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绪论 1

第一节 细胞培养技术发展简史 1

第二节 组织培养技术的应用 4

第一篇 基本理论知识 12

第一章 体外培养细胞的特征 12

第一节 培养细胞生物学特征 12

第二节 培养细胞生存条件和代谢 18

第三节 体外培养细胞成功率分析 26

第四节 细胞系或细胞株的建立 27

第二篇 细胞培养技术 32

第二章 细胞培养的基本条件 32

第一节 细胞培养的实验设施及器材 32

第二节 实验器材的处理 37

第三节 细胞培养常用培养液及试剂 41

第三章 细胞培养的基本实验技术 49

第一节 无菌技术 49

第二节 标本采集的选择与处理 50

第三节 单细胞的制备 52

第四节 初代细胞培养法 55

第五节 传代细胞培养法 58

第六节 悬浮细胞培养法 59

第七节 玻片培养法 59

第八节 细胞计数法 60

第九节 细胞冻存、复苏与运输 62

第十节 细胞污染的检测与排除 63

第四章 动物组织细胞培养技术 66

第一节 大鼠肝细胞培养 66

第二节 新生兔肾细胞培养 68

第三节 大鼠胰岛细胞培养 69

第四节 动物心肌细胞培养 72

第五节 兔软骨细胞培养 75

第六节 新生大鼠骨骼肌细胞培养 77

第七节 兔主动脉平滑肌细胞培养 79

第八节 兔主动脉内皮细胞培养 82

第九节 大鼠神经组织细胞培养 86

第十节 小鼠骨髓细胞培养 89

第十一节 鸡胚成纤维细胞培养 89

第五章 人源组织细胞培养技术 92

第一节 人胚肾细胞培养 92

第二节 人胚肺二倍体细胞培养 93

第三节 人表皮角质形成细胞的培养 94

第四节 人脐带血管内皮细胞培养 95

第五节 肿瘤细胞的培养 96

第六节 羊水细胞的培养 99

第七节 淋巴细胞分离培养 100

第六章 干细胞培养技术 103

第一节 饲养层细胞制备 103

第二节 胚胎干细胞的分离培养 105

第三节 成体干细胞的分离培养 108

第四节 肿瘤干细胞的分离培养 112

第五节 干细胞生物学性状鉴定 114

第三篇 细胞培养检测技术 117

第七章 细胞培养形态学检查 117

第一节 生长状态及一般形态检查 117

第二节 倒置光学显微镜检测法 120

第三节 荧光显微镜检测法 126

第四节 电子显微镜检测法 131

第八章 细胞活性和增殖的检测 137

第一节 细胞计数 137

第二节 细胞活性的检查 138

第三节 细胞生长曲线法 142

第四节 细胞克隆形成试验 143

第五节 软琼脂集落形成试验 145

第九章 细胞培养分析技术 147

第一节 细胞遗传学检测技术 147

第二节 细胞DNA的检测 156

第三节 细胞RNA的检测 160

第四节 细胞基因表达产物的检测 166

第五节 细胞酶活性的检定 176

第六节 细胞凋亡的检测 178

第四篇 细胞培养技术的应用 184

第十章 细胞培养在病毒学研究中常用的实验 184

第一节 细胞培养分离鉴定病毒 184

第二节 中和试验（微量培养法）检测抗病毒抗体 189

第三节 体外抗病毒药效实验（微量细胞培养法） 191

第四节 受体蛋白免疫血清对细胞保护性实验 192

第十一章 细胞培养在免疫学研究常用的实验 194

第一节 杂交瘤细胞株及单克隆抗体制备 194

第二节 免疫细胞的分离与培养 198

第三节 淋巴细胞增殖的测定 204

第四节 免疫细胞功能的体外检测技术 207

第五节 免疫效应细胞毒实验 212

第六节HLA检测 215

第七节 常用细胞因子活性的检测技术 217

第十二章 细胞培养在药学研究中常用的实验 229

第一节 体外细胞培养检测药效主要注意事项 229

第二节 药物对细胞增殖影响的实验 230

第三节 血糖药物研究实验 233

第四节 抗肿瘤药物敏感性检测实验 237

第五节 血管平滑肌增殖的抑制实验 243

第十三章 细胞遗传毒性检测实验 246

第一节 染色体标本制备 246

第二节 染色体畸变实验 249

第三节 淋巴细胞微核实验 250

第四节 非程序性DNA合成实验 251

第五节 姐妹染色单体交换实验 254

第六节 突变实验 256

第七节 试管内致癌实验（彗星试验） 257

第十四章 细胞培养技术在生物工程技术中的应用 260

第一节 细胞培养技术在细胞工程技术中的应用 260

第二节 基因的细胞内转导技术 270

第十五章 细胞培养技术在肿瘤学研究中的应用 286

第一节 培养细胞转化实验 286

第二节 肿瘤细胞浸润实验 289

第三节 肿瘤细胞癌基因及抑癌基因检测 292

第四节 肿瘤多药耐药基因及表达产物的检测 297

参考文献 301

附录 303

1.中英文词汇对照索引 303

2.实验室常用的细胞系 308

3.实验室常用人工合成的细胞培养基 324

4.细胞培养相关实验用缓冲液 326