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第一篇 抗体分子概论 3

第一章 抗体分子概述 3

第一节 抗体研究简史 3

一、抗体的发展 4

二、抗体与肿瘤的研究 9

三、结语 12

第二节 抗体分子的种类 13

一、按来源及产生的方式分类 13

二、按性能分类 14

三、按表达的形式分类 15

四、按制备原理和技术分类 15

五、按结构和功能分类 26

六、结语 28

第三节 抗体分子的产生 30

一、抗体分子产生的有关细胞 30

二、产生抗体分子的过程 33

三、与抗体分子产生的有关因素 36

四、结语 39

第四节 抗体分子的结构 40

一、抗体分子的基本结构 40

二、功能区结构 42

三、立体结构 43

四、基因结构 44

五、抗体分子超家族 49

六、结语 51

一、免疫球蛋白生物合成的过程 52

第五节 抗体分子的生物合成 52

二、免疫球蛋白的组装 53

三、免疫球蛋白的糖基化 54

四、免疫球蛋白的分泌 54

五、免疫球蛋白突变体 55

六、分泌型与膜型免疫球蛋白的合成组装再认识 55

七、结语 56

第六节 抗体分子的表达 58

一、在B细胞分化中的表达 58

二、等位基因排斥 59

三、廇基因易位 59

四、抗体分子的多样性 59

五、结语 61

第七节 抗体分子的代谢 62

第八节 抗体分子的调控 64

一、抗体分子产生的调控 64

二、抗体分子生物合成的调控 69

三、抗体基因转录的调控 69

四、独特型网络的调控 70

五、神经内分泌系统对抗体分子的调控 72

六、结语 73

第九节 抗体分子遗传学 73

一、免疫球蛋白的变异体 74

二、等位排斥 77

三、免疫球蛋白的基因重排 78

四、结语 82

第十节 抗体分子的生物学效应 83

二、活化补体作用 84

一、与抗原特异性结合 84

三、与Fc受体结合及亲细胞性 85

四、免疫调节作用 86

五、抗体的免疫原性 88

六、通过胎盘作用 88

七、免疫损伤效应 89

八、抗体分子的抗肿瘤作用 90

九、结语 91

第十一节 抗体分子受体 92

一、多聚免疫球蛋白受体 92

二、IgFcR 92

三、Ig FcR介导的信号传导 96

四、结语 97

第二章 多克隆抗体和单克隆抗体分子的制备 98

第一节 多克隆抗体的制备 98

一、肿瘤抗原的制备 98

二、免疫动物的选择 103

三、免疫的途径 104

四、佐剂 104

五、免疫方法 106

六、多克隆抗体的采集 107

七、多克隆抗体的质量测定 108

八、结语 110

第二节 小鼠B细胞杂交瘤单克隆抗体的制备 111

一、基本原理 111

二、有关的仪器及试剂 112

四、抗原的准备 114

三、动物的选择 114

五、免疫方案 115

六、小鼠骨髓瘤亲本细胞的准备 117

七、细胞的杂交融合步骤 119

八、杂交瘤细胞的选择性培养 120

九、杂交瘤细胞的克隆化培养 121

十、杂交瘤细胞的冻存与复苏 122

十一、杂交瘤细胞及单克隆抗体的鉴定 124

十二、杂交瘤细胞污染的处理 130

第三节 大鼠B细胞杂交瘤单克隆抗体的制备 133

一、制备大鼠杂交瘤细胞与小鼠杂交瘤细胞的比较 133

二、大鼠抗体分子的特点 133

三、大鼠杂交瘤的制备 134

四、结语 137

二、人-人杂交瘤 138

第四节 人单克隆抗体的制备 138

一、人单抗与鼠单抗制备的异同 138

三、人-鼠杂交瘤 140

四、人B细胞的EBV转化及融合技术 141

五、人单克隆抗体存在的主要障碍 145

六、制备人单克隆抗体的新对策 146

七、结语 153

第五节 抗独特型单克隆抗体的制备 155

一、抗体的独特型 155

二、抗独特型抗体 155

三、抗独特型单克隆抗体的制备与检测 156

四、结语 157

第三章 基因工程抗体的研制 159

