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第一章　光谱技术 1

实验1　紫外分光光度法测定血清蛋白质 1

附：紫外分光光度法测定核酸的浓度 3

实验2　血红蛋白及其衍生物的吸收光谱分析 3

实验3　荧光光度法测定β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶含量 5

实验4　原子吸收分光光度法测定血浆锌的含量 7

第二章　层析技术 10

实验5　离子交换柱层析法分离混合氨基酸 10

实验6　凝胶过滤法分离蛋白质 11

实验7　亲和层析法提取特异性IgG 13

实验8　固相层析免疫分析法快速检测肌钙蛋白Ⅰ 15

附：全自动化学发光法测定血浆肌钙蛋白Ⅰ含量 16

第三章　电泳技术 17

实验9　醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 17

附：聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 21

实验10　琼脂糖电泳分离血清脂蛋白 24

实验11　等电聚焦电泳测定血清蛋白质等电点 25

实验12　毛细管电泳分离血清蛋白质 27

实验13　脉冲场凝胶电泳技术分离DNA 28

附：自动电泳分析系统简介 30

第四章　酶学基本知识实验 31

实验14　分离纯化小麦胚芽中酸性磷酸酶 31

实验15　酶蛋白含量测定及比活性分析 34

实验16　酸性磷酸酶时间进程曲线 37

实验17　酸性磷酸酶酶浓度-速度曲线 38

实验18　pH-酸性磷酸酶活性曲线 39

实验19　酸性磷酸酶米氏常数的测定 40

实验20　磷酸盐对酸性磷酸酶活性的抑制作用 41

第五章　分子生物学实验技术 43

实验21　大鼠肝组织DNA的提取及其含量测定 43

附：外周血细胞DNA的快速提取 44

实验22　碱裂解法从大肠杆菌中制备质粒DNA 45

附：一步法提取质粒DNA 48

实验23　PCR扩增目的DNA 48

实验24　DNA限制性图谱的绘制——DNA的限制性内切酶酶切分析 50

附：聚丙烯酰胺凝胶电泳银染分析DNA 51

实验25　Southern印迹 54

实验26　DNA自动测序实验 56

第六章　方法学评价与试剂盒评价实验 60

第一节　方法学评价试验 60

实验27　线性范围试验 60

实验28　批内重复性试验 62

实验29　回收试验 65

实验30　干扰试验 66

实验31　方法比较试验 68

实验32　检测能力测定 70

附1：血糖测定评价方法（GOD-POD法） 72

附2：血糖测定比较方法（HK法） 73

实验33　化学反应速度时间曲线试验 75

第二节　试剂盒质量评价试验 75

附：稳定性试验 76

第七章　血清（浆）蛋白质测定 78

实验34　双缩脲法测定血清蛋白 78

实验35　溴甲酚绿法测定血清白蛋白 80

附：溴甲酚紫法测定血清白蛋白 82

实验36　免疫透射比浊法测定前白蛋白 83

实验37　凝固法定量测定纤维蛋白原 86

附：热沉淀比浊法测血浆纤维蛋白原 88

实验38　酚试剂法测定血清粘蛋白 89

第一节　血清（浆）葡萄糖测定 92

实验39　葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 92

第八章　糖及其代谢物的测定 92

实验40　邻甲苯胺法测定血清（浆）葡萄糖 94

实验41己糖激酶法测定血清（浆）葡萄糖 96

第二节　血清（浆）糖化蛋白的测定 98

实验42　微柱法分离糖化血红蛋白 98

实验43　果糖胺法测定糖化血清蛋白 100

第三节　血液其他糖类及糖代谢产物的测定 101

实验44　半乳糖氧化酶法测定半乳糖 101

实验45　比色法测定全血乳酸 103

实验46　乳酸脱氢酶法测定全血乳酸 105

实验47　分光光度法测定全血丙酮酸 106

实验48　乙酰丙酮显色法测定血清甘油三酯 109

第一节　血清甘油三酯的测定 109

第九章　血清（浆）脂类及脂蛋白测定 109

实验49　磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯 111

第二节　血清胆固醇的测定 113

实验50　胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 113

第三节　血清（浆）脂蛋白的测定 114

实验51　磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白-胆固醇 114

附：过氧化物酶清除法测定高密度脂蛋白-胆固醇 116

实验52　聚乙烯硫酸盐沉淀法测定血清（浆）低密度脂蛋白-胆固醇 118

附：表面活性剂清除法测定血清（浆）低密度脂蛋白-胆固醇 120

实验53　免疫透射比浊法测定脂蛋白（a） 122

附：酶联免疫吸附法测定脂蛋白（a） 123

实验54　免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A Ⅰ和载脂蛋白B 125

第四节　血清载脂蛋白的测定 125

第十章　血清无机离子及微量元素测定 127

第一节　钾、钠离子测定 127

实验55　火焰发射光谱法测定血清钾、钠离子 127

实验56　离子选择性电极电位法测定血清钾、钠离子 130

第二节　血清钙测定 133

实验57　偶氮胂Ⅲ比色法测定血清总钙 133

实验58　甲基百里香酚蓝法测定血清总钙 134

实验59　离子选择性电极电位法测定钙离子 135

第三节　血清磷测定 137

实验60　还原钼蓝法测定血清磷 138

实验61　黄嘌呤氧化酶法测定血清磷 138

实验62　甲基麝香草酚蓝法测定血清镁 140

第四节　血清镁测定 140

