三、原位杂交技术操作 304

第二节 常用原位杂交技术 305

一、原位杂交技术 305

二、荧光原位杂交技术 309

三、质量控制 310

第三节 原位杂交技术在病理诊断中的应用 312

一、EB病毒检测 312

二、人类乳头状瘤病毒检测 312

三、癌基因检测 312

第五篇 临床细胞学技术 314

第一章 临床细胞学检查技术概论 314

第一节 细胞学检查技术基本概念 314

一、细胞学检查范畴 314

二、细胞学检查程序 314

三、细胞学检查的特点和意义 314

四、细胞学标本制作质量控制 315

第二节 细胞学标本采集原则和方法 315

一、标本采集原则 315

二、标本采集前准备 315

三、标本采集方法 316

第三节 细胞学涂片固定 316

一、固定目的 316

二、固定液种类 317

三、固定方法 317

四、质量控制 318

第四节 细胞学常规染色技术 318

一、染色的作用 318

二、染色机制 318

三、染料分类 318

四、常规染色方法 318

五、质量控制 322

第五节 其他细胞学染色技术 322

一、特殊染色和组织化学染色技术 322

二、免疫细胞化学技术 323

三、分子病理学技术 323

四、涂片重染方法 323

第六节 细胞蜡块制作技术 324

一、细胞蜡块制作意义 324

二、细胞蜡块制作步骤 324

三、质量控制 324

第二章 脱落细胞涂片制作技术 325

第一节 浆膜腔积液细胞涂片制作 325

一、标本采集和处理 325

二、涂片制作 325

三、涂片固定 326

四、涂片染色 326

五、质量控制 326

第二节 痰液细胞涂片制作 326

一、标本采集和处理 326

二、涂片制作 327

三、涂片固定 327

四、涂片染色 327

五、质量控制 327

第三节 尿液细胞涂片制作 327

一、标本采集和处理 327

二、涂片制作 327

三、涂片固定 328

四、涂片染色 328

五、质量控制 328

第四节 乳腺分泌物细胞涂片制作 328

一、标本采集和处理 328

二、涂片制作 328

三、涂片固定 329

四、涂片染色 329

五、质量控制 329

第五节 阴道和宫颈细胞涂片制作 329

一、标本采集和处理 329

二、涂片制作 329

三、涂片固定 330

四、涂片染色 330

五、质量控制 330

第六节 液基薄层细胞制作技术 330

一、沉降式液基薄层细胞制片染色技术 330

二、膜式液基薄层细胞制作技术 334

第三章 细针吸取细胞学涂片制作技术 336

第一节 细针吸取细胞学技术应用和操作 336

一、细针吸取细胞学技术的应用范围 336

二、针吸器械的选用 336

三、针吸方法的选择 337

四、穿刺点与肿块的固定 337

五、针吸细胞操作 338

六、注意事项 338

七、针吸并发症与肿瘤播散 338

第二节 涂片制作技术 338

一、涂片方法 339

二、涂片固定 339

三、涂片染色 339

第三节 针吸细胞涂片制作质量控制 341

一、取材涂片 341

二、固定 341

三、染色 341

附录 342

一、常用固定液 342

二、常用染色液 343

三、促蓝液 344

四、缓冲液 345

五、封片剂 347

参考文献 349