一、人-鼠嵌合抗体 160

第一节 鼠单克隆抗体的人源化 160

二、改型抗体 163

三、结语 167

第二节 单价小分子抗体 170

一、Fab抗体 170

二、单链抗体 172

三、单域抗体 176

四、高变区多肽 176

五、结语 177

第三节 多价微型抗体 179

一、多价单特导性微型抗体 179

二、多价微抗的表达及稳定性 183

三、多价微抗的一般特征 184

四、多价微抗的亲和力及柔韧性 185

五、多价多特异性微型抗体 186

六、结语 186

第四节 双特异性抗体 188

一、双特异性抗体的发展 188

二、双特异性抗体的制备与构建 189

三、双特异性抗体的表达 192

四、双特异性抗体的作用机制及应用 192

五、结语 198

第五节 细胞内抗体 201

一、细胞内抗体的构建策略 201

二、细胞的抗体的医学应用 201

三、结语 203

第六节 抗原化抗体 204

一、抗原化抗体的分子生物学基础 205

二、抗原化抗体的性质 205

三、抗原化抗体的构建 206

四、抗原化抗体的应用 206

五、结语 207

第七节 抗体融合蛋白 209

一、免疫粘附素 210

二、免疫毒素 212

三、催化抗体 214

第八节 免疫脂质体 221

一、免疫脂质体的种类 221

二、免疫脂质体用于肿瘤导向治疗的优越性 222

三、免疫脂质体在应用中的问题 223

四、结语 224

第九节 噬菌体抗体 225

一、基本原理 225

二、噬菌体抗体库的分类 226

三、噬菌体抗体的克隆和表达 228

四、噬菌体抗体的应用 235

五、结语 238

第四章 抗体分子的标记 241

第一节 荧光素标记抗体 241

一、基本原理 241

二、荧光抗体的制备 241

三、荧光标记抗体的应用 249

四、结语 252

一、基本原理 253

第二节 酶标记抗体 253

二、酶标抗体的制备 254

三、酶标抗体的纯化 255

四、结语 256

第三节 放射性核素标记抗体 256

一、常用的放射性核素 256

二、放射性核素与抗体分子的标记 256

三、结语 264

第四节 免疫毒素 265

一、毒素及其衍生物 265

二、毒素与抗体的标记 267

三、结语 268

二、化疗药物与抗体的标记 269

一、导向化疗药物 269

第五节 化疗药物标记抗体 269

三、结语 272

第六节 化学发光物标记抗体 273

一、化学发光物 273

二、化学发光物与抗体的标记 275

三、结语 280

第七节 脂质体标记抗体 281

一、脂质体概述 281

二、免疫脂质体的制备 283

三、结语 286

第八节 胶体金银标记抗体 287

一、原理和优点 287

二、胶体金的制备 288

三、免疫金银法 292

四、结语 294

第九节 铁蛋白标记抗体 294

一、铁蛋白的特性 294

二、探针的制备 295

三、结语 296

第二篇 抗体分子与肿瘤免疫 299

第一章 肿瘤的发生和发展 299

第一节 肿瘤相关抗原的识别 300

一、肿瘤抗原的分类 301

二、抗体分子与肿瘤相关抗原的识别机制 303

三、结语 303

第二节 肿瘤抗原的纯化及生物化学的基本特性 304

一、基本原理 304

二、肿瘤相关抗原纯化的有关技术 305

三、肿瘤抗原的生化性质 311

四、结语 312

第三节 肿瘤的生物学行为 313

一、肿瘤相关抗原的检测分析 313

二、对肿瘤抗原调变的监测 314

三、对捐资转移与扩散生物学行为的认识 314

四、结语 315

第四节 肿瘤治疗及预后 316

一、抗体检测对肿瘤治疗及预后的意义 316

二、抗肿瘤单抗的临床应用 317

三、结语 318

第二章 抗体分子的肿瘤免疫学诊断 320

第一节 肿瘤的免疫组织化学检测 320

一、上皮源性肿瘤标志物 321

二、间叶源性肿瘤标志物 328

三、神经源性肿瘤标志物 333

