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绪论 1

第一节 病毒与病毒学检验 1

一、病毒学前历史 1

二、病毒的发现 2

三、病毒的培养与观察 4

四、病毒的鉴定 5

第二节 病毒学检验的内容与应用范围 6

一、病毒学检验的一般原则 6

二、病毒学检验的主要内容和特点 9

三、病毒学检验的应用范围 12

第三节 新发传染病病毒的检测策略 14

一、影响新发传染病的因素 14

二、样品收集 16

三、分离新病毒 17

四、分子生物学鉴定新病毒 17

第一篇 病毒学检验技术 23

第一章 细胞培养技术 23

第一节 细胞培养概述 23

一、体外培养细胞的生物学特性 24

二、组织细胞培养种类 27

三、细胞系的建立、保存和鉴定 28

第二节 细胞培养技术 29

一、细胞培养的基本设施与条件 29

二、细胞准备 32

三、细胞污染监测与防控 38

第三节 细胞培养技术在病毒学检验中的应用 40

一、病毒的分离培养及鉴定 40

二、病毒定量检测 46

三、药物体外抗病毒试验 47

四、肿瘤病毒致癌机制研究 48

第二章 鸡胚和动物接种技术 50

第一节 鸡胚接种技术 50

一、鸡胚的结构与生理 51

二、鸡胚的孵育和检查 52

三、鸡胚的接种途径及方法 52

四、病毒的检测 56

第二节 动物接种技术 57

一、实验动物的种类与基本操作方法 58

二、动物接种后的观察、标本采集和处理 63

三、使用实验动物的基本原则 65

四、病毒学检验中动物实验的基本步骤 66

五、病毒学动物实验应注意的问题 67

第三节 鸡胚和动物接种技术在病毒检验中的应用 67

一、在病毒分离中的应用 67

二、在病毒鉴定中的应用 69

三、在病毒性疾病发病及免疫研究中的应用 69

四、在抗病毒药物和病毒疫苗效果及安全性检测中的应用 69

五、疫苗的研制 70

第三章 病毒核酸检测与分析技术 71

第一节 核酸杂交技术 71

一、基本原理 71

二、核酸探针的制备 72

三、Southern印迹 76

四、Northern印迹 78

五、其他核酸杂交技术 79

第二节 核酸扩增技术 81

一、聚合酶链反应 81

二、其他的靶序列扩增方法 89

三、探针扩增方法 91

四、信号放大技术 91

五、核酸扩增方法在病毒检测中的局限性 92

第三节 基因芯片技术 93

一、基因芯片定义 93

二、制作方法 94

三、检测技术 95

四、分析与实验设计 95

五、在病毒学检验中的应用 96

第四节 病毒基因分型技术 97

一、病毒基因组的概念和特点 97

二、基因分型的传统方法 99

三、基因分型的新方法 101

四、基因分型的应用 102

第五节 病毒核酸变异分析 104

一、病毒核苷酸序列变异的生物学基础 104

二、病毒核苷酸序列变异分析中靶标序列的选择策略与方法 106

三、病毒核苷酸序列数据的来源 107

四、序列整理分析 108

五、解决在实验设计中的不可避免的遗传异质性 111

六、使用MEGA软件进行系统进化分析 111

第四章 病毒抗原与抗体检测技术 117

第一节 免疫荧光技术 118

一、概述 118

二、免疫荧光试验 120

三、免疫荧光显微技术 123

四、时间分辨免疫荧光技术 124

第二节 酶免疫技术 127

一、概述 127

二、酶联免疫吸附试验 131

三、免疫酶染色试验 134

第三节 放射免疫技术 135

一、概述 135

二、放射免疫分析 140

第四节 中和试验、血凝试验及其他检测技术 141

一、概述 141

二、中和试验 141

三、血凝试验及血凝抑制试验 145

四、补体结合试验 149

五、单克隆抗体技术 151

第五章 电子显微镜观察技术 154

第一节 电子显微镜简介 154

第二节 透射电子显微镜样本的一般处理方法及技术 156

一、载网 156

二、负染技术 157

三、超薄切片制样技术 165

四、免疫电子显微镜技术 168

第三节 病毒形态检测结果的分析 172

一、针对病毒负染检测结果的分析 172

二、针对病毒超薄切片检测结果的分析 173

三、病毒形态举例 173

第二篇 常见各类病毒的检验 189

第六章 呼吸道感染病毒及其检验 189

第一节 临床表现与标本采集 190

一、临床表现类型 190

二、标本采集与注意事项 190

第二节 常见呼吸道感染病毒的生物学和流行病学特征 192

一、正黏病毒／流感病毒 193

二、副黏病毒 197

三、鼻病毒和其他小RNA病毒科病毒 199

四、冠状病毒 200

