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第一章 基因工程实验室基本要求和常规仪器设备 1

第一节 实验室安全和基本环境要求 1

第二节 实验室常规仪器和设备 7

第三节 实验室灭菌、消毒技术 23

第二章 核酸电泳技术 29

第一节 核酸电泳的原理 29

第二节 影响核酸电泳的因素 32

第三节 核酸的检测方法 37

第四节 核酸琼脂糖凝胶电泳 41

第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 51

第三章 核酸工具酶 54

第一节 限制性核酸内切酶 54

第二节 连接酶 67

第三节 DNA聚合酶 73

第四节 DNA修饰酶 79

第五节 核酸酶 80

第四章 核酸的分离纯化 84

第一节 核酸分离纯化的基本知识 84

第二节 核酸分离纯化的基本原则 91

第五章 PCR的原理和应用 102

第一节 PCR技术的原理 102

第二节 PCR反应系统 105

第三节 PCR常规技术及其延伸技术 113

第四节 实时荧光定量PCR 117

第六章 基因工程常用载体 125

第一节 基因工程载体的概述 125

第二节 质粒载体 128

第三节 λ噬菌体载体 136

第四节 噬菌粒载体 139

第五节 柯斯质粒载体 140

第七章 目的基因的克隆 142

第一节 目的基因的克隆策略 142

第二节 基因组文库的构建 150

第三节 cDNA文库的构建 154

第四节 核酸探针的制备 162

第八章 重组子的构建、转化和筛选 167

第一节 连接方式 167

第二节 重组子的构建策略 171

第三节 重组子导入受体细胞 178

第四节 重组子的筛选方法 182

第九章 大肠杆菌表达系统 186

第一节 基因表达系统概述 186

第二节 大肠杆菌表达系统的主要表达元件 188

第三节 常见的大肠杆菌表达系统 191

第四节 外源基因在大肠杆菌中表达的主要影响因素 194

第十章 酵母表达系统 207

第一节 酵母表达系统的发展 207

第二节 酵母的克隆载体类型 209

第三节 酵母表达系统主要构成要素 212

第四节 常用的酵母表达系统 216

第五节 外源基因在酵母中表达的基本策略 221

主要参考文献 225