四、淋巴造血系统肿瘤标志物 336

五、肿瘤免疫组织化学染色的有关问题 337

六、结语 339

第二节 肿瘤可容性蛋白抗原的测定 340

一、检测方法 340

二、肿瘤相关抗原的检测 344

三、结语 344

第三节 免疫电镜的应用 345

一、抗原定位的方法 345

二、铁蛋白标记抗体的免疫电镜 347

四、胶体金标记抗体的免疫电镜 348

三、酶标记抗体的免疫电镜 348

五、结语 349

第四节 在流式细胞仪中的应用 350

一、基本原理 350

二、检测技术 351

三、在肿瘤研究中的应用 351

四、结语 353

第五节 在激光扫描共聚焦显微技术中的应用 354

一、基本原理 354

二、在抗体检测中的应用 360

三、结语 361

第六节 肿瘤的放射免疫显像及预定位 362

一、 肿瘤的放射免疫显像 362

二、 预定位技术 364

三、 结语 366

第七节 抗体芯片 367

一、概述 367

二、抗体芯片技术 367

三、抗体芯片在肿瘤研究中的应用 368

四、结语 368

第八节 有关肿瘤的免疫学诊断 370

一、肝癌 370

二、胃癌 373

三、肺癌 378

四、大肠癌 383

五、白血病 393

六、妇科肿瘤 399

七、乳腺癌 403

八、胰腺癌 405

九、其他肿瘤 408

第三章 抗体分子的肿瘤免疫靶向治疗 425

第一节 在肿瘤免疫治疗中的地位 425

一、肿瘤的免疫治疗 425

二、抗体在肿瘤免疫治疗中的作用 426

三、结语 427

第二节 免疫靶向治疗的作用机制 428

一、直接作用 429

二、间接作用 429

三、结语 429

第三节 运载的效应物质种类 430

二、毒素 431

一、放射性核素 431

三、化疗药物 432

四、激素 433

五、酶 433

六、生物反应调节剂 434

七、重组融合蛋白 435

八、脂质体 435

九、结语 435

第四节 免疫靶向治疗的途径 436

一、体内法 436

二、体外法 436

三、局部给予法 436

四、放射免疫导向手术 437

五、结语 438

第五节 抗体分子在肿瘤治疗中的作用 439

一、主动免疫治疗 439

二、被动免疫治疗 440

三、结语 441

第六节 抗体分子在肿瘤靶向治疗中的应用 442

一、抗肿瘤相关抗原的抗体分子治疗 442

二、抗细胞因子受体的抗体分子治疗 442

三、抗人白细胞分化抗原的抗体分子治疗 442

四、抗肿瘤多耐药基因抗体分子的治疗 443

五、抗瘤基因产物等的抗体分子治疗 444

六、结语 444

第七节 抗独特型抗体在肿瘤免疫治疗中的应用 445

一、独特型抗体与肿瘤疫苗 445

二、抗独特型抗体的抗瘤效应中的实验研究 446

三、抗独特型抗体在临床中的抗瘤效应研究 448

四、结语 449

第八节 抗体分子在肿瘤病人骨髓移植免疫中的应用 452

一、移植物抗宿主病及其发病机制 452

二、移植物抗宿主病的预防和治疗 453

三、结语 455

第九节 免疫脂质体在靶向治疗中的应用 457

一、脂质体的结构和作用特点 457

二、免疫脂质体及其在靶向治疗恶性肿瘤中的应用 457

三、结语 459

第五节 抗体分子生物半寿期的延长 460

一、延长抗体片段半寿期的意义 460

二、延长抗体分子半寿期的方法 461

四、结语 463

三、展望 463

第四章 抗体分子与肿瘤相关基因 465

第一节 抗体分子与瘤基因 466

一、瘤基因的分类 466

二、瘤基因的活化与癌 468

三、瘤基因产物的免疫学作用 470

四、抗瘤基因抗体的应用 470

五、结语 470

第二节 抗体分子与抑瘤基因 471

一、抑瘤基因的分类 472

二、抑瘤基因的生物学活性 472

三、抑瘤基因灭活的机制 475

四、抑瘤基因在细胞癌变中的作用 475

六、结语 476

五、抑瘤基因产物的免疫学作用 476