五、腺病毒 202

六、水痘带状疱疹病毒 204

第三节 实验室检测 205

一、标本类型与处理 205

二、直接检测病毒 206

三、病毒分离与鉴定 207

四、血清学诊断 209

五、抗病毒药物的敏感性实验 210

六、实验方法的选择与报告 211

第四节 预防与治疗 211

一、呼吸道病毒感染预防 212

二、呼吸道病毒感染治疗 212

第七章 胃肠道感染病毒及其检验 214

第一节 肠道病毒及其检验 214

一、临床表现与标本采集 215

二、肠道病毒的生物学和流行病学特征 219

三、实验室检测 226

四、预防与治疗 229

第二节 腹泻病毒及其检验 231

一、临床表现与标本采集 231

二、常见腹泻病毒的生物学和流行病学特征 232

三、实验室检测 235

四、预防与治疗 238

第八章 皮肤和黏膜感染病毒及其检验 240

第一节 临床表现与标本采集 241

一、临床表现类型 241

二、标本类型与采集 245

第二节 常见皮肤和黏膜感染病毒的生物学和流行病学特征 246

一、痘病毒 246

二、疱疹病毒 248

三、乳头瘤病毒 252

第三节 实验室检测 253

一、标本类型与处理 254

二、直接检测病毒 254

三、病毒分离和鉴定 257

四、血清学诊断 258

五、新型疱疹病毒的实验室诊断 260

第四节 预防与治疗 260

一、天花 260

二、单纯疱疹病毒 260

三、水痘－带状疱疹病毒 261

四、人巨细胞病毒 261

五、EB病毒 262

六、乳头瘤病毒 262

第九章 眼部及心血管感染病毒与检验 264

第一节 眼睛病毒感染 264

一、腺病毒引起的眼部感染 265

二、狂犬病毒引起的眼部感染 268

三、疱疹病毒引起的眼部感染 272

第二节 心血管感染的病毒 275

一、临床表现与标本采集 275

二、心血管感染病毒的生物学和流行病学特征 277

三、实验室检测 278

四、预防与治疗 279

第十章 肝炎病毒及其检验 281

第一节 临床表现与标本采集 281

一、临床表现类型 281

二、标本类型与采集 283

第二节 常见肝炎病毒的生物学和流行病学特征 283

一、甲型肝炎病毒 283

二、乙型肝炎病毒 285

三、丙型肝炎病毒 291

四、丁型肝炎病毒 293

五、戊型肝炎病毒 294

第三节 实验室检测 295

一、标本类型与处理 296

二、直接检测病毒 297

三、病毒分离与鉴定 297

四、血清学诊断 300

五、抗病毒药物的疗效检测 305

六、肝炎病毒感染的实验室诊断 305

第四节 预防与治疗 306

一、HAV和HEV 306

二、HBV和其他肝炎病毒 307

第十一章 出血热病毒及其检验 310

第一节 临床表现与标本采集 310

一、临床表现类型 310

二、标本类型与采集 312

第二节 常见出血热病毒的生物学和流行病学特征 313

一、布尼亚病毒 314

二、丝状病毒 318

三、沙粒病毒 326

第三节 实验室检测 328

一、安全问题 328

二、实验室病原学检测 328

三、临床实验室检测 331

第四节 预防与治疗 332

一、布尼亚病毒 332

二、丝状病毒 333

三、沙粒病毒 334

第十二章 虫媒病毒及其检验 336

第一节 临床表现与标本采集 337

一、临床表现类型 337

二、标本类型与采集 341

第二节 常见虫媒病毒的生物学和流行病学特征 342

一、生物学特征 342

二、流行病学特征 346

第三节 实验室检测 353

一、标本类型与处理 353

二、检测方法 354

第四节 预防与治疗 359

一、预防 359

二、治疗 360

第十三章 反转录病毒及其检验 362

第一节 人类免疫缺陷病毒 362

一、临床表现与标本采集 363

二、生物学和流行病学特征 365

三、实验室检测 370

四、预防与治疗 374

第二节 人类嗜T细胞病毒 375

一、临床表现与标本采集 375

二、生物学和流行病学特征 376

三、实验室检测 377

四、预防与治疗 378

第十四章 朊粒及其检验 379

第一节 临床表现与标本采集 379

一、临床表现类型 379

二、标本类型与采集 380

第二节 朊粒的生物学和流行病学特征 381

一、生物学特征 381

二、流行病学特征 385

第三节 实验室检测 385

一、标本类型与处理 386

二、检测方法 386

第四节 预防与治疗 389

一、朊粒病的防治原则 389

二、朊粒病的治疗 389

参考文献 391

中英文名词对照索引 392