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第一章 毒理学实验基础 1

第一节 毒理学实验的原则和局限性 1

第二节 毒理学毒性评价试验的基本目的 3

第三节 动物实验的职业道德 4

第四节 实验动物的选择和管理 4

第五节 实验动物的准备 8

第六节 受试物和样品的准备 12

第七节 实验动物染毒途径和技术 13

第八节 实验动物生物标本采集及处死 19

第九节 毒理学试验的统计学 22

第十节 优良实验研究规范 32

第二章 一般毒性试验 34

第一节 急性毒性试验 34

一、经口急性毒性试验 34

二、经呼吸道急性毒性试验 49

三、经皮肤急性毒性试验 50

第二节 局部毒性试验 51

第三节 蓄积毒性试验 54

第四节 亚慢性和慢性毒性试验 55

一、亚慢性毒性试验 55

二、慢性毒性试验 56

第三章 特殊毒性试验方法 59

第一节 致突变实验方法 59

一、鼠伤寒沙门菌回复突变试验 59

二、哺乳动物细胞基因突变试验 63

三、动物骨髓细胞染色体畸变分析 68

四、小鼠骨髓细胞微核试验 70

五、单细胞凝胶电泳技术 72

第二节 致癌试验 75

一、哺乳动物细胞体外恶性转化试验 76

二、哺乳动物短期致癌试验 78

三、哺乳动物长期致癌试验 79

第三节 发育毒性和致畸作用试验 80

一、三段生殖毒性试验 81

二、大鼠体外全胚胎培养试验 86

第四章 血液毒理学研究方法 92

第一节 特殊血液学检测 92

一、网织红细胞计数 92

二、红细胞渗透脆性试验 93

三、高铁血红蛋白含量测定 93

四、变性珠蛋白小体测定(煌焦油蓝沉淀法) 94

五、血液细胞的化学染色 95

六、血液细胞的免疫细胞化学染色 96

七、免疫细胞表面标志的检测 96

八、血液细胞凋亡的检测 97

九、细胞遗传学和分子生物学检测 97

第二节 血液和骨髓毒物筛选试验 98

一、骨髓造血细胞的体外培养 98

二、体内试验-白血病实验动物模型 98

二、接触外源化学物的剂量、途径和时间 100

一、实验动物的选择 100

第五章 免疫毒理学研究方法 100

第一节 免疫毒性研究实验设计 100

三、重视局部免疫功能的检测 101

第二节 免疫抑制检测方法 102

一、体液免疫功能测定(溶血空斑试验) 102

二、淋巴细胞增殖试验(MTT比色法) 103

三、细胞免疫功能测定(皮肤迟发型超敏反应，DTH) 105

四、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶释放法) 106

一、皮肤超敏反应测定 107

第三节 超敏反应检测方法 107

二、呼吸道超敏反应测定 108

三、腘窝淋巴结试验 108

第六章 生殖毒理学研究方法 110

第一节 生殖毒性试验 110

一、一代生殖毒性试验 110

二、两代(多代)生殖毒性试验 112

第二节 环境雌激素检测 113

一、大鼠子宫增重试验 113

二、雌激素受体结合试验 114

三、MCF-7细胞增殖试验 115

第三节 精子动力学研究 116

第四节 性激素水平分析 118

一、血清、睾丸/卵巢组织匀浆液中FSH含量测定 118

二、尿液中FSH含量测定 119

三、尿液中β-hCG含量测定 121

第七章 神经毒理学研究方法 124

第一节 迟发性神经毒性试验 124

一、通路示踪法 125

第二节 神经毒理学形态学方法 125

二、化学神经解剖法 128

第三节 神经毒理学生理学方法——神经递质定量测定 130

第四节 神经毒理学分子生物学方法 131

一、神经丝蛋白免疫印迹法 131

二、神经丝mRNA含量测定 134

第五节 电生理实验方法：膜片钳 136

一、行为畸胎学测试组合 138

第六节 行为致畸毒性测试方法 138

二、行为畸胎学研究组合 141

第八章 呼吸毒理学研究方法 147

第一节 肺功能测定 147

第二节 在体BAL与BALF分析 148

第三节 体外IPL与分析 150

第四节 胎鼠肺细胞原代培养与上皮细胞纯化 151

第九章 肝脏毒理学研究方法 153

第一节 肝损害的体内评价方法 153

一、血清酶活性测定 153

二、肝脏排泄功能测定 155

三、肝脏分泌功能测定 158

四、肝纤维化测定 160

第二节 肝损害的体外评价方法 162

一、体外离体肝灌流与分析 162

二、大鼠肝细胞原代培养实验方法 164

一、小鼠急性肝损伤模型 166

第三节 化学性肝损伤动物模型 166

二、大鼠慢性肝损伤模型 167

三、小鼠免疫性肝损伤模型 168

第十章 肾脏毒理学研究方法 170

第一节 体内实验 170

一、尿液的一般生化指标 170

二、肾脏血流动力学和血流量分析 171

三、肾小球滤过率和肾脏清除率测定 172

四、肾脏的微穿刺和微灌注技术与应用 177

五、电子探针显微分析法 179

第二节 体外试验 180

一、体外细胞培养与细胞毒性试验 180

二、肾膜囊泡的分离与应用 180

第十一章 心血管毒理学研究方法 182

第一节 心血管毒理学动物实验研究方法 182

第二节 心功能评价方法 183

一、心肌细胞原代培养 184

第三节 心脏毒性体外评价方法 184

二、细胞增殖试验 185

三、DNA含量及细胞周期分析 186

第四节 细胞凋亡与坏死检测 186

一、形态学测定方法 186

二、琼脂糖凝胶电泳方法 187

三、酶联免疫分析方法 188

四、流式细胞仪检测方法 189

一、动物皮肤刺激试验 190

第一节 皮肤刺激/腐蚀实验 190

第十二章 皮肤毒理学研究方法 190

二、人体皮肤刺激试验 191

第二节 皮肤致敏和光敏试验 194

一、皮肤变态反应试验 194

二、皮肤光毒和光变态反应试验 198

第三节 皮肤吸收试验 199

一、在体皮肤吸收试验 199

二、离体皮肤吸收试验 200

参考文献 202