一、肿瘤转移的相关基因 477

第三节 抗体分子与肿瘤转移 477

二、肿瘤转移抑制基因 479

四、抗体分子的作用 481

五、结语 481

第四节 抗体分子与免疫共刺激因子 483

一、免疫共刺激分子的基因概念 483

二、抗体分子对免疫共刺激分子的研究 483

三、结语 484

第一节 工程抗体产业化的基本概念 487

二、工程抗体产业化的基本概念及其目的 487

一、工程抗体的基本概念 487

第一章 工程抗体产业化概述 487

第三篇 工程抗体产业化 487

三、工程抗体产业化的实施过程 488

第二节 工程抗体产业化的发展 488

第二章 工程抗体的中试研究 493

第一节 中试研究的基本条件 493

一、中试研究室的设计要求 494

二、中试研究室的管理规程 495

三、中试研究室的安全规程 495

四、中试实验室的无菌操作规程 496

第二节 中试研究的仪器设备 496

一、中试研究的一般仪器 497

二、生物反应器 497

二、中试生产工艺的优化 503

一、中试生产工艺的设计 503

第三节 中试生产工艺的研究 503

第三章 哺乳动物细胞的大规模培养 505

第一节 细胞培养过程的放大 505

一、筛选细胞系 506

二、确定培养条件 506

三、产物表达的优化 506

四、中试放大 506

五、放大生产 506

第二节 动物细胞培养的环境 507

一、培养用物品的无菌处理 507

二、培养条件 508

一、天然培养基 509

第三节 动物细胞培养基 509

二、合成培养基 510

第四节 常用培养方法 512

一、悬浮培养 512

二、贴壁培养 513

第五节 动物细胞培养的操作方式 515

一、分批式操作 515

二、流加式操作 515

三、半连续式操作 516

四、连续灌流式操作 516

第四章 细胞工程抗体产业化 518

第一节 单克隆抗体的生产方法 518

一、小鼠腹腔体内生产法 518

二、生物反应器大规模生产 519

三、转基因动物体内生产 520

一、培养基的配制 521

第二节 大规模生产的操作 521

二、种子细胞的制备 522

三、杂交瘤细胞的大规模培养 522

四、产品的分离纯化 523

五、产品的冷漠干燥 526

第五章 基因工程抗体产业化 527

第一节 基因工程抗体表达系统 527

一、大肠杆菌表达系统 528

二、酵母表达系统 528

三、昆虫细胞表达系统 529

四、哺乳动物细胞表达系统 529

一、培养设备 530

第二节 基因工程抗体产业化的工艺 530

二、培养方式 531

三、发酵工艺 532

第六章 工程抗体的分离纯化 535

第一节 工程抗体的初级分离 535

一、离心沉降分离 536

二、过滤分离 538

三、吸附技术 539

四、溶剂沉淀方法 541

五、结语 543

第二节 工程抗体的层析法分离纯化 544

一、离子交换层析 544

二、凝胶过滤柱层析 548

三、疏水性相互作用层析 553

四、亲和层析 555

五、羟基磷灰石吸附层析 558

六、亲硫吸附层析 559

七、混合态层析 560

八、灌注层析 560

九、结语 562

第七章 工程抗体的质量控制 565

第一节 工程抗体的物化指标测定 565

一、纯度测定 565

二、含量测定 570

三、相对分子质量测定 572

四、结语 574

一、安全性评价的目的 575

第三节 工程抗体的安全性评价 575

第二节 工程抗体生物活性的测定 575

二、工程抗体新药安全评价的要求 576

三、工程抗体新药安全性评价的方法 576

四、结语 577

第四节 工程抗体稳定性 577

一、纯度分析 577

二、活性分析 577

三、结语 578

第五节 抗体分子的保存 578

一、影响抗体分子保存的因素 578

二、抗体分子的保存方法 579

三、结语 581

［附录］缩写词中英文对照 583