实验63　钙镁试剂比色法测定血清镁 142

第五节　氯化物的测定 143

实验64　硫氰酸汞比色法测定血清氯 143

实验65　离子选择性电极法测定血清氯 146

第六节　微量元素的测定 146

实验66　双环己酮草酰二腙比色法测定血清铜 147

附：原子吸收分光光度法测定血清铜 149

实验67　吡啶偶氮酚比色法测定血清锌 150

实验68　亚铁嗪比色法测定血清铁和总铁结合力 151

实验69　血气分析 155

第十一章　血气分析 155

实验70　酶法测定血浆二氧化碳 161

第十二章　激素及激素代谢产物的测定 164

实验71　酶联免疫吸附法测定人绒毛膜促性腺激素 164

实验72　酶标免疫荧光法测定血清皮质醇 165

实验73　时间分辨免疫法测定血浆雌二醇 168

实验74　尿17-酮类固醇测定 169

实验75　尿17-羟皮质类固醇测定 172

实验76　柱层析荧光法测定尿液儿茶酚胺 173

实验77　尿香草扁桃酸测定 176

实验78　放射免疫法测定血浆醛固酮 178

第一节　血清尿素的测定 181

实验79　二乙酰一肟法测定血清尿素 181

第十三章　非蛋白含氮化合物及总胆汁酸测定 181

实验80　脲酶-波氏比色法测定血清尿素 183

实验81　酶偶联速率法测定血清尿素 184

第二节　血清肌酐测定 185

实验82　去蛋白碱性苦味酸法测定血清肌酐 186

实验83　不去蛋白速率法测定血清肌酐 187

实验84　内生肌酐清除率测定 188

第三节　血清尿酸测定 190

实验85　磷钨酸还原法测定血清尿酸 190

实验86　尿酸酶-过氧化物酶偶联法测定血清尿酸 192

第四节　血氨测定 193

实验87　酶法测定血浆氨 193

实验88　干化学法测定血浆氨 195

第五节　血清总胆红素和结合胆红素测定 196

实验89　改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 196

实验90　胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素 199

附1：二甲亚砜法测定总胆红素 201

附2：钒酸氧化法测定总胆红素和结合胆红素 202

第六节　总胆汁酸测定 203

实验91　酶比色法测定总胆汁酸 203

附：酶循环法测定血清总胆汁酸 206

第十四章　常用酶类测定 208

第一节　氧化还原酶类 208

实验92　连续监测法测定乳酸脱氢酶总活性（L-P反应法） 208

实验93 比色法测定乳酸脱氢酶总活性 210

实验94　琼脂糖电泳法测定乳酸脱氢酶同工酶 211

实验95　连续监测法测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 214

实验96　邻联大茴香胺比色法测定血清铜蓝蛋白 216

实验97　苄醛偶氮奈酚法测定血清单胺氧化酶 218

实验98　邻苯三酚自氧化抑制法测定超氧化物歧化酶 219

第二节　转移酶类测定 222

实验99　赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 222

附：赖氏法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 225

实验100　连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶 227

附：连续监测法测定血清门冬氨酸氨基转移酶 229

实验101　连续监测法测定血清γ-谷氨酰基转移酶 230

实验102　肌酸显色法测定血清肌酸激酶 232

实验103　连续监测法测定血清肌酸激酶 234

实验104　琼脂糖凝胶电泳法测定血清肌酸激酶同工酶 236

第三节　水解酶类的测定 239

实验105　磷酸苯二钠比色法测定血清碱性磷酸酶 239

实验106　磷酸麝香草酚酞比色法测定酸性磷酸酶 241

实验107　羟胺三氯化铁比色法测定血清胆碱酯酶 243

实验108　碘-淀粉比色法测定血清淀粉酶 245

实验109　连续监测法测定淀粉酶 247

实验110　血清脂肪酶的测定 248

第十五章　常用治疗性药物监测 250

实验111　双波长紫外分光光度法测定血清茶碱及药代动力学参数计算 250

实验112　化学发光酶免疫法测定地高辛 253

实验113　高效液相色谱法测定血清苯妥英 255

实验114　高效液相色谱法测定全血环孢素A 257

实验115　荧光偏振免疫法测定全血环孢素A 259

实验116　改良扩散法测定血液乙醇的含量 261

附：REA法测定乙醇含量 263

第十六章　肿瘤标志物的测定 266

实验117　放射免疫（双抗体）法测定甲胎蛋白 266

附：免疫电泳自显影法测定甲胎蛋白异质体 268

实验118　ELISA法测定癌胚抗原（CEA） 269

附：放射免疫法测定癌胚抗原 271

实验119　放射免疫分析法测定CA19-9 273

实验120　化学发光法测定抗前列腺特异性抗原（抗PAS） 275

附：时间分辨荧光免疫分析法检测PSA-α1抗胰凝乳蛋白酶 277

实验121　放射免疫分析法测定血清铁蛋白 278

实验122　β2-微球蛋白的测定 280

第十七章　神经递质与其他生物活性物质的测定 282

实验123　放射免疫法测定β-内啡肽 282

实验124　放射免疫法测定血浆P物质 285

实验125　反相高效液相色谱法测定血清γ-氨基丁酸 288

实验126　重氮化反应法测定血清一氧化氮测定 290

参考文献 294

附录一　临床化学实验室基础 296

第一节　常用玻璃器皿及量器的使用 296

第二节　试剂及试剂的配制 300

第三节　pH和缓冲液 304

附录二 常用生化检验英文缩写术语 311

中英文